羊催乳素的纯化、理化鉴定及抗血清的制备

本试验对绵羊垂体前叶催乳素进行了提纯和生物学、生物化学及免疫学方面的鉴定.516g 羊全垂体经硫酸铵、乙醇等的逐级提取,最后经 DEAE-纤维素柱层析得到催乳素纯品450mg.用鸽嗉囊局部皮内微量注射法测得其生物学活性为27国际单位(27IU/mg)。PAG 电泳表明有三条带。SDS 电泳测得其分子量为23000。IEFP 电泳表明平均等电点为5.85。用 Dansyl-Cl 法测定其 N-末端氨基酸,只显出苏氨酸一点。表明提纯的催乳素是高纯的。用该催乳素免疫家兔,九周后用琼脂双扩散法测抗血清,其效价最高达1:32,说明该纯化品具有很强的免疫原件.     

快速简便地制备猪生长激素

 将猪垂体在酸性（pH5.5）条件下制备垂体匀浆液，经硫酸铵分级分离后，用Sephadex G-100凝胶柱层析纯化，得到电泳纯的分子量为21.7KD的猪生长激素，产率为1.22g/kg新鲜垂体。胫骨法测定具有促生长活性，其氨基酸组成、氮末端氨基酸及电荷不均一等性质均与文献报道基本一致。此法较之前人的方法有简便易行、周期短的优越性，活性组分集中，得率也较高，是制备有活性的猪生长激素较为理想的方法。     

鸡胰多肽、猪胰多肽的提取、纯化和鉴定研究

本实验利用磷酸钙吸附法从猪胰脏、鸡胰脏中分别得到了鸡胰多肽(APP)、猪胰多肽(PPP)粗提液,用sphadex G-50柱层析脱盐后制备出了APP、PPP粗品;并用Folin-酚试剂法测得自制APP、PPP粗品的肽含量;用SDS-PAGE电泳法对自制APP、PPP粗品进行了鉴定。结果表明:用Folin-酚试剂法测得自制APP粗品的肽含量为:24.52 mg.g-1;PPP粗品的肽含量为:8.15 mg.g-1。从电泳图像可见,经Sephadex G-50层析后的APP、PPP纯度较高,APP和PPP的分子量在4.2KD范围内,与Kimmel等报道的结果以及市售APP纯品的分子量是一致的。     

蔗糖合酶抗体制备及其在水稻灌浆期蔗糖合酶含量检测中的应用

采用匀浆粗提、硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100、DEAE-32、Sepharose CL-6B等方法从水稻品种武育粳3号籽粒中分离纯化蔗糖合酶，所得的酶蛋白在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳胶上呈现一条深染色的蛋白酶带。HPLC测定其浓度为71．2％，SDS—PAGE测得的酶分子量为380ku。用得到的酶蛋白作为抗原，通过皮内多位点分次注射法免疫新西兰白兔获得免疫抗体，用此抗体成功地检测到水稻籽粒灌浆过程中蔗糖合酶蛋白的含量变化。     

猪羊生长激素基因保守性研究

生长激素基因在猪羊间的差异 ,通过两对引物 ,分别为P1:5’ -agctggattctttacggctgagcc - 3’和P2 :5’ -tccggaagcaggagagcagaccgtag - 3’ ,P3:5’ -gctgacacctacaaggagtttg - 3’和P4:5’ - gtttgcttgaggatctgtcctg - 3’。对它们的DNA进行聚合酶链反应 ,电泳及序列分析结果表明 :P1-P2和P3-P4引物都能扩增出猪羊DNA样 ,得到大小一致的扩增带 (对应引物的带 ) ,但southern杂交结果的差别很大 ;生长激素基因的碱基组成在猪羊间的差异为 6 5 % ,即猪羊生长激素基因保守性很强     

“东一号”剑麻蛋白酶分离纯化及特性研究

比较了用乙醇沉淀法和硫酸铵盐析法从“东一号”剑麻中提取蛋白酶的效果.用前者制得的粗酶经Sephadex G-25柱层析得两个蛋白峰,其中峰Ⅰ与酶活性重叠。峰Ⅰ再经SP—Sephadex C—50离子交换柱层析,pH.离子强度线性梯度洗脱得4个蛋白峰.其中峰4与酶活性重叠。此酶液经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳.在每条胶柱上呈单一蛋白带;量4℃下2d后出现六角形结晶.结晶酶液在pH5.5-10.0.60℃范围内稳定性较好;其最适pH为7.5;最适温度为40℃;Km(酪蛋白)值为0.114％(w/v)用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)测得其分子量66KD;用Sephadex G—100柱层析测得的分子量为69.9KD.用Ellman's试剂测得其游离巯基含量为4.3 mol—SH/10~5g蛋白质。     

小麦Rubisco的纯化、鉴定及其活性测定

以小麦叶片为材料 ,根据Rubisco的溶解度、分子大小和形状、电荷种类等特性采用盐析、凝胶过滤、离子交换层析技术进行该酶的分离、纯化。纯化的Rubisco经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定呈一条谱带 ,经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳呈 2条谱带 ,一条带为Rubisco大亚基 ,分子量 5 5 0 0 0左右 ;另一条为Rubisco小亚基 ,分子量 14 80 0。     

芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅰ的分离纯化及部分性质

将从芦荟叶中提取的SOD溶液,通过丙酮沉淀、热变性、DEAE-琼脂糖柱层析s、ephacryl S-200凝胶过滤,获得芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅰ电泳纯产品Fe-SOD。该同工酶经凝胶过滤测定全分子量为46 kD及SDS-PAGE测得亚基分子量为23 kD,由2个亚基组成。经等电点聚焦电泳测得该SOD酶同工酶Ⅰ的等电点为pH8.9。     

利用醇溶蛋白APAGE技术划分玉米自交系类群

利用改进的酸性聚丙烯酰胺凝胶技术,对15个白粒玉米自交系籽粒进行分析,结果共分离出22条谱带,其中公共谱带2条,多态性谱带20条,单态性谱带(某一自交系特有的带)是4条,平均每个自交系共分离出1.3条多态性谱带,通过对电泳谱带聚类,可将15个自交系分为5类,第一类为(49×木4)BC2、白3、D411;第二类为P98-1D-3-13和P98-1D白一号;第三类为唐B;第四类为P98-4-5-2-1、P98-4-5-1-3、P98-4-21-2、P98-4-4-3-21、92选16-2-1、六-2-1和9237 2000-1;第五类为20114和(白3×Di)BC2.聚类结果与已知系谱基本吻合,表明改进的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术在玉米自交系类群划分上基本可行.     

水稻RuBP羧化酶的提纯及电泳性质分析

RuBP(1、5—二磷酸核酮础)羧化酶,在绿色植物的光合过程中起着重要作用。我们采用Sephadex 柱层析法从水稻中分离和纯化了该酶,并获得了结晶。经电泳鉴定为一条酶带。该酶结品又经解聚,S—羧甲基化和聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分析呈5条带,3条为大亚基肽链,2条为小亚基肽链。     

不同保存方法对中麻黄基因组DNA提取效果的影响

通过对不同方法采集和保存的中麻黄样品基因组DNA提取效果进行比较,确定中麻黄的最佳采集和保存方法。应用改良CTAB法提取中麻黄基因组DNA,并采用琼脂糖凝胶电泳检测其完整性,利用紫外分光光度计法测定其浓度和纯度。结果表明,新鲜样品采集后立即冷冻保存或置于液氮和硅胶后冷冻保存,均能提取出高质量的基因组DNA;鲜样阴干几天后冷冻保存会导致基因组DNA降解;阴干后在室温下保存则降解更严重。采集的中麻黄鲜样采取不同方法带回实验室均不影响基因组DNA的提取效果,但应在低温环境中保存才能有效防止基因组DNA的降解。     

茶多酚在鱼糜贮藏中的应用

为探讨茶多酚对鱼糜的保鲜效果，将茶多酚添加到鱼糜中，研究冷藏或冷冻鱼糜的含水量、凝胶强度、酸价、过氧化值、挥发性盐基氮等的变化．结果表明，茶多酚能降低冷藏鱼糜的酸价、过氧化值、挥发性盐基氮；对冷藏鱼糜和冷冻鱼糜的水分含量的减少均有一定的抑制作用；添加茶多酚能显著地延缓冷藏鱼糜凝胶强度的降低，而对冷冻鱼糜凝胶强度的影响不明显．     

白姑鱼鱼糜的化学组成及冻藏稳定性的研究

以舟山产的冷冻小规格白姑鱼为对象,研究了鱼肉和鱼糜蛋白在-30℃、-20℃和-10℃下的冻藏稳定性和冷冻变性特点,并考察了不同抗冻剂对白姑鱼鱼糜低温变性的保护作用。结果表明：白姑鱼鱼肉在不同温度下冻藏时,肌原纤维蛋白都容易发生变性,并且冻藏温度越高变性速度越快,而凝胶强度则随着冻藏时间的延长呈明显下降趋势。添加各种抗冻剂可较好地抑制其冷冻变性,其中海藻糖和乳酸钠的抗冻效果可与商业抗冻剂比拟,可以在工业化生产中单独应用或复配使用。     

大蜡螟抗菌物质的抑菌活性检测及其初步分离

以大蜡螟末龄幼虫为材料,诱导后获得免疫血淋巴为抗菌粗提物,并分为新鲜,冷冻,加热3种不同的处理,进行了对2种常见细菌和16种植物病原真菌的抑菌活性检测,并进行了Sephadex G-50凝胶过滤分离.结果表明,大蜡螟抗菌物质对大肠杆菌没有明显的抑制作用,而对金黄葡萄球菌抑制作用明显,抑菌活性单位在10左右;对10种植物病原真菌均有不同的抑菌活性,其中对苹果树皮腐烂病菌的抑制率达到65%以上;经过凝胶过滤分离,及对分离组分的抑菌活性测定,筛选出较合适的洗脱液为50 mM乙酸铵,各分离组分抑菌活性差异明显,粗提物被分成了两个差异显著的部分.     

烫漂、亚硫酸氢钠对速冻蔬菜过氧化物酶活性的影响

本文研究了经烫漂、亚硫酸氢钠加各种不同的化学试剂烫漂的蔬菜，在－４０℃下速冻，在－１８℃条件下冻藏一年后分别测定并比较了产品中残余过氧化物酶活力；同时用聚丙烯酶胺凝胶电泳分离了蚕豆过氧化物酶同工酶并进行了比较，结果表明：烫漂可明显抑制过氧化物酶活性，产品残留过氧化物酶活性明显降低；亚硫酸氢钠加各种不同化学试剂烫漂抑制效果都优于单纯烫漂处理，产品过氧化物酶活性都明显低于单纯烫漂处理；其中亚硫酸氢钠加钙盐烫漂效果最佳，产品残余过氧化物酶活力降到最低，产品的感官质量好。速冻产品的感官质量与产品过氧化物酶残余活力密切相关，残余酶活愈低，产品质量愈好。经烫漂、亚硫酸氢钠加各种化学试剂烫漂冻藏一年后的蚕豆过氧化物酶同工酶谱与新鲜蚕豆和只经冻藏的蚕豆相比有明显的差异，而且各处理其酶谱的强弱也不相同。     

TUNEL法和SCGE法评价奶牛性控冻精DNA损伤

末端转移酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL)和单细胞凝胶电泳法(SCGE)常被用于检验细胞DNA的完整性。本研究采用这两种方法分别对性控、常规冻精进行检测,比较不同方法对精子DNA损伤的检测结果。结果表明:TUNEL法检测性控冻精DNA的损伤率为63.32±0.56%,显著高于(P0.01)常规冻精的31.67±1.03%;SCGE法检测性控冻精和常规冻精的DNA损伤率分别为64.00±0.68%和32.23±0.72%,差异极显著(P0.01)。而两种方法对性控冻精和常规冻精DNA损伤的检测结果间没有显著差异(P0.05),说明该两种方法均可用于冻精DNA损伤检测。     

褐藻酸钠涂膜剂的特性研究

对褐藻酸钠凝胶经冻结和解冻处理后的持水能力、凝胶强度、弹性、韧性及状态变化等特性进行了比较试验。结果表明；褐藻酸钠凝胶的这些性质与凝胶体内的钠和钙的比率直接相关；采用２％的褐藻酸钠溶液与５％的氯化钙溶液凝胶化２ｍｉｎ，所形成的凝胶具有很好的涂膜性能。     

Volatilization of high molecular weight DNA by pulsed laser ablation of frozen aqueous solutions

DNA has been volatilized by pulsed laser ablation of a thin film of a frozen aqueous DNA solution. The target film was irradiated in vacuum by a pulsed laser at power densities sufficient to ablate the ice matrix. The expanding ablated water vapor entrained embedded DNA molecules and expelled them into the gas phase. Ejection of DNA molecules as large as 410 kilodaltons was verified by collection of the ablation products and subsequent mass analysis by polyacrylamide gel electrophoresis with autoradiographic detection.     

加工条件对细菌纤维素凝胶理化性质的影响

为探究自产细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)凝胶的性能稳定性,以自选中间葡糖酸醋杆菌Gluconacetobacter intermedius CIs26菌株发酵柑橘果渣培养基所产的凝胶膜为原料,考查pH、NaCl浓度、加热、冷冻等加工条件对自产柑橘BC凝胶持水力、硬度、色泽等理化性质的影响。结果表明:BC凝胶的色泽较稳定;pH变化对凝胶的含水量影响不大;碱性条件下所得凝胶的持水力最高,酸性条件下所得凝胶的硬度最高;随着NaCl浓度的升高,所得凝胶的含水量、持水力和黄酮含量均降低,硬度略上升然后下降;-18 ℃冷冻24 h后,所得凝胶的持水力和硬度增加。总体而言,自产BC凝胶在不同加工条件下能够保持较好的理化性能,具有产业化应用的可能性与前景。