四倍体刺槐茎段组织石蜡切片的制作方法

以传统石蜡切片方法为基础,针对林木茎段木质化程度高、硬度和脆性大的特点对固定、软化、脱水、透明、染色等具体步骤进行了改进,并成功应用于四倍体刺槐生根过程插穗基部解剖学研究。结果表明:较传统方法切片时组织不易碎,切片结构完整,减少了脱水时间,缩短了制片周期;获得了厚度为8 μm且染色清晰、细胞结构完整的林木茎段横切面切片;四倍体刺槐插穗石蜡切片可清晰的观察大量能够反映生根各时期发育特征。该方法为进一步从解剖学上研究林木茎段组织生长机制提供基础,为探究其组织形态变化提供了新的技术方法。     

杉木种鳞石蜡切片工艺优化研究

为精确观察杉木种鳞内部的细胞结构,经过对2种不同固定液、3种不同软化处理、4种不同脱水与透明处理、优化浸蜡时间和温度以及后续包埋、染色等工艺步骤对比,优化了杉木种鳞石蜡切片工艺。结果表明:杉木种鳞石蜡切片的优化工艺和方法为,FAA和FPA两种固定液固定效果相同,均能有效的固定材料;12 h的盐酸水溶液软化效果最佳;最佳脱水时间为每级2 h,透明时间为每级1 h。该优化工艺有效克服了蜡带不连续、切片不完整的缺陷,可获得清晰完整的杉木种鳞细胞结构图。     

麻栎(Quercus acutissima)高度木质化雌花石蜡显微制片的软化方法

以花果发育周期2年的麻栎(Quercus acutissima)为试验材料,测试不同组织制片软化方案,摸索适合石蜡切片显微制片方法,并对不同软化处理后的材料进行切片和花粉管荧光染色,以确定对下游试验的影响。结果表明,对于雌花发育早期,花柱及子房壁木质化程度较低的材料,采用1.0 mol/L NaOH、1.0 mol/L HCl和10%Na_2SO_3高温高压软化各1.5 h,均可在1 d内完成软化及解剖,但对木质化程度高的雌花材料效果不佳。甘油乙醇软化剂、冰醋酸软化2种方法软化木质化程度高的雌花材料有一定软化效果,但耗时较长,处理需14～180 d。采用5%乙二胺溶液,40℃处理对高木质化雌花进行软化效果最佳,仅需2～4 d即可达到预期。经乙二胺软化后材料褐化明显,需要进一步漂白,对下游组织染色有一定影响,但仍为高木质化雌花软化的最佳处理方法。该研究为高木质化花材料的显微制片软化方案提供重要解决方案。     

石榴花芽石蜡切片制作方法的改良

[目的]摸索适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法。[方法]以"突尼斯软籽"石榴花芽及胚珠为试材,在传统石蜡切片方法的基础上,结合石榴花芽鳞片厚、子房多室的特点,对样品处理、软化、透明、浸蜡、染色等重要制片环节进行研究。[结果]不同样品处理方式对比发现,将子房纵切4瓣进行固定,切片效果较好。软化结果表明,纱布包裹花芽浸入水中加热至沸腾30 min,有助于提高制片效果。不同染色方式对比发现,爱氏苏木精染色法更适合石榴胚珠切片观察。[结论]通过优化常规石蜡切片方法,得到了适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法,该方法同样适用于与石榴花芽及胚珠结构类似的其他结构。     

毛花猕猴桃花芽石蜡切片制作方法的改良

为摸索适合毛花猕猴桃花芽的石蜡切片方法,以毛花猕猴桃"赣猕6号"花芽为试材,在传统石蜡切片方法的基础上,结合毛花猕猴桃花芽多茸毛的特点,对石蜡切片制作过程中样品处理、脱水、透明与渗蜡、包埋与切片及染色方式进行改良。研究结果表明,FAA固定液固定后利用解剖针剔除花芽上的茸毛,不易造成切片组织错位、破碎,切出完整的组织切片效率更高。延长脱水及渗蜡等步骤的时间及提高温度后,切片染色效果均匀,图片清晰,细胞轮廓明显。本研究通过改良传统石蜡切片方法,获得了适合毛花猕猴桃花芽形态结构观察的石蜡切片方法,为后期花芽分化观察奠定了研究基础。     

菊花不同时期各组织器官石蜡切片制作条件的优化

[目的]根据菊花不同时期各组织器官特性,设计试验对石蜡切片制作条件进行优化,旨在筛选针对特定组织的节省时间和成本且效果最佳的石蜡切片制作条件。[方法]取不同时期菊花根、茎、叶、花等样品,采用常规石蜡切片制作方法并结合试验过程中总结的固绿快速染色法,设计不同的渗蜡时间、切片厚度及染色方法,对各组织器官进行石蜡切片制作,经显微拍照后筛选出各组织最适石蜡切片的制作条件。[结果]经筛选发现,在渗蜡时间方面,渗蜡充分幼根需5 d,老根6 d,幼茎6 d,老茎7 d,叶片4 d,花芽5 d,舌状花4 d。在切片厚度方面,最适切片厚度幼根为16μm,老根20μm,幼茎12μm,老茎12μm,叶片25μm,花芽10μm,舌状花16μm。在染色方法的选择方面,幼根经番红-固绿双重染色后效果最佳,老根则首选番红-固绿双重染色法或番红单染法;幼茎和老茎同样首选番红-固绿双重染色法或番红单染法;叶片、花芽及舌状花以操作最为简单的固绿快速染色法为首选。[结论]试验针对菊花不同时期各组织器官所筛选的最优石蜡切片制作条件,能够最大限度地节省时间和成本,并能达到试验观察所需的最优效果。     

大叶藻胚的石蜡切片制作方法

研究固定方法、脱水及浸蜡时间、染色方式对大叶藻胚石蜡切片制作效果的影响。结果表明,采用标准固定液（FAA）固定48 h以上,脱水每级梯度时间2 h,分3次浸蜡（每次30 m in）,苏木精-伊红染色,可制作出染色清晰、组织结构完整的大叶藻胚切片。     

微波快速石蜡切片法观察水稻叶片组织

 石蜡切片是植物解剖学和病理学观察的重要手段。该方法从取样到切片完成约需一周的时间,操作周期较长。本试验对水稻品种丽江新团黑谷的叶片分别进行了微波石蜡和传统石蜡的切片并用苯胺蓝染色对结果进行比较。在微波石蜡切片中通过对固定、脱水和浸蜡等操作的改进使得该方法只需约3h即可完成切片。微波石蜡切片组织的完整性和染色的效果与传统石蜡切片相近,叶片的表皮、叶肉细胞和维管束等不同叶片结构均可清楚地进行显微观察和拍照。结果显示,可利用微波石蜡方法对水稻叶片进行制片且可较大幅度缩短处理的时间,提高工作效率。     

含羞草石蜡切片的制作

通过对含羞草进行取材、固定、脱水、透明、浸蜡、切片、脱蜡、染色、透明等一系列过程的试验研究,掌握了含羞草石蜡切片的制作方法,总结出了含羞草石蜡切片制作过程中的关键技术,并通过显微观察分析,从解剖学上为研究含羞草的运动机理提供了理论基础。     

果蝇生殖包囊固定染色后的荧光特性（摘要）

[目的]探索果蝇卵巢及生殖包囊经过常规固定和染色后的荧光特性,为荧光组织学的发展提供第一手资料。[方法]以黑腹果蝇卵巢为试验材料,用Bouin氏液固定,石蜡切片后分别用HE、苏木精、伊红染色,分别在明场（白光）、绿色、蓝色和紫外激发光下观察、拍照。[结果]3种方法染色后,再经不同激发光激发,生殖细胞和体细胞可发出不同颜色的荧光,细胞中脂类、核酸及蛋白质也可分别发出各自特异性的荧光。[结论]常规染色剂可以分别赋予生殖细胞和体细胞各自不同的荧光特性,也可赋予细胞内不同物质成份各自不同的荧光特性。     

新疆细毛羊消化管的研究

一、材料与方法屠宰新疆细毛羊7只(公羊3只,母羊4只),分段取材,用Bouin氏液固定,石蜡包埋切片。 H.E染色。对照染色镀银。     

云南野生乌饭树扦插繁殖试验

为了研究云南野生乌饭树扦插成活的关键技术,以便更好地应用推广。以云南乌饭树原变种乌鸦果(Vaccinium fragile Frach.)为试材,研究了不同扦插繁殖季节、不同外源激素处理、不同插条类型和扦插繁殖土壤基质对乌饭树的扦插繁殖成活率的影响。结果表明:采用外源激素处理能提高乌饭树插条的成活率,同时乌饭树在夏季和秋季的扦插繁殖成活率较高,而春季和冬季较低。硬枝的成活率高于嫩枝,河沙、草炭和混合土壤基质均适合乌饭树的扦插繁殖,而红壤则明显抑制该物种的扦插成活率。     

观察植物木质部的3种切片方法比较

为探讨出一种能更清楚有效地观察植物木质部结构的细胞学切片方法,以甘蓝型油菜N529及拟南芥野生型col-4为材料,利用快速冷冻切片法、石蜡切片法及徒手切片法制备植物茎组织切片。切片经组织化学染色：1%间苯三酚和25%盐酸处理,并通过Nikon倒置显微镜观察和比较3种不同切片的植物细胞形态结构。结果表明快速冷冻切片法处理的植物细胞结构保存较完好,木质素染色清晰,且操作方法简便、快速、有效。     

观察植物木质部的3种切片方法比较

为探讨出一种能更清楚有效地观察植物木质部结构的细胞学切片方法,以甘蓝型油菜N529及拟南芥野生型col-4为材料,利用快速冷冻切片法、石蜡切片法及徒手切片法制备植物茎组织切片.切片经组织化学染色:1%间苯三酚和25%盐酸处理,并通过Nikon倒置显微镜观察和比较3种不同切片的植物细胞形态结构.结果表明快速冷冻切片法处理的植物细胞结构保存较完好,木质素染色清晰,且操作方法简便、快速、有效.     

泰山酸枣茎和叶的生药学研究

探讨酸枣茎和叶的显微特征及生药学性状。方法样品采收后迅速经F.A.A固定液处理,按照石蜡切片法制片,经番红-固绿双重染色,中性树胶封片,光学显微镜照相记录。酸枣茎、叶的表皮细胞外层都具有较厚的角质层,维管束周围都分布有较多排列紧密的棕褐色圆形细胞,形成含色素细胞环带;茎和刺的皮层特别在茎部,可见大型的粘液细胞,粘液质经固定呈现同心环状纹理或弧形纹理,可作为酸枣的鉴别特征。酸枣具有明显的旱生植物结构特点。     

植物石蜡切片的固定与保存

石蜡切片是观察植物组织构造常用的制片方法之一。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,才能清晰辨认其形态结构。重点研究了植物石蜡切片的固定与保存,拟为今后固定剂及固定方法的选择提供科学依据。     

用改进石蜡切片法观察大鳞副泥鳅皮肤虹彩细胞

以大鳞副泥鳅为研究对象,针对常规石蜡切片无法观察到鱼类皮肤虹彩细胞的不足,固定液改用10%中性福尔马林,脱水前使用1.5%琼脂糖对组织进行预处理,染色使用3%伊红。结果发现:大鳞副泥鳅新鲜皮肤组织选用10%中性福尔马林进行固定,在梯度脱水前用1.5%琼脂糖对组织进行预处理,并用3%伊红进行染色,即可以得到组织结构完整、虹彩细胞清晰的皮肤组织切片。表明改进后的石蜡切片法可以用于鱼类皮肤虹彩细胞观察。     

小鱼眼球视网膜组织石蜡切片的制作方法

目的观察小鱼眼球(直径在0.3cm左右)视网膜组织石蜡切片的制作方法。方法鲻鱼和罗非鱼各5条,采得眼球20个,用体积分数(下同)95%乙醇85mL 10%中性甲醛10mL 冰醋酸5mL混合而成的FAA固定液进行固定;脱水前先用医用7号针头刺破眼球后再进行脱水、透明、石蜡包埋、切片和HE染色,最后在光镜下观察结果。结果20个眼球的视网膜组织结构和层次均基本保持完整,细胞形态清晰。结论0.3 cm左右直径的鱼类小眼球用FAA固定液固定和针刺破眼球后脱水法制作石蜡切片方法是可行的。     

几种苏木精--伊红染色液的改进和使用

介绍应用8种苏木精染色液和三种伊红染色液的配制法,对组织石蜡切片进行了染色比较试验.试验结果表明,Harris苏木精液、Mayer苏木精液、Gill半氧化苏木精液、碘化钠氧化苏木精液和1%伊红复制液、1%伊红酒精液的染色性能稳定,能长期使用,氧化膜较薄,结晶析出较少,配制方法简便,染色效果良好.     

家兔卵巢石蜡切片HE染色影响因素的研究

在石蜡切片HE染色过程中影响因素诸多,会出现许多常见问题,控制好这些因素是石蜡切片制作成功的关键。用家兔的卵巢制作石蜡切片进行HE染色,改变条件,进行比较试验,重点分析了影响HE染色的温度、时间、切片厚度等主要因素,可供其他实验室借鉴。