杀螟杆菌的应用

杀螟杆菌是一种细菌性杀虫剂。杀虫有效成分是有细菌产生的毒素和芽孢。对害虫以胃毒作用，很快以胃毒作用为主。害虫取食菌药后，由于毒素的作用，很快就停止取食危害；同时芽孢萌发，侵入虫体内繁殖，致使害虫逐渐死亡。这些害虫尸体可以收回，用水浸泡后，     

Bt毒素的改造策略

来源于苏云金芽孢杆菌(Bt)的杀虫毒素蛋白(ICPs)虽然能够有效地应用于农业害虫的防治,但该原毒素对于一些低敏感性害虫则表现出弱毒现象。因此,本文拟通过介绍多种包括截断毒素、定点突变、噬菌体展示以及PACE技术等毒素改造策略,以期实现毒素蛋白有效改造并提高其杀虫活性,同时也有助于虫害防治新途径的开发拓展。     

新型生物农药--Bt杀虫剂

Bt即苏芸金杆菌的简称,Bt杀虫剂是利用Bt杀虫菌,经培养生产的一种微生物制剂.这种杀虫菌,在生长发育过程中产生芽孢并形成一种蛋白质毒素,在显微镜下观察,通常是不规则的菱形结晶,叫做伴孢晶体.当害虫蚕食了伴孢晶体和芽孢之后,在害虫的肠内碱性环境中,伴孢晶体溶解,释放出对鳞翅目幼虫有较强毒杀作用的毒素.     

飞机超低容量喷洒Bt油悬浮剂防治春尺蠖试验

一、试验药物 1．试验药物为8000IU/ul天然菌株苏云金杆菌油悬浮剂。苏云金杆菌简称Bt，是包括许多变种的细菌杀虫剂，属好气性蜡状芽孢杆菌群，在芽孢内产生伴孢晶体。苏云金杆菌制剂是经口中毒的药剂，主要是胃毒作用，可用于防治直翅目、鞘翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种幼虫。苏云金杆菌可产生两大类毒素：内毒素（即伴孢晶体）和外毒素。伴孢晶体是主要毒素。杀虫有效成分是伴孢晶体和芽孢毒素。     

苏云金芽孢杆菌CrylAc原毒素、毒素制备及其对棉铃虫的毒力测定

对提取苏云金芽孢杆菌CrylAc原毒素与活化毒素的制备方法进行了改进，经牛胰蛋白酶作用后用等电点沉淀法和纯化法获得毒素。对样品进行SDS-PAGE分析，并测定其对棉铃虫初孵幼虫的毒力。结果表明制备的CrylAc原毒素和毒素降解较少，杀虫活性高。     

苏云金芽孢杆菌Cry1Ac原毒素、毒素制备及其对棉铃虫的毒力测定

对提取苏云金芽孢杆菌Cry1Ac原毒素与活化毒素的制备方法进行了改进,经牛胰蛋白酶作用后用等电点沉淀法和纯化法获得毒素.对样品进行SDS-PAGE分析,并测定其对棉铃虫初孵幼虫的毒力.结果表明制备的Cry1Ac原毒素和毒素降解较少,杀虫活性高.     

棉铃虫氨肽酶N基因片段克隆、表达和内源蛋白检测

氨肽酶N（APN）是苏云金芽孢杆菌杀虫毒素Cry在昆虫中肠中的一个重要受体。研究氨肽酶N在昆虫中肠中的分布特征对于阐明Cry毒素的杀虫机理和昆虫对Cry毒素的抗性机理具有重要的意义。通过RT-PCR的方法从棉铃虫中肠上皮细胞中克隆得到氨肽酶N的基因片段APN1551,并诱导表达纯化得到其重组蛋白APN517。以此蛋白为抗原,制备其抗血清。用该抗血清能检测到棉铃虫中肠上皮细胞中的APN蛋白。为研究Cry毒素的作用机理奠定基础。     

苏云金芽孢杆菌的概况及其研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫剂是对人和环境友好的安全型细菌杀虫剂。目前Bt杀虫剂已被广泛应用,但因使用剂量较大,导致防治害虫时费用过高。若在生物防治中使用超高效的细菌杀虫剂,就可降低其使用剂量。Bt 00-50-5菌株是从美国引进的高效杀虫菌株,其晶体蛋白的特征分析尚未完成,其毒素的作用机理研究也未进行。本项目即将开展如下研究:(1)先用具有特异性杀虫功能的Bt 00-50-5菌株进行发酵,继续完成对防治中国害虫防治效果的评价;再分析细菌的编码杀虫毒素基因和毒素的生化特征;然后混合荧光标记毒素和中肠细胞,加入昆虫中肠蛋白酶(或单独加入氨肽酶、碱性磷酸酶、ATP酶、枯草杆菌蛋白酶、钠或钾离子代之)反应,用荧光显微镜观察细胞变化;最后阐明杀虫毒素对靶标细胞作用机制。(2)通过研究毒素分子与受体分子的作用关系,拟在分子水平上阐明毒素的作用机制。     

多位点生物杀虫毒素BtA形成的HPLC分析

 基于多位点生物杀虫毒素理论和生物耦合技术，研制生物杀虫毒素BtA，为新生物农药的开发提供了一种新思路、新方法和新手段。将苏云金芽孢杆菌（B.t.）晶体进行酶解改造，形成带末端氨基的原毒素；将阿维菌素的羟基进行激活、衍生化，形成带羧基的阿维菌素衍生物（Abamectin-COONa）；再利用氨基-羧基偶联剂（EDC）进行两种生物毒素的生物耦合。利用反相液相色谱（HPLC）检测不同反应时间的BtA生物耦合体系，以确定生物耦合反应的发生；通过反应底物两两组合的分析比较，识别生物耦合产物BtA生成的色谱特征，分析生物耦合产物---多位点生物杀虫毒素BtA的产生过程。     

苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因定位研究进展

苏云金芽孢杆菌是目前应用最广泛的杀虫微生物,其活性成分主要是杀虫晶体蛋白、营养期杀虫蛋白和几丁质酶等,本文对编码这些蛋白的基因的定位作一综述,有助于进一步研究基因结构、功能、表达和调控.     

生物工程应用于作物育种的试验研究 第5报 水稻抗稻瘟病细胞突变体的筛选

以稻瘟病病原菌毒素滤液为选择压力,在水稻种胚愈伤组织的诱导.继代和分化过程中,筛选出一批水稻抗病细胞突变体。稻瘟病病原菌毒素滤液可代替孢子悬液直接用于抗病细胞突变体筛选与鉴定。在愈伤组织诱导培养基中加入45％的毒素滤液,或在愈伤组织诱导培养基与分化培养基均加入30％或45％的毒素滤液,效果较好。经毒素处理筛选出的绿苗,其后代有一部分无性系的抗病性是稳定的,可供选择利用;过氧化物酶同工酶与植株和愈伤组织的抗病性有关,可作为选择抗病突变体的指标。本文还对完善这项试验及与水稻育种有关的问题,进行了初步讨论。     

Cytolytic Toxin and Related Genes in Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis is a ubiquitous gram-positive, spore-forming bacterium that forms parasporal crystal during the stationary phase of its growth cycle. These crystal proteins, including Cry and Cyt protein, are toxic to certain insects. Lately, some problems about Cyt classification, structural characteristic, action mechanism and resistance to Cyt toxin are becoming new hotspots. We review the progress of above problems in several foreign labs.     

Separation of type 2 toxins of Vibrio cholerae

Choleragenic toxin was separated from vascular permeability factor by ion-exchange chromatography of supernatants of dialyzed peptone cultures of Vibrio cholerae. The choleragenic toxin eluted from columns of QAE-Sephadex with low-ionicity systems is free of permeability factor activity. Further elution of these columns with 0.5M NaCl removes both the permeability factor and residual choleragenic toxin. When this latter material is chromatographed on columns of carboxymethyl-Sephadex, the permeability factor toxin is eluted by 0.02M phosphate buffer and is free of choleragenic activity. Therefore, choleragenic and permeability factor activities of the type 2 cholera toxins are different and can be separated by these procedures.     

水稻抗稻瘟病细胞突变体筛选技术体系的建立及其在品种改良上的应用

 本文研究了根冠细胞法测定稻瘟病菌粗毒素的致病性及其离体筛选水稻抗稻瘟病细胞突变体，结果表明，致病毒素对水稻根冠细胞死亡率的影响，不同小种之间差异达显著或极显著水平。外源激素和外植体基因型是影响水稻成熟胚离体培养力高低的两个主要因素。抗稻瘟病细胞突变体的筛选效率以全程筛选法优于继代筛选法。建立了一个新的筛选体系，它不仅简单易行，而且可以避免丧失愈伤组织的形态发生能力，再生植株育性较好，并应用于水稻改良，获得了一批抗稻瘟病株系。同时对如何完善试验研究的有关问题进行了讨论。     

镰刀菌毒素研究进展

镰刀菌毒素是镰刀菌属真菌产生的多种次生代谢产物的总称,在自然界中分布极为广泛,是危险的食品污染物,对人畜健康危害十分严重.因此,关于镰刀茵毒素的研究已成为当前国际上最紧迫的课题之一.通过对受侵染的宿主细胞以及体外培养的动物细胞研究表明,镰刀菌毒素可影响植物细胞膜透性并破坏其组织超微结构,可诱导体外培养的动物细胞发生凋亡.笔者对镰刀茵产毒素的类型,镰刀茵毒素对植物细胞、动物细胞的毒害以及脱毒方法作一综述.并探讨了当前镰刀茵毒素研究过程中存在的问题和未来的研究方向.     

石楠拟盘多毛孢致病毒素除草作用的初步研究

石楠拟盘多毛孢(Pestalotiopsis photiniae)是草莓根腐病的优势致病菌,主要通过毒素引发病害。为明确该病菌毒素对常见几种杂草的影响,本试验利用离体叶片和种子根芽伸长法研究了该病菌粗毒素对几种杂草的致病作用。结果表明:该粗毒素对供试的13种杂草叶片均有不同程度的致病作用,致病强度与杂草种类及粗毒素浓度有关,其中车前、马齿苋、马唐、反枝苋和灰菜5种杂草受害最重,经较低浓度(0.036mg/mL)毒素处理后1d即开始出现褐色斑点,第3天病斑面积达到最大(50%以上);该粗毒素(0.036mg/mL)对车前等5种杂草种子萌发、幼根和幼芽伸长也均有显著的抑制作用,且随毒素浓度升高抑制作用增强,抑制率均在53%以上,但对小麦和大豆种子萌发及根芽伸长均无明显的抑制作用;粗毒素经紫外线照射后,对车前和蒲公英的除草活性在自然光照下比黑暗下明显增强。这些结果揭示石楠拟盘多毛孢粗毒素有一定的除草潜力。     

甲藻门环胺螺环藻属和环胺螺环藻酸研究进展

环胺螺环藻酸（Azaspiracid,AZA）是最近发现的一种贝类毒素,近年来在毒素成分、结构和毒性大小以及产生这类毒素的甲藻物种多样性研究上取得了快速的进展.对产毒藻的物种多样性、地理分布、形态学和系统发育以及毒素成分的研究进展进行了综述.     

禾谷镰刀菌粗毒素的生物活性及其在小麦品种抗赤霉病性鉴定中的应用

 用小麦黄化芽鞘生物测定法探测禾谷镰刀菌粗毒素的生物活性，以及不同抗性小麦品种对粗毒素的反应。以纯脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）作比较，证明了粗毒素具有与纯毒素DON相同的生物活性。对粗毒素在抗赤霉病性鉴定应用的初步探讨中，明确了小麦品种对粗毒素的敏感性与其在田间的抗赤霉病性呈负相关。     

Methionine and leucine enkephalin in rat neurohypophysis: different responses to osmotic stimuli and T2 toxin

Specific radioimmunoassays were used to measure the effects of hypertonic saline (salt loading), water deprivation, and trichothecene mycotoxin (T2 toxin) on the content of methionine enkephalin (ME), leucine enkephalin (LE), alpha-neoendorphin, dynorphin A, dynorphin B, vasopressin, and oxytocin in the rat posterior pituitary. Concentrations of vasopressin and oxytocin decreased in response to both osmotic stimuli and treatment with T2 toxin, but the decrease was greater with osmotic stimulations. Similarly, concentrations of LE and dynorphin-related peptides declined after salt loading and water deprivation; LE concentrations also decreased after treatment with T2 toxin. The concentration of ME decreased after water deprivation, did not change after salt loading, and increased after T2 toxin treatment. The differentiating effects of these stimuli on the content of immunoreactive LE and ME are consistent with the hypothesis that LE and ME may be localized in separate populations of nerve endings with different roles in the posterior pituitary.