反季节调控对鹅PRL和PRLR基因表达的影响

为研究反季节生产期鹅催乳素(PRL)和催乳素受体(PRLR)基因表达情况,选取经反季节调控处于产蛋期(试验组)和未调控处于正常休产期(对照组)母鹅,采集垂体、下丘脑和卵巢组织,应用实时荧光定量PCR技术研究PRL和PRLR基因mRNA在下丘脑-垂体-性腺轴中的表达水平变化。结果表明:PRL和PRLR基因在垂体、下丘脑和卵巢组织均有表达,在垂体中表达量最高;PRL基因在试验组鹅垂体中表达量极显著高于对照组,而PRLR基因在试验组鹅垂体中表达量极显著低于对照组;PRL基因在试验组鹅下丘脑中表达量显著高于对照组,而PRLR基因在两组鹅下丘脑中表达元显著差异;PRL基因在两组鹅卵巢中表达量无显著差异,而PRLR基因在试验组鹅卵巢组织中表达量极显著高于对照组。反季节调控可增加鹅垂体和下丘脑中PRL基因表达,抑制垂体PRLR基因表达,增加卵巢中PRLR基因表达。     

笼养模式对黑羽番鸭PRL和PRLR基因表达的影响

为探明不同饲养方式对产蛋期黑羽番鸭催乳素(PRL)和催乳素受体(PRLR)基因表达的影响,应用实时荧光定量PCR技术,对产蛋期(30周龄)笼饲养(试验组)和地面饲养(对照组)的黑羽番鸭垂体和子宫组织进行检测,研究PRL与PRLR基因表达量的变化。结果表明:PRL和PRLR基因在垂体和子宫组织均有表达;试验组黑羽番鸭垂体中PRL基因表达量显著高于对照组,而PRLR基因表达量显著低于对照组;PRL基因在2组黑羽番鸭子宫中表达量无显著差异,而PRLR基因在试验组黑羽番鸭子宫组织中表达量极显著低于对照组。应用笼养技术可增加黑羽番鸭垂体中PRL基因的表达,抑制垂体和卵巢中PRLR基因的表达。     

瘦素及其受体在真孕和假孕母犬下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达

【目的】研究胚胎着床期瘦素(leptin)及其受体(OB-R)在真孕和假孕母犬下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异.【方法】应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测胚胎着床期真孕和假孕母犬下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫组织中瘦素及其受体的表达.【结果】瘦素在真孕和假孕母犬的下丘脑、垂体、卵巢、子宫中均有表达,在输卵管中表达阴性,瘦素受体在真孕和假孕母犬各组织中均有表达;瘦素及其受体在真孕母犬下丘脑、卵巢和子宫组织中的表达量显著高于假孕母犬(P0.05),瘦素受体在真孕母犬垂体和输卵管中的表达量显著高于假孕母犬(P0.05).真假孕母犬垂体中瘦素水平差异不显著(P0.05).【结论】瘦素及其受体对于犬的胚胎着床具有一定调节作用.     

多浪羊PRLR基因克隆测序及不同组织差异表达分析

【目的】克隆多浪羊催乳素受体基因（PRLR）CDS区序列，并检测不同组织中PRLR基因在初情期前后表达差异，为PRLR基因在初情期启动过程中发挥的主要作用提供参考依据。【方法】利用RT-PCR技术和使用相关的生物学信息软件预测其编码蛋白的结构和功能，通过qPCR检测多浪羊初情期前后各组织中的PRLR基因的表达水平。【结果】获得了多浪羊PRLR基因的CDs区序列长1 746 bp。多浪羊的3个时期5个组织中均有PRLR基因的表达。PRLR基因在初情期前多浪羊垂体组织中的表达量显著高于其他组织（P<0.05）；初情期垂体组织中PRLR基因的表达量仍显著高于其他4个组织（P<0.05），初情期后下丘脑和垂体组织中PRLR基因的表达量显著高于其他3个组织（P<0.05）；初情期垂体和输卵管组织中PRLR基因的表达量升高，初情期后显著高于初情期前和初情期后（P<0.05）。【结论】揭示了PRLR基因可能在多浪羊初情期启动的过程中参与了调控。     

通草对泌乳期小鼠泌乳性能及泌乳相关内分泌激素的影响

为了从内分泌系统角度探讨通草对泌乳动物乳腺泌乳的调节机制,采用高剂量12 g(生药)/mL和低剂量4 g(生药)/mL通草提取物灌服小鼠,检测其对泌乳期小鼠泌乳量的影响,应用ELISA法检测小鼠血清和乳腺组织匀浆液催乳素(PRL)、雌二醇(E_2)、孕酮(P)和生长激素(GH)的水平,并利用Western blot技术检测乳腺组织β-酪蛋白(β-casein)、催乳素受体(PRLR)、雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、孕酮受体(PR)、生长激素受体(GHR)蛋白的表达量。结果表明,与对照组(等量生理盐水)相比,高剂量和低剂量通草提取物均显著提高了泌乳期小鼠的泌乳量(P0.05),并明显促进小鼠乳腺β-酪蛋白的表达(P0.05)。通草提取物能显著提高泌乳期小鼠血清及乳腺组织PRL、E_2、GH的水平(P0.05)。与对照组相比,高剂量组和低剂量组小鼠血清PRL、E_2、GH的水平分别显著提高112.50%、129.15%、223.48%及49.84%、68.18%、100.76%。高剂量组和低剂量组小鼠乳腺PRL、E_2、GH的水平分别显著提高60.68%、269.35%、105.19%和32.27%、129.03%、53.68%。高剂量和低剂量通草提取物能明显提高乳腺组织PRLR、ERα、ERβ、GHR的表达量(P0.05),但对血清P及乳腺组织P、PR无显著性影响(P0.05)。可见,通草能通过提高小鼠泌乳相关内分泌激素水平及上调乳腺组织PRLR、ERα、ERβ和GHR的表达,进而促进小鼠乳腺泌乳。     

泌乳期小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中PrRP 和PrRP-R mRNA的表达规律

【目的】探讨泌乳期小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中催乳素释放肽(PrRP)及其受体(PrRP-R)mRNA的表达规律,为PrRP生理功能的确定奠定基础。【方法】选用泌乳6,12,18d小鼠,取下丘脑、垂体、卵巢组织,利用半定量PCR方法测定下丘脑、垂体、卵巢中PrRP、PrRP-R mRNA的表达水平;同时利用放射免疫法(RIA)测定血浆的孕酮(P)、雌二醇(E2)和催乳素(PRL)水平,通过双侧相关分析,探究血浆P、E2、PRL水平与下丘脑-垂体-卵巢轴PrRP、PrRP-R mRNA表达量的相关关系。【结果】泌乳期小鼠下丘脑、垂体、卵巢中均有PrRP、PrRP-R mRNA的表达,其中卵巢的PrRP mRNA表达水平最高。泌乳期小鼠血浆E2水平与卵巢PrRP mRNA的表达水平呈显著负相关,而卵巢的PrRP mRNA表达水平与垂体的PrRP-R mRNA表达水平呈显著正相关。【结论】泌乳期小鼠卵巢PrRP可能通过垂体间接抑制E2的分泌,进而调节相关泌乳活动。     

鹅PRLR基因克隆及在生殖相关组织中的表达规律

本文采用克隆、测序技术获得浙东白鹅PRLR基因c DNA序列,利用实时荧光定量PCR技术检测鹅产蛋期和就巢期PRLR基因在生殖相关组织中的表达规律,为揭示PRLR基因在生殖过程中的功能提供资料。结果表明,在获得的浙东白鹅PRLR基因c DNA序列中,其中编码区2496 bp可编码831个氨基酸,与其他鹅PRLR序列相比发生了T667C、G738A、C757T、G1047A突变,其中T667C引起氨基酸R-C的变化,C757T处引起氨基酸W-R的变化。在产蛋期和就巢期时,垂体中PRLR基因mRNA表达量均显著性高于下丘脑、卵巢和输卵管,其他组织间表达量没有显著性差异。同一组织在产蛋期和就巢期之间存在显著差异,部分组织达极显著差异。本文试验结果为继续开展鹅的就巢性方面的研究提供了一些数据。     

光照对兴国灰鹅PRL基因表达的影响

为调节兴国灰鹅繁殖的季节性,选择健康且体重均匀的兴国灰鹅进行短光照处理,分析光照处理对兴国灰鹅的垂体、下丘脑、卵巢和输卵管4个组织催乳素（PRL）基因表达的影响。研究结果表明,PRL基因 mRNA在垂体、下丘脑、输卵管和卵巢的表达依次降低,垂体的表达最高,卵巢最低。与自然光照处理（对照）相比,试验组垂体和输卵管PRL的表达显著低于对照组（P〈0.05）,下丘脑和卵巢PRL的表达在试验组和对照组间无明显差异,表明光照处理的兴国灰鹅在产蛋期PRL基因表达明显减少。     

实时荧光定量RT-PCR检测狮头鹅繁殖周期中PRL mRNA的表达

以就巢性极强的狮头鹅为研究对象,选取不同繁殖阶段的狮头母鹅各6羽,采用荧光定量RT-PCR方法测定下丘脑-垂体-性腺轴中PRL mRNA的表达水平.结果表明:PRL mRNA在狮头鹅下丘脑、垂体和卵巢中均有表达,垂体PRL mRNA的表达量最高(P＜0.01),下丘脑最低;在整个生殖周期内,就巢期PRL mRNA的表达水平高于非就巢期,休产期最低.由此可见,下丘脑-垂体-性腺轴中PRL mRNA的表达水平与狮头鹅的繁殖周期密切相关,PRL是就巢行为维持和发展的关键激素.     

芦丁对去卵巢处女大鼠乳腺发育作用的影响

 【目的】通过考察芦丁对去卵巢处女大鼠内分泌激素水平、激素受体表达的影响以及乳腺组织形态学的观察,来研究芦丁促进乳腺发育的类雌激素样作用。【方法】试验选择32只去卵巢处女Wistar大鼠,随机分为四个处理组,假手术Sham组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;卵巢切除Ovx组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;芦丁Ovx＋Rut组,每日每只灌服芦丁(60mg&#8226;kg-1BW)一次;雌二醇Ovx＋Est组,每周每只肌注雌二醇(60µg&#8226;kg-1BW)一次。试验为期两周,试验结束后采集大鼠血液样品、乳腺组织样品等,运用放免技术检测血浆和乳腺组织中雌激素(E2)、催乳素(PRL)、生长激素(GH)的含量,RT-PCR技术检测乳腺组织这些激素受体的表达量,并进行乳腺组织形态学观察。【结果】试验结果显示,大鼠血浆中E2的水平,Ovx＋Rut组和Ovx＋Est组高于Ovx组(P＜0.05),该两组间差异不显著(P＞0.05),Ovx＋Rut组水平低于Sham组(P＜0.05),Ovx＋Est组与Sham组差异不显著(P＞0.05),乳腺组织中E2含量呈现相同规律;PRL在血浆与乳腺组织中的含量都表现为Ovx组＜Ovx＋Rut组＜Ovx＋Est组＜Sham组(P＜0.05),血浆中GH的含量Ovx组低于Ovx＋Rut组低于Ovx＋Est组低于Sham组(P＜0.05),在乳腺组织GH含量,Ovx组低于Ovx＋Rut组和Ovx＋Est组(P＜0.05),Ovx＋Rut组低于Sham组(P＜0.05),Ovx＋Rut组和Ovx＋Est组间差异不显著(P＞0.05),Ovx＋Est组与Sham组差异不显著(P＞0.05);大鼠乳腺组织中雌激素受体ER、催乳素受体PRLR、生长激素受体GHR在Ovx组、Ovx＋Rut组、Ovx＋Est组、Sham组组间数值依次增大(P＜0.05),表现相同变化趋势;乳腺组织形态学观察发现,Ovx＋Rut组、Ovx＋Est组、Sham组乳腺组织的发育显著好与Ovx组(P＜0.05)。【结论】芦丁能够提高去卵巢处女大鼠E2水平,促进PRL、GH分泌,上调乳腺组织中ER、PRLR、GHR的表达量。     

不同饲养方式对蛋鸭产蛋性能的影响及其机制

旨在探讨单笼饲养、双笼饲养、散养和网上平养四种养殖模式对蛋鸭（Anas platyrhynchos）产蛋性能的影响及其影响机制。191羽优质蛋鸭品种山麻鸭被分成单笼、双笼、网上平养、散养四组,记录其产蛋率和日耗料量,研究不同饲养模式对产蛋性能的影响。同时,应用real-time PCR技术检测在不同养殖模式下山麻鸭下丘脑、垂体、卵巢、肾上腺等组织中产蛋相关基因的表达,筛选出其中差异表达基因。结果表明,双笼饲养的山麻鸭产蛋性能和饲料转化率最低,单笼饲养的产蛋性能最佳。产蛋相关基因差异表达检测发现,在不同饲养模式下,促肾上腺激素释放激素（corticotropin-releasing hormone, CRH）基因在下丘脑和垂体组织中,阿黑皮素原（proopiomelanocortin, POMC）基因在垂体组织中的表达无显著差异。在双笼饲养模式下,黑素皮质素受体（melanocortin 2 receptor, MC2R）基因在山麻鸭垂体中的表达量最高,催乳素受体（prolactin receptor, PRLR）基因在卵巢中表达量最高,而骨形态发生蛋白4（bone morphogenetic proteins 4,BMP4）基因在卵巢中表达量最低。结果提示,（1）双笼饲养会导致蛋鸭的产蛋性能下降; （2）双笼饲养的蛋鸭可能长期处于应激状态,诱使垂体中MC2R基因高表达,进而调控HPA轴激素分泌,抑制HPG轴的活性,使得卵巢中的PRLR及BMP4等产蛋相关基因异常表达,两个信号通路交互作用,最终影响了蛋鸭的产蛋性能。     

光照时间和环境温度对种鹅繁殖系统及相关激素mRNA表达、分泌的影响

【目的】研究光照时间和环境温度对扬州鹅种鹅繁殖系统及相关激素mRNA表达、分泌的影响,探明光照时间和环境温度对种鹅繁殖机能的作用特点。【方法】取接受自然光照且日照时长逐渐缩短的200日龄种鹅作为试验对象,试验初期日照时长约为9.7 h·d^-1、气温5℃左右。采用2×3完全随机试验设计,设2个温度处理（0-5℃、25-30℃）和3个光照时间处理（8、12、16 h）,其中光照时间处理在正常白昼基础上进行增减,将120只成年母鹅随机分至6个处理组,每个处理组20只,全封闭饲养,自由采食、饮水。试验第30天,从每个处理随机取5只鹅翅静脉采血3 mL,用于测定相关激素指标,同时从每个处理中随机取3只鹅,屠宰,取下丘脑和垂体速冻、超低温保存,用于测定相关基因表达量;分离生殖系统,进行重量或长度测定,同时取输卵管膨大部制作组织切片。【结果】①16 h光照处理组种鹅血清促黄体素（LH）浓度显著高于8 h和12 h光照处理组（P＜0.05）,16 h光照处理组种鹅血清催乳素（PRL）浓度显著高于12 h光照处理组（P＜0.05）。高温（25-30℃）处理组种鹅血清PRL浓度显著高于低温（0-5℃）组（P＜0.05）。光照时间和环境温度处理对种鹅血清LH、PRL和雌二醇（E₂）浓度的影响存在显著互作效应（P＜0.05）。②12 h光照处理组种鹅卵巢指数、卵泡指数均显著大于16 h光照处理组（P＜0.05）,8 h光照处理组种鹅卵泡数显著大于16 h光照处理组（P＜0.05）,12 h光照处理组种鹅输卵管长显著大于8 h、16 h光照处理组（P＜0.05）;环境温度对种鹅卵巢指数、卵泡指数、卵泡数、输卵管指数和输卵管长未产生显著影响（P＞0.05）。③8、12 h光照处理组和高温处理组种鹅的输卵管膨大部颜色鲜红,假复层柱状上皮和固有层均较厚,皱褶明显,分泌腺丰富;16 h光照处理组、低温处理组种鹅的输卵管膨大部颜色暗红,假复层柱状上皮和固有层较薄,皱褶模糊,分泌腺较少。④16 h光照处理组种鹅垂体PRL基因表达量极显著高于8、12 h光照处理组（P＜0.01）。⑤光照时间与环境温度对种鹅生殖系统、激素基因表达影响的互作效应不显著（P＞0.05）。【结论】16 h长光照抑制了卵巢、卵泡的生长发育,12 h光照增长了输卵管的长度;16 h长光照提高了PRL基因的表达丰度。综合各方面的情况,长光照抑制了种鹅的繁殖机能,扬州鹅种鹅的最适光照时间为12 h。高温提高了种鹅血清LH、PRL浓度,低温影响了输卵管组织结构,故种鹅饲养期间要适当控温,尽量避免种鹅暴露于极端温度环境。     

太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因多态与前期产蛋性状关系研究

采用PCR-SSCP法对太湖鸡催乳素(PRL)、催乳素受体(PRLR)和促卵泡激素β亚基(FSHβ)基因进行多态性检测,并分析其与开产50%后20周产蛋性状的关系。结果表明:PRL和FSHβpro2的基因型频率都是AA型最高,BB型最低,等位基因频率也是A高于B,FSHβ基因exon3位点没有多态;PRLR只有两种基因型,外显子3是AA型频率高于BB型,外显子6是CC型频率高于DD型,且等位基因A和C的频率分别高于等位基因B和D的频率。太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因开产50%后20周产蛋性状的不同基因型间差异均不显著(P>0.05),但是PRLR基因外显子3的开产50%后9~11周蛋重平均数基因型间差异接近显著(P=0.08)。基因间交互作用分析发现,催乳素受体基因外显子3和外显子6有极显著的交互作用(P<0.01),产蛋量较高的合并基因型AADD可以作为太湖鸡选育的参考。     

猪发育期NPY-Y1和GPR54受体基因的表达规律研究

[目的]研究猪发育期NPY-Y1和GPR54受体基因的发育性变化。[方法]分别选取初生、60、120、初情期、180日龄的苏姜猪母猪各3头,采集下丘脑、垂体、卵巢组织样品,提取组织RNA,采用荧光定量PCR分析NPY-Y1、GPR54受体基因的发育性变化。[结果]下丘脑、垂体与卵巢内NPY-Y1 mRNA从初生到初情期表达量逐渐下降,在初情期达到最低,初情期后呈上升趋势。在3种组织内,初情期与其他时期NPY-Y1 mRNA表达量均存在显著差异(P<0.05);GPR54 mRNA从初生到初情期表达量逐渐上升,在初情期达到最高,初情期后呈下降趋势。在3种组织内,初情期也与其他时期GPR54 mRNA表达量也均存在显著差异(P<0.05)。[结论]猪发育期NPY-Y1基因与GPR54基因表达存在负相关性。     

Influence on Cellular Signal Transduction Pathway in Dairy Cow Mammary Gland Epithelial Cells by Galactopoietic Compound Isolated from Vaccariae segetalis

The galactopoietic mechanism of Vaccaria segetalis is still unknown. Understanding dibutyl phthalate (DBP) separated from Vaccaria segetalis on the expression of lactation signal transduetion genes of mammary gland epithelial cells, including prlr, erα, akt1, socs2, pparγand elf5, will be helpful to reveal the molecular mechanism. Western blot and qRTPCR were used to study the change of prlr, erα, akt, socs2, pparγ, and elf5 expression at mRNA and protein level. Colocalization expression of prolactin receptor (PRLR) and estrogen receptor α (ERα) was observed by immunofluoreseence;the expression changes of miRNAs (21, 125b, 143, and 195) and the secretion of β-casein and lactose were detected byqRT-PCR and RP-HPLC. The results showed that Vaccaria segetalis active compound had similar fuctions as estrogen and/or prolactin (PRL) in dairy cow mammary gland epithelial cells (DCMECs), increased the expressions of prlr, erα, akt1,and elf5 genes, while repressed ppaγ expressions. DBP promoted socs2 mRNA expression, but its protein expressionswere repressed. Furthermore, both DBP and PRL could repress the expressions of miRNA-125b, miRNA-143 and miRNA-195 in DCMECs. DBP could repress the expression of miRNA-21, while the influence of PRL on miRNA-21 was not certain.DBP could promote the lactation ability of DCMECs by regulating the ER and PRLR cellular signal transduction pathway.     

不同投饲频率对合浦鹅的养分利用和生长性能的影响

[目的]探讨饲养期间不同投饲频率对鹅的养分利用及生长性能的影响.[方法]将36羽体重相似的21日龄合浦鹅随机分为两组,每组设3个重复,每重复6羽(3公3母),预饲1周后进行42 d的饲养试验,期间对照组每天分别在8:00、10:00、12:00、14:30、17:00和21:00时投料6次;试验组投料3次,分别在08:00、14:30和21:00.鹅自由采食和饮水.后期同时进行消化代谢试验,试验结束时进行血液生化指标和屠宰性能测定.[结果]试验前、后期间,两组鹅的日均饲料采食量、日均增重和料重比均无明显差异(P>0.05);试验组鹅的中性洗涤纤维和半纤维素的表观消化率明显优于对照组(P<0.05),其他养分的表观消化率也有高于对照组的趋势,但无显著差异(P>0.05);两组鹅的屠宰性能和血液生化指标也无明显差异(P>0.05).[结论]在饲养实践中对28日龄后的鹅采用3次投饲是可行的.     

不同遗传基础鹅的生长发育规律及屠宰性能

利用常规育种手段得到卡洛斯鹅(♂)和吉林籽鹅(♀)的杂交鹅F1代,通过纯繁(卡洛斯鹅、籽鹅)、回交得到4组不同遗传基础的杂交鹅,测定0~10周龄试验鹅的体重和体尺,探究其生长发育规律,并测定10周龄鹅的屠宰性能,进行相关性分析。结果表明:4组试验鹅早期生长速度快,1~4周龄生长强度大,4~10周龄体重增长快。10周龄时,体重与体斜长、颈长、胫长、胸宽、胸深呈显著正相关。Ⅳ组(F1♂×卡♀)屠宰率达到87.51%,半净膛率为82.68%,全净膛率为75.27%,分别比Ⅱ组(吉林籽鹅纯繁组)高7%、10%、14%。4组试验鹅的屠宰性能指标间存在着较强的相关性。     

溆浦母鹅产蛋前后卵巢和输卵管发育的形态观察

对２０，２２，２４，２６和２８周龄溆浦母鹅卵巢和输卵管形态结构的观察结果表明，母鹅卵巢和输卵管的形态结构在开产蛋前迅速发育成熟，性成熟时母鹅输卵管明显地分为漏斗部、蛋白分泌部、峡部、子宫部和阴道部５个部分，产蛋期卵巢中出现萎缩卵泡和变性卵泡．     

促性腺激素释放激素在不同品种水牛卵巢中的免疫组化定位

【目的】了解促性腺激释放激素（GnRH）在广西沼泽型水牛与摩拉杂交水牛卵巢中定位表达的异同点,为深入阐明GnRH调节卵巢功能的机制提供理论依据。【方法】采用免疫组化SP染色法对广西沼泽型水牛和摩拉杂交水牛卵巢中GnRH及其受体的分布表达进行对比研究。【结果】两种不同品种水牛卵巢中均存在大量的GnRH阳性细胞,且主要位于颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内;通过比较显示,两种不同品种水牛卵巢GnRH阳性细胞个数差异极显著（P〈0．01）,但GnRH阳性细胞大小及其平均光密度的差异均不显著（P〉0．05）。【结论】不同品种水牛卵巢的GnRH分布差异可能与繁殖性能有关,但主要分布于巢卵颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内。