黄芩和黄连对大肠杆菌R质粒消除作用的实验研究

目的：研究黄芩和黄连对大肠杆菌Ｒ质粒的消除作用。方法：以黄芩和黄连的提取物为质粒消除剂，携带Ｒ质粒的多重耐药性大肠杆菌Ｅ．１０２株为靶细菌，采用倍比稀释法和影印培养法及Ｋａｄｏ法，观察黄芩和黄连作用不同时间对大肠杆菌Ｒ质粒表达的影响。结果：黄芩和黄连作用２４ｈ，对大肠杆菌Ｒ质粒的消除率为５％～２．４２％，延长时间至４８ｈ，消除率为２６．１４％～２２．５７％。两个时间的消除率差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。Ｒ质粒消除表型可以表现为单一或两种耐药性的丢失。结论：黄芩和黄连对大肠杆菌Ｒ质粒具有消除作用     

止痢灵在去污染小鼠体内不同时间对痢疾杆菌F13株R质粒消除作用的影响

以中药止痢灵作为Ｒ质粒消除剂，用携带Ｒ质粒的福氏痢疾杆菌Ｆ１３株作为靶细菌，在去污染小白鼠动物模型内，研究止痢灵对痢疾杆菌Ｒ质粒的消除作用，并观察止痢灵在不同作用时间（４８、７２和９６ｈ）对Ｒ质粒消除率的影响。其中，以４８ｈ的消除率１０．６３％为最高，７２ｈ的消除率为３．３３％，９６ｈ为４．６７％。细菌丢失耐药性，可表现为多重或单一种耐药性的丧失。     

黄连对大肠杆菌R质粒消除作用的实验研究

目的：在世界范围内，Ｒ质粒在细菌间的传递，引起了多重耐药性菌株的增加，给临床上抗生素的使用造成了严重的困难。人们试图寻找有效的消除剂，把Ｒ质粒从宿主菌株中消除掉，使其重新恢复对抗生素的敏感性。中药黄连常用于治疗腹泻与细菌性痢疾。但对致婴幼儿腹泻的大肠杆菌的Ｒ质粒是否有消除作用？本课题以黄连为质粒消除剂，研究黄连对大肠杆菌Ｒ质粒的消除作用。方法：致婴儿腹泻的大肠杆菌为本室保存菌株，已知对四环素、链霉素、氨苄青霉素耐药，其耐药性均由质粒介导。黄连为多次蒸馏提取的水溶性粉剂，主要成分为小檗碱。由吉林省中医中药研究院药物研究室提供。首先将大肠杆菌接种ＬＢ培养基中，经活化后，分别加入含不同浓度黄连的培养基中，判定黄连的亚抑菌浓度。从亚抑菌浓度管中取５０ｕｌ菌液，分别划种于ＳＳ平板上，经培养后，挑取单个菌落，以影印培养法，依次转接于含ＴＣ（２０ｕｇ／ｍｌ），ＳＭ（４０ｕｇ／ｍｌ）或ＡＰ（２０ｕｇ／ｍｌ）的药物平板上，３７℃培养２４～４８ｈ。消除子的筛选和鉴定：选择在含抗素的选择平板上不生长，而在不含抗生素的普通平板上生长的菌落，即为Ｒ质粒消除子。再经快速质粒抽提，琼脂糖凝胶电泳，以检测质粒带的消失情况。结果：黄连（１．     

黄连对去污染小白鼠体内大肠埃希菌E.102株R质粒消除作用研究

目的：为了解黄连在动物体内有无消除Ｒ质粒的作用，探讨临床应用的可能性，本课题以多重耐药性的大肠埃希菌Ｅ．１０２株为靶细菌，建立一种以去污染的小白鼠为模型的Ｒ质粒体内消除实验方法。方法：首先用四环素，红霉素和利福平对实验用小鼠进行肠道细菌脱污染，建立去污染小白鼠动物模型，然后将靶细菌Ｅ．１０２株菌液经口感染，并随机分组，试验组小鼠每日经灌胃法给黄连１．２ｍｇ，对照组不给黄连。在给药后２４、４８、７２ｈ将小鼠处死，解剖取其盲肠内容物，以ＳＳ平板划线培养２４ｈ，随机挑取单个菌落用影印培养法接种于选择平板上（分别含有不同的抗生素，浓度分别为四环素２０ｍｇ／Ｌ，链霉素４０ｍｇ／Ｌ，氨苄青霉素２０ｍｇ／Ｌ），检查细菌对药物的敏感性。凡是在营养琼脂平板上生长，而在含有抗生素的选择平板上不生长的菌落，即为消除了Ｒ质粒的菌落。结果：去污染小鼠动物模型的建立：在口饲四环素、红霉素和利福平３ｄ后，解剖小鼠，取盲肠内容物在ＳＳ平板上划线培养４８ｈ，未见细菌生长，证明小鼠肠道脱污染成功。经口服大肠埃希菌液３ｄ后，解剖小鼠盲肠内容物，用ＳＳ平板分离培养，均得到纯的大肠埃希菌培养物，证明靶细菌定殖成功。黄连在去污染小鼠体内对Ｒ质粒的消除     

信优灵PB—ROPEL防治棉红铃虫试验研究

用大区对比法，对ＰＢ－ＲＯＰＥＬ防治棉红铃虫及棉铃虫效果进行了示范试验研究，结果表明，ＰＢ－ＲＯＰＥＬ对棉红铃虫干扰效果极好，干扰率９９￣１００％同时对棉花害天敌有明显的保护作用，天敌增加１．３０￣９．２３倍，控制棉红铃虫虫害花效果为７６￣１００％，对棉花铃虫青危害控制效果为５８．５２￣８４．２５％，单铃虫道控制效果为６８．５４￣７６．５９％     

电穿孔法用于大肠杆菌和苏云金杆菌的转化及质粒消除

利用电脉冲将质粒pHT3101和pHE－4D分别转入了大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌DNA的转化率（转化子）为104～105·μg－1,苏云金杆菌的DNA的转化率（转化子）为102～103·μg－1．同时利用该法消除了Escherichiacoli菌株TG1和Bt菌株ISP78／11中的pHT3101质粒,消除率分别为88．6％和66．4％．比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌．     

中药消除致病性大肠杆菌耐药性的研究

为了解黄连、金银花、艾叶、鱼腥草和五倍子5种中药对猪源致病性大肠杆菌的抑菌效果以及对庆大霉素耐药性的消除情况,采用试管二倍稀释法测定5种中药的最小抑菌浓度,通过影印培养法筛选出耐药性消除菌落并计算其消除率。结果表明,除鱼腥草外,黄连、金银花、艾叶、五倍子表现出明显的抑菌效果,亚抑菌浓度的黄连、金银花、艾叶、五倍子作用24 h后对致病性大肠杆菌庆大霉素耐药性的消除率分别为5.34%、2.67%、10.01%、12.53%;作用48 h后其消除率分别为7.27%、3.47%、10.93%、13.68%。黄连、金银花、艾叶和五倍子能消除致病性大肠杆菌对庆大霉素的耐药性。     

电穿孔法用于大肠杆菌和苏云金杆菌的转化及质粒消除

利用电脉冲交质粒ｐＨＴ３１０１和ｐＨＥ－４Ｄ分别转入大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌ＤＮＡ的转化率为１０＾４－１０＾５．μｇ＾－１,苏云金杆菌的ＤＮＡ的转化率为１０＾２－１０＾３．μｇ＾－１,同时利用该法消除Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ菌株ＴＧ１和Ｂｔ菌株ＩＳＰ７８／１１中的ｐＨＴ３１０１质粒,消除率分别为８８．６％和６６．４％。比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌。     

鸡肾型传支病毒繁毒规律及其血凝特性研究

９日和１０日龄鸡胚尿囊腔中接种稀释比例为１／１００￣１／５００的肾型传染性支气管炎病毒,常规培养４８ｈ进行繁毒规律和血凝特性分析。结果表明：１０日龄鸡胚尿囊液收毒量大于９日龄鸡胚。１％的胰酶３７℃作用１￣４ｈ,作用时间对血凝价影响差异不显著,５６℃１％的胰酶作用０．５￣２ｈ,作用时间对血凝价影响差异显著。０．５％￣１％鸡红细胞对血凝价影响差异不显著。９日龄以１／１００种毒繁毒后凝集价最高,１０日龄     

香蕉^60Co辐射诱变效应的研究

以香蕉组培分化芽和生根苗为试材,以剂量率６０Ｒ／ｍ的＾６０Ｃｏ不同剂量辐射处理,选育大果、高产、中矮杆的香蕉新品种,结果表明：３￣４ＫＲ辐射剂量下,可获２２．９％￣６８．８％的植株成活率和１４．５％￣３３．７％的变异率,３￣５ＫＲ辐射剂量下,可获０．６％￣２．４％的有益性状突变。