枯草芽孢杆菌AR11菌株对南方根结线虫的生物防治

用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)AR11菌株处理南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的二龄幼虫(J2)和卵,以评价生防菌AR11对南方根结线虫的防治效果.结果表明:在处理12、24、36和48 h后,5倍稀释菌液(AR11-5)对J2的活性抑制率分别比对照(清水)高55.7%、59.5%、58.0%和47.5%;用10倍稀释菌液(AR11-10)和5倍稀释上清液(S-AR11-5)处理卵8 d后,卵孵化率分别比对照高29.1%和29.7%.用不同浓度的AR11菌液进行温室盆钵实验,结果显示:8周后根系上的根结和卵块数明显减少,其中以10倍稀释菌液处理组减少最为明显,分别比对照少68.2%和75.0%;同时番茄的冠重比对照组高25.6%.上述结果表明:AR11菌株对番茄根部根结和卵块的形成有明显的抑制作用,可抑制二龄幼虫的活性,但对雌虫产卵能力没有影响;低浓度的菌悬液和上清液对卵的孵化有促进作用;此外,该菌株还对番茄的生长有促进作用.     

GJ23 生防菌剂防治南方根结线虫研究

用不同浓度的GJ23生防菌剂菌悬液和发酵上清液原液,对南方根结线虫的二龄幼虫和卵进行处理,评价GJ23生防菌对南方根结线虫的生物防治效果。结果显示,GJ23生防菌剂的菌悬液和上清液原液的不同稀释倍数均可抑制根结线虫二龄幼虫的活性,但可促进其卵的孵化。温室盆钵试验结果表明,2倍稀释的GJ23菌液对南方根结线虫的产卵能力和根结的形成有显著的抑制作用,对番茄生长有促进作用。     

不同根际细菌对南方根结线虫抑制效果的研究

采用稀释平板涂布方法从番茄根结土壤中初步筛选出对明胶有水解作用的菌株。通过各菌株发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫死亡率和虫卵孵化率抑制作用,以及拮抗菌悬浮处理番茄根系30 d后观察番茄根结数量变化,进一步筛选获得高效菌株。通过16S rDNA基因序列分析,对能显著抑制根结线虫生长的2株菌株进行了鉴定。结果表明:筛选出了10株对明胶有明显水解圈的细菌,其中菌株BTG和X5具有较强的明胶水解能力。菌株BTG和X5发酵的上清液处理二龄幼虫24 h后的死亡率比无菌上清液处理死亡率提高了72.13%和62.14%;而用菌株上清液处理14 d后的虫卵孵化率比无菌上清液处理的孵化率降低了38.62%和30.73%。菌株BTG和X5的菌悬液处理的番茄根结数比不加菌悬液对照处理根结数分别降低了80.49%和73.17%。经16S rDNA基因序列分析表明,菌株BTG和X5都属于芽孢杆菌。通过比较各株细菌对二龄幼虫(J2)死亡率,虫卵孵化率及番茄根结数量的影响,筛选出了2株可用于生物防治作物根结线虫的芽孢杆菌。     

尖镰孢菌非致病菌株对南方根结线虫数量的控制

温室盆钵实验证实尖镰孢菌（Fusarium oxysporum)非致病菌株（S162）可有效控制南方根结线虫（Meloidogyme incognita)的群体数量，在F.oxysporum M,incognita和Bacillus cereus(蜡状芽孢杆菌）＋F oxysporum M.incognita处理中，每克根卵囊仅为对照K－M（接种M.incognita) 的1／3和1／5。该菌株处理的番茄幼苗的地上鲜重，根重和根长均高于对照，且处理5周后在番茄根上没有分离到该菌，盆钵实验中，F.oxysporum菌液对根结线虫和大豆胞囊线虫的侵染抑制率分别为46．4％和53．6％，该菌株的培养滤液能抑制根结线虫和大豆胞囊线虫卵的孵化，经琼脂平行测定，其抑制率分别为18．4％和14．2％，     

荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)MF11对根结线虫病的防效评价

在根结线虫危害严重的番茄田块采集健康植株的根际,从中分离并筛选对根结线虫病具有防治作用的生防菌株.采用稀释分离法以及离体试验获得16株能显著杀灭南方根结线虫二龄线虫(J2)的菌株,其中菌株MF11对J2的致死率最高.基于生理生化分析、gyrB和16S rRNA基因碱基序列比对,确定菌株MF11为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).菌株MF11发酵液浸泡番茄幼苗24 h后,J2在番茄根尖的聚集数量显著减少,侵入番茄根尖的虫量下降80.65％,表明菌株MF11可降低J2对番茄的侵染力.温室试验结果表明,菌株MF11发酵液处理可以显著降低番茄植株86.53％根结数,以及70.2％的卵块数.田间试验结果表明,菌株MF11发酵液处理降低了根结线虫病的病情指数,其平均防效达66.71％,与10％噻唑膦颗粒剂处理防效相当.综上所述,菌株MF11不仅对根结线虫具有毒杀作用,还能降低根结线虫的侵染、发育和繁殖能力,从而有效防治作物根结线虫病.     

番茄根结线虫分离和苗期接种方法研究

通过5年番茄栽培地的根结线虫发病状况调查，得出蔬菜栽培地的根结线虫发病率为90％-100％。采集发病株根系及其附着的根系土，利用蔗糖高渗溶液离心法与分离筛法分离，获得病原线虫3种虫态的虫体。接种不同虫态的分离物于培养的番茄幼苗，培养56d后，调查结果显示：已分化并具有卵雏形的雌虫所产生根结和卵块团的数量极少，缺乏侵染性；接种虫卵和幼虫对苗期番茄根系具有侵染性，但形成根结时间不同，接种幼虫后10d可见根结雏形，同时接种的虫卵，16d可见根结雏形，病圃土则需17d；接种J2幼虫后，苗期番茄单株平均形成卵块团数为48．1个，虫卵和病圃土则约有4．5个，表明接种幼虫是测试植物对根结线虫敏感性的有效虫态。     

植安灵对南方根结线虫的控制效果及其作用方式探讨

测定了植物源杀虫剂“植安灵”在温室盆钵中对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）的控制效果。结果表明：该药剂对根结线虫有较高的活性，100倍稀释液对根结形成抑制率达75．6％，对卵块形成抑制率为66.7％，但稀释倍数大于400倍时的抑制作用不明显；在离体条件下，植安灵对南方根结线虫二龄幼虫（J2）有明显的驱避作用；对虫卵孵化有较强的抑制作用；对J2有很强的击倒活性，100倍稀释液处理24h的击倒率达86．7％，但大多数被击倒的虫体可以在清水中恢复活动能力，100倍稀释液24h内的致死率只有36．0％。抑制而不是直接杀死J2，对J2的驱避作用及卵孵化的抑制是植安灵防治根结线虫的主要作用机制。     

3株真菌发酵液对番茄根结线虫的防治效果

利用3个真菌菌株ZB-4、ZW-3、XX-8的发酵液对蕃茄根结线虫2龄幼虫进行室内离体活性测定和温室盆栽的防效试验。结果表明:供试3个菌株不同稀释倍数的发酵液在处理后24、48和72 h对番茄根结线虫都有一定的抑制作用,其中3个菌株的2倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为95.27%、91.27%、86.58%;4倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为68.52%、84.05%、60.33%。在温室盆栽试验中,用3个菌株的2倍发酵液处理番茄苗,与对照相比,处理后45 d番茄根结线虫的减退率分别达到46.7%、43.3%、36.7%,防治效果分别达到23.81%、19.52%、35.71%。此外,处理后22 d和45 d的调查结果显示,3个菌株的2倍发酵液对番茄生长有一定的促进作用。     

蔬菜根结线虫生防细菌的筛选

从广西蔬菜地分离到359株细菌菌株,用其细菌菌悬液和发酵上清液对南方根结线虫Meloidogyne incoqnita的二龄幼虫进行处理,评价其对南方根结线虫的毒力.结果显示,有336株菌株的菌悬液对南方根结线虫二龄幼虫具有杀伤能力,其中49株菌株对南方根结线虫的室内校正死亡率达60%以上;用细菌发酵上清液处理二龄幼虫,也表现出对幼虫活性的抑制作用,48h后有8株菌株发酵上清液原液校正死亡率达80.00%以上.     

淡紫拟青霉与放线菌代谢物复配对南方根结线虫的防治

对淡紫拟青霉和放线菌的拮抗特性及其复配菌剂对南方根结线虫的防治进行了研究.采用杯碟法和平板对峙法测定了淡紫拟青霉菌株PL1和PL2与放线菌菌株LH117和LH121的拮抗性,结果表明两种生防菌4个菌株之间没有明显的拮抗作用;效价法测定结果显示,LH121的发酵上清液对PL2的菌丝生长有轻微抑制作用,抑制率为14.5%.室内生物测定表明,按等体积比例配成的淡紫拟青霉孢子液和放线菌发酵上清液组合的4种复配菌剂处理对根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫杀死率分别可达到66.6%和78.0%,明显高于各单菌株处理;温室盆钵试验结果表明,PL1孢子液和LH117发酵上清液的复配菌剂对番茄的根结形成和根结线虫卵块形成的抑制率分别为68.7%和58.4%.上述结果表明:淡紫拟青霉与放线菌的复配菌剂对根结线虫的防治效果比单菌株的防治效果显著,复配菌剂的防治效果与生防菌株间的相瓦拮抗性可能密切相关.     

一株抗南方根结线虫长形赖氨酸芽孢杆菌的分离鉴定及应用

【目的】筛选对南方根结线虫具有良好活性的生防菌株,为杀线虫制剂的研制与应用提供理论依据。【方法】采用平板稀释法对从抗线虫黄瓜根系附近采集的土壤样品进行芽孢杆菌分离,通过浸渍法筛选出杀线活性高且稳定的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析对活性菌株进行分类鉴定,并通过离体、盆栽及田间试验对分离菌株防治南方根结线虫的效果进行验证。【结果】筛选出1株具有较高杀线虫活性的芽孢杆菌C1,经鉴定菌株C1为长形赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus macroides）。杀线活性测定结果表明,菌株C1发酵上清液对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率为74.50%、对雌虫孵化的相对抑制率为95.17%、对2龄幼虫的24和48 h校正死亡率分别为98.83%和100.00%,且杀虫活性稳定;盆栽试验发现,菌株C1发酵液50倍稀释液对番茄南方根结线虫的防效为73.24%;田间防病试验结果显示,菌株C1发酵液50倍稀释液对黄瓜南方根结线虫病的防效达82.67%,且产量较清水对照增产20.0%。【结论】菌株C1不仅对南方根结线虫病具有良好的防治效果,且能促进作物生长,可作为生物农药和肥料在农业生产中开发利用。     

Field evaluation of Streptomyces rubrogriseus HDZ-9-47 for biocontrol of Meloidogyne incognita on tomato

Streptomyces rubrogriseus HDZ-9-47,isolated from eggs of Meloidogyne spp.,was evaluated as a potential biocontrol agent of Meloidogyne incognita under in vitro and protective field.Microscopic observations showed that HDZ-9-47 parasitized eggs of M.incognita within 7 days.In vitro,the culture filtrate of HDZ-9-47 caused 97.0%mortality of second-stage juveniles(J2s)of M.incognita and inhibited more than 50%egg hatching.In the field,compared with the control,the rootknot index and J2s density in the treatment of drench the broth contained 1012 HDZ-9-47 spores were respectively reduced by 51.1 and 80.7%at 90 days post transplantation,which were better than that in other application doses and methods.In addition,reduction rates of root-knot index and J2s density of the treatment of combined application of HDZ-9-47 with biofumigation was 87.1 and 91.0%,respectively,better than either of HDZ-9-47 or biofumigation used alone or fosthiazate treatment.And tomato yield also increased by 16.1%.Together,our results suggest that HDZ-9-47 could be an effective biocontrol agent of M.incognita,and that application of HDZ-9-47 combined with cabbage residue biofumigation was a promising and sustainable option for M.incognita control.     

乌桕乙醇提取物对罗汉果根结线虫的生物活性初报

为寻找高效低毒的防治罗汉果根结线虫(Meloidogyne incognita)的新途径,该文通过毒力测定及盆栽试验进行了乌桕[Sapium sebiferum(Linn.)Roxb.]叶乙醇提取物对罗汉果根结线虫的生物活性研究。结果表明乌桕叶乙醇提取物含具有较强毒杀线虫活性,浓度2.5g/L、处理48h活性最强,线虫校正死亡率达93.13%,LC50为333mg/L;乌桕叶乙醇提取物稀释100倍、1000倍、10000倍后处理接种了罗汉果根结线虫的番茄苗,植株平均根结数分别为12.5±3.84,20.17±4.01,31.8±5.09,均显著低于对照(5%乙醇水溶液)的平均根结数62.5±5.53,株高分别比对照提高28.10%、21.07%、12.23%,植株鲜重分别比对照增加33.07%、15.31%、2.73%。乌桕叶乙醇提取物能减轻线虫危害,促进植株生长,利用乌桕叶提取物防治根结线虫具深入研发的价值。     

噻唑膦对南方根结线虫的作用方式

为探讨噻唑膦对南方根结线虫的作用方式,在室内利用浸渍法测定了噻唑膦对南方根结线虫卵孵化的抑制作用以及对2龄幼虫的致死作用；利用沙柱法测定了对2龄幼虫迁移能力的抑制作用；利用染色法测定了对2龄幼虫侵入番茄能力的影响.结果表明:随着噻唑膦处理浓度的增加与处理时间的延长,线虫卵的孵化抑制率、2龄幼虫的死亡率显著提高,而2龄幼...     

绮丽小克银汉霉对南方根结线虫卵的寄生性

利用水琼脂平板法测定分离于南方根结线虫卵囊的绮丽小克银汉霉对南方根结线虫游离卵及卵囊中的卵寄生性.结果发现,绮丽小克银汉霉对平板上游离卵的寄生性低,寄生率为21.1%;完整卵囊接种菌后,菌丝可定殖于卵囊表面,但卵囊内的卵未见被寄生.本试验对绮丽小克银汉霉作为生防菌的应用可能性进行了探讨.     

酸性硫酸钙对临床常见致病微生物的杀灭能力

【目的】研究消毒剂酸性硫酸钙（ACS）对微生物的杀灭效果,为用消毒剂防控人畜疫病提供基础数据和理论依据。【方法】将ACS与中和剂（3%卵磷脂、5%吐温-80的磷酸盐缓冲液）共孵育一段时间后,再分别加入大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）共培养一段时间,将与细菌的混合物涂布于营养琼脂平板,置于37℃生化培养箱培养18—24 h;将与病毒的混合物接种于细胞板,在37℃细胞培养箱内培养一定时间,评价中和剂的中和效果。其对照设置和评判标准如下：消毒剂+菌悬液或病毒悬液（第1组）,（消毒剂+菌悬液或病毒悬液）+中和剂（第2组）,（中和剂+消毒剂）+菌悬液或病毒悬液（第3组）,（无菌硬水+菌悬液或病毒悬液）+中和剂（第4组）,（无菌硬水+菌悬液或病毒悬液）+PBS（第5组）,无菌硬水+PBS（第6组）;细菌杀灭试验中和剂效果评价标准：第1组有极少量细菌生长或无菌生长,第2组有菌生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组细菌数接近且与阳性对照组细菌数接近,第6组无菌生长,3次重复试验均符合上述条件,结果一致,判定所选中和剂及浓度合适;病毒灭活试验中和剂效果评价标准：第1组有极少量病毒生长或无病毒生长,第2组有病毒生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组病毒生长与原接种量相近,第6组细胞正常生长,3次重复试验结果一致,判定所选中和剂及浓度合适。利用悬液定量杀菌法和测定病毒滴度的方法评价ACS对上述细菌和病毒的消灭效果,将ACS 稀释200、300、400、500、600、700倍分别与上述细菌或病毒作用不同时间后加入中和剂进行中和,然后将细菌混合物涂布于营养琼脂平板,通过计算菌落数评价ACS杀灭细菌的效果,测定病毒混合物中病毒滴度评价ACS对病毒的杀灭效果。【结果】所选用的中和剂能够有效地中和ACS 200倍稀释液对细菌和病毒的残留作用,且该中和剂对细菌、病毒和细胞无毒性。当ACS与细菌作用0 h后立即被中和,最大稀释300倍对大肠杆菌的灭菌率为100%,最大稀释600倍对金黄色葡萄球菌的灭菌率为100%,最大稀释700倍时对沙门氏菌的灭菌率为100%。当ACS 稀释至700倍时,分别与上述细菌作用1d或6d后被中和,灭菌率均为100%;此外,ACS稀释200倍时,与PRRSV作用60 min后被中和,未检测出病毒滴度。【结论】ACS稀释700倍与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌作用1 d或1 d以上均能产生较好的杀灭效果;ACS稀释200倍与PRRSV作用60 min能完全杀灭病毒。这可为养殖场选用消毒剂防控疫病提供参考。     

昆虫病原线虫对南方根结线虫的抑制效果

为明确昆虫病原线虫、异小杆线虫(Heterorhabditis bacteriophora)Hb SD品系对南方根结线虫的生防潜力,在盆栽条件下,通过测定感染南方根结线虫的番茄苗施用昆虫病原线虫悬浮液后的根结指数、卵囊数和繁殖率等指标的变化来研究该Hb SD对南方根结线虫的抑制效果。结果表明:Hb SD 3个不同的接种时间和浓度对番茄根结指数、卵囊数和繁殖率的影响呈现出显著性差异(P﹤0.05),其中,Hb SD悬浮液施用量6 000头每盆并与南方根结线虫同时接种番茄苗的处理组根上的根结指数、卵囊数和繁殖率(2.67,53.8和19.77),与对照(3.5,82.2和26.81)相比均有很大程度的减少,对根结指数的防效可达31.40%。     

PGPR接种时期和AM真菌对番茄根结线虫病的影响

作者于温室盆栽条件下研究了植物促生根围细菌(plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)Bacillus sp.接种时期和丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza AM)真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae)接种对番茄(Lycopersicum esculentum Mill)生长发育及根结线虫(Meloidogyne incognitaMi)病的影响。结果表明于番茄播种时接种AM真菌摩西球囊霉+移栽时接种芽孢杆菌(Bacillus sp.)和南方根结线虫(M.incognita)的处理植株发病率和和病情指数最低、防效最高,分别为24.5%、12.5%和70.90%;并且显著增加番茄植株节点数、株高、茎粗、地上部干重及地下部干重。认为播种时接种AM真菌配合移栽时接种PGPR可以显著减轻南方根结线虫对番茄生长发育造成的危害程度,并且对南方根结线虫有较强的抑制效果。     

吡唑醚菌酯与戊唑醇复配对葡萄炭疽病菌增效活性与田间防效

[目的]为筛选防治葡萄炭疽病的高效低毒新型复配药剂,降低有效用药量,提高防治效果,防止与延缓抗药性产生.[方法]本研究采用菌丝生长速率法测定了吡唑醚菌酯、戊唑醇及其复配制剂对葡萄炭疽病菌的毒力,并通过田间试验评价了其对葡萄炭疽病的防治效果.[结果]吡唑醚菌酯与戊唑醇及5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5复配组合对葡萄炭疽病菌的EC50(半最大效应浓度)值分别为1.038 8μg/ml、0.3583 μg/ml、0.612 9μg/ml、0.530 1μg/ml、0.2326 μg/ml、0.232 8μg/ml和0.329 6μg/ml;5种复配组合对葡萄炭疽病菌的增效系数(SR)分别为1.29、1.33、2.29、1.84、1.22,其中以1∶1复配的组合增效作用最大.田间防效调查结果表明,25％吡唑醚菌酯·戊唑醇悬浮剂药剂1 000倍液、2 000倍液、3 000倍液以及430 g/L戊唑醇悬浮剂5 000倍液、250 g/L吡唑醚菌酯乳油2 000倍液对葡萄炭疽病防治效果分别为91.54％、90.80％、82.88％、76.43％、74.10％.[结论]因此,吡唑醚菌酯和戊唑醇复配防治葡萄炭疽病增效明显,其中以质量比1∶1混合后对葡萄炭疽病菌增效作用最为显著,果穗套袋前采用25％吡唑醚菌酯·戊唑醇悬浮剂1000～2 000倍液浸果防治葡萄炭疽病害防效均达90％以上.     

几种农药对荔枝蒂蛀虫卵和成虫的触杀作用及田间药效

【目的】筛选对荔枝蒂蛀虫卵和成虫有高效触杀作用的药剂,为荔枝蒂蛀虫防治提供科学依据。【方法】分别采用浸渍法和药膜法进行不同药剂对荔枝蒂蛀虫卵和成虫的室内毒效测定,筛选出高效药剂后进行田间药效试验;田间药效试验按常规方法进行。【结果】3.2%甲维盐·氯氰2000倍、44%氯氰·丙溴磷1000倍、4.5%高效氯氰菊酯1000倍、48%乐斯本1000倍、52.25%农地乐1000倍、40%丙溴磷1000倍、20%三唑磷1000倍7种药剂处理对荔枝蒂蛀虫成虫的12 h触杀死亡率均为100.00%,对卵的触杀效果除40%丙溴磷和20%三唑磷外均为100.00%。田间药效试验所用的7种药剂共13个处理中,防治效果在80.00%以上的有12个,90.00%以上的有8个。【结论】13%高氯·唑磷乳油、22%毒死蜱·氯氰乳油、4.5%高效氯氰菊酯乳油、5%氯氰菊酯乳油、48%乐斯本乳油、40%毒死蜱乳油6种药剂对荔枝蒂蛀虫有很好的防治效果,可供生产中大面积防治时使用;3.2%甲维盐·氯氰微乳剂、44%氯氰·丙溴磷乳油、52.25%农地乐乳油亦可作为果园防治的备选用药。