象耳豆根结线虫的研究进展

象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)致病力强、寄主范围广,种群扩散迅速,给农作物造成毁灭性危害,尤其在热带及亚热带地区根结线虫常年危害严重,逐渐成为热带和亚热带地区最重要的根结线虫之一。随着现代农业的发展,设施大棚和温室在生产上的应用不断增多,导致土壤温度上升,象耳豆根结线虫向内地蔓延速度不断加快,已受到国内外研究者的广泛关注。从象耳豆根结线虫的分布、鉴定、防治和进化树构建等方面进行综述,旨在为同类研究与应用提供参考。     

海南岛茄果类蔬菜根结线虫种类鉴定

应用形态学、同工酶分析及mtDNA分析等鉴定方法对采自海南岛12个市县的14个茄果类根结线虫进行鉴定,结果发现14个种群中,6个样本为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii),2个样本为象耳豆根结线虫(M.enterolobii)和南方根结线虫(M.incognita)的混合种群,另外6个样本为常见的南方根结线虫(M.incognita)。所有14个种群中象耳豆根结线虫的数量跟南方根结线虫的种群数量相同,证明象耳豆根结线虫种群已得到进一步扩散,其对海南冬季瓜菜生产特别是茄果类蔬菜的危害日趋严重,应引起广泛注意。     

甘薯根结线虫病病原——象耳豆根结线虫的鉴定

自福建省泉州市发生严重根结线虫病的甘薯地采集线虫样本,经形态学观察发现该线虫与象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)原始描述相符;rDNA-ITS序列分析表明,其与GenBank中象耳豆根结线虫同区域序列的相似性达99%以上;利用象耳豆根结线虫特异性引物进行PCR扩增,得到236 bp的特异性片段,据此确定所采集的甘薯根结线虫为象耳豆根结线虫.这是首次在福建省甘薯上发现象耳豆根结线虫.     

植物罹病组织中象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法

【目的】建立一种基于环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术,从植物罹病组织中直接检测象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）的快速检测方法,为象耳豆根结线虫的监测和防治提供技术支持。【方法】根据象耳豆根结线虫与其它根结线虫ITS序列差异设计LAMP特异性引物,通过对LAMP反应条件中的Mg2+、dNTPs、甜菜碱和反应时间进行优化,同时对检测体系的特异性和灵敏度进行验证,建立一种从罹病植物组织中检测象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法。【结果】象耳豆根结线虫LAMP检测体系优化结果表明在Mg2+的浓度为5.0 mmol•L-1、dNTPs的浓度为2.4 mmol•L-1、不添加甜菜碱、反应时间为45 min的条件下,扩增效率最优。本研究建立的LAMP检测方法能够从11个植物线虫种群中特异检测出象耳豆根结线虫,检测灵敏度为1/200000头线虫DNA,比普通PCR灵敏100倍,能够直接从植物根结中检测出象耳豆根结线虫,准确度为100%。【结论】本研究以rDNA-ITS序列为靶基因建立象耳豆根结线虫LAMP快速分子检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简单、快速、经济等特征,能够从罹病植物组织中快速准确地检测出象耳豆根结线虫,具有极高的实践应用价值。     

福建省象耳豆根结线虫的鉴定及分子检测

从福建省闽南地区的胡萝卜、辣椒和空心菜根系发现一种线虫,通过形态鉴定,结合ITS1-5.8S-ITS2 r DNA区、28S D2-D3区、COⅡ/IrRNA线粒体基因和线粒体DNA 63 bp重复区序列分析等分子生物学方法,将其鉴定为象耳豆根结线虫;采用特异性引物Me-F/Me-R对不同田块的象耳豆根结线虫种群进行进一步检测,结果表明,空心菜为象耳豆根结线虫的新寄主;受侵染的番石榴可能是闽南地区蔬菜象耳豆根结线虫病的重要初侵染源.由此说明,象耳豆根结线虫已经成为福建省蔬菜上的重要病原物,对蔬菜产业发展具有潜在重大威胁.     

番茄品种Mi基因对根结线虫抗性的检测

采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对国内市场上的26个番茄Solanum lycopersicum品种进行Mi基因检测.结果表明,特璐丝、红丽、TRS-401、仙客1号和仙客5号5个品种含有纯合体Mi基因,其余品种均不含Mi基因.进一步用南方根结线虫Meloidogyne incognita和象耳豆根结线虫M.enterolobii对这26个品种进行接种试验,计算根结率和根结指数.结果发现,南方根结线虫和象耳豆根结线虫侵染不含Mi基因的21个番茄品种的根结率为100%,根结指数为100;而含Mi基因的5个番茄品种对南方根结线虫的根结率为1%~5%,根结指数为0~4,而对象耳豆根结线虫的根结率为26.7%~45.6%,根结指数为56~64.表明含Mi基因的番茄高抗南方根结线虫,但对象耳豆根结线虫感病或比较感病.     

海南省番石榴根结线虫病病原的种类鉴定及其寄主范围的测试

对源自海南省3地侵染番石榴的9个根结线虫群体进行了形态观察和同工酶分析,对4个代表性群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试.同工酶鉴定结果表明,病原线虫为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii).生物测试发现或证实:携带Mi基因的抗性番茄以及菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为供试象耳豆根结线虫群体的高度适宜寄主,大豆为低度适宜寄主,棉花为非寄主.寄主范围的测试结果提示,象耳豆根结线虫可潜在地对农业生产造成巨大的经济损失.     

象耳豆根结线虫对7个品种番茄生长的影响

【目的】探究象耳豆根结线虫 Meloidogyne enterolobii 对番茄品种的最低接种数量,以及接种量对7个番茄品种致病力及生长的影响.【方法】 通过温室大棚盆栽番茄,将孵化的象耳豆根结线虫二龄幼虫悬浮液制成10个不同浓度,通过灌根的方法将悬浮液接种至番茄根部,60 d后,测定番茄植株高度、地上部分鲜质量、根结数量、卵块数量和根内幼虫总数量,比较致病力差异.【结果和结论】象耳豆根结线虫二龄幼虫最低接种量为0.08条·cm^-3,与其他不同种类的根结线虫相比,具有更强的致病力.象耳豆根结线虫强致病力对番茄抗性和易感病品种均造成严重伤害.     

大庆温室黄瓜根结线虫病原鉴定

[目的]明确大庆温室黄瓜根结线虫的种类,为黄瓜根结线虫病的防治提供理论依据。[方法]从大庆市让湖路区温室采集感染根结线虫的黄瓜根部和根际土壤,分别采用直接剥离法和贝尔曼法分离获得线虫卵囊和雄虫,并由卵囊孵化培养得2龄幼虫,采用显微形态观察结合分子生物学方法对其进行鉴定。[结果]形态学观察表明采集的样本线虫与象耳豆根结线虫(Meloido-gyne enterolobii)特征基本相符;rDNA-ITS序列分析表明,与GenBank中象耳豆根结线虫的序列相似度为98%～100%,采用邻接法构建系统发育树,大庆根结线虫M229、M230和M231与登录号为KF418368.1和JF309154.1等5个象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)处于同一分类地位。[结论]从大庆让湖路区温室采集的黄瓜根结线虫为象耳豆根结线虫。     

深圳市蔬菜基地根结线虫的种类和分布

为明确深圳市威胁蔬菜生产的根结线虫种类和种群分布,对其主要蔬菜基地的根结线虫进行调查,并采用传统形态学与分子生物学结合的方法进行种类鉴定。结果表明:在深圳市13个蔬菜基地的121个调查采样点中,有11个蔬菜基地的74个采样点发现根结线虫Meloidogyne spp.,蔬菜根结线虫发生率为61.16%;从采集的样本中纯化得到76个根结线虫种群,并鉴定出4种根结线虫,其中69个种群为南方根结线虫M.incognita,3个种群为爪哇根结线虫M.javanica,1个种群为花生根结线虫M.arenaria,3个种群为象耳豆根结线虫M.enterolobii;同时发现2个采样点有南方根结线虫和象耳豆根结线虫的复合种群。     

蔬菜根结线虫综合防治研究进展

详细介绍了国内外蔬菜根结线虫综合防治的研究进展情况。对蔬菜根结线虫的生物习性、危害症状、鉴定方法进行了总结归纳,从农业防治、化学防治和生物防治等方面对蔬菜根结线虫的防治措施进行了重点分析,强调了综合治理对蔬菜根结线虫防治的重要性,并探讨了蔬菜根结线虫综合治理的发展趋势。     

根结线虫三种天敌真菌生物学特性的研究

淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus)寄生南方根结线虫卵90%,厚壁轮枝霉（Verticillium chlamydosporium）寄生卵85%,节丛孢菌（Arthrobotrys sp.）捕食二龄幼虫达65%。采用常规方法,研究了三种真菌的生物学特性。淡紫拟青霉最适培养温度为30℃;厚壁轮枝霉为25℃,节丛孢菌亦为25℃;在麦粒上生长最好;三种真菌撮适pH值为6～8。     

花生根结线虫对花生的致病性研究

本研究以花生根结线虫（Meloidogyne arenaria(Neal.1889)chiwood,1949)的二龄幼虫和病土作接种试验，通过对线虫侵染、危害情况和茯生病组织切片的观察，进一步证明花生根结线虫对花生的致病性。     

南方根结线虫寄生真菌的分离和鉴定

 1992年和1993年,在广东和广西采集南方根结线虫样品44个,分离129个菌株,它们分属9属18种.     

马铃薯培养根结线虫效果的研究

在比较根结线虫Meloidogyne spp．在番茄Lycopersicum esculentum和马铃薯Solanum tuberosum上培养效果的基础上，研究了不同马铃薯品种对根结线虫的培养效果．结果表明，南方根结线虫M．incognita在所有4种供试马铃薯品种上均能较好地繁殖，在大西洋和958品种上繁殖效果明显好于其他2个供试品种；南方根结线虫、爪哇根结线虫M,javanica和花生根结线虫M.arenaria均可在马铃薯958品种上进行良好繁殖，但不同根结线虫的繁殖效果有一定差异，其中南方根结线虫的繁殖最好，而爪哇根结线虫和花生根结线虫则相对较差．     

根结线虫对寄主核酸含量影响的研究

用紫外光吸收法测定不同种根结线虫侵染的核酸含量,结果表明:在植物体内根结中核酸含量显著高于同株健部根及健株健根;病株除根结外,不同部位核酸含量均显著低于健株对应部位,全株也显著较健株含量低。这一趋势在根结内线虫核酸量低的情况下也存在。     

根结线虫的生物防治研究进展

根结线虫分布广泛且危害严重,已成为近年来植物病虫害防治的重点。详细阐述了根结线虫的致病机理,综述了几种防治根结线虫的途径,并对其生物防治前景进行了展望。     

两种农药对南方根结线虫的室内毒力测定

采用直接触杀法测定15%卫根微乳剂和15%阿维.毒乳油两种农药对南方根结线虫二龄幼虫的杀线虫活性。结果表明：两种农药对南方根结线虫均有杀线虫活性,其中15%卫根微乳剂LC50值和LC90值分别为1.9515,10.7637 mg/L,而15%阿维.毒乳油LC50值和LC90值分别为40.3744,545.7819 mg/L,室内毒力测定说明15%卫根微乳剂对南方根结线虫具有更强的杀虫活性,明显高于15%的阿维.毒乳油。     

20种植物提取物对南方根结线虫的毒杀活性

采用浸渍法测定13科20种植物乙醇提取物对南方根结线虫的毒杀活性。结果表明：酸豆、牛角瓜、番荔枝、苦楝乙醇提取物以10mg／mL处理后24h,供试2龄线虫校正死亡率分别为82．13％、85．71％、89．28％、89．28％,处理后48h,校正死亡率分别为89．01％、96．34％、92．67％和96．34％,均具有强杀线虫活性;毒力测定结果表明：处理后24h和48h,4种提取物的LC50由小到大顺序为：酸豆〈牛角瓜〈番荔枝〈苦楝。     

Sources for Heat-Stable Resistance to Southern Root-Knot Nematode （Meloidogyne incognita） in Solanum lycopersicum

Southern root-knot nematode （Meloidogyne incognita） is a major problem in vegetable production in China due to the expansion of plastic tunnel and solar greenhouse. Using resistant cultivars is an effective approach to control the disease. Nine genes, Mi-1 to Mi-9, have been reported and only Mi-1 has been successfully used in tomato breeding. However, Mi-1 is inactive at a temperature above 28~C. In order to identify sources for heat-stable resistance to southern root-knot nematode, 53 genotypes of tomato （Solarium spp.） were inoculated with an isolate of M. incognita in the growth chamber at 28 or 32℃ for initial screening. 28 lines had less than 25 galls and were considered as resistant candidates. The top 60% （16 in total） of resistant candidates obtained from each temperature were subject to re-evaluation at 32~C using the same nematode isolate. Three lines ZN17, ZN 48, and LA0385 showed heat-stable resistance with an average of 10 galls or less per plant. LA0385 is a wild species, while ZNI7 and ZN48 are elite breeding lines. These lines were grown in a greenhouse for two seasons, and also showed high resistance with less than 10 galls per plant. Thus they were considered as good sources for breeding resistance to southern root-knot nematode in tomato.