白桦组培再生系统的研究（II）——影响因素及培养程序

在“白桦（Ｂｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌｌａｓｕｋｓ）组培再生系统的研究（Ｉ）”的基础上，以展叶顶芽，休眠腋芽和处子为最初外植株，通过初始培养获得无菌苗后，选取无菌苗的不同部位作外植株，如：茎节，嫩枝，愈伤组织等，经过诱导培养，分化培养及生根培养，形成再生植株，研究了培养基，激素种类及浓度，无性系，外植体类型，蔗糖浓度对诱导及生根的影响，提出白桦组培的最佳条件及程序，最佳无性系的一个外植体，经三次     

激素对绞股蓝愈伤组织过氧化物酶及皂甙含量的影响

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和分光光度法,对添加不同激素进行组织培养的绞股蓝愈伤组织的过氧化物酶（ＰＯＤ０同工酶及总皂甙含量进行了测定。结果表明,添加ＮＡＡ培养的绞股蓝愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阴极区酶带活性强,添加ＢＡ培养的绞股蓝愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阳极区产生了新的酶带;同时添加ＮＡＡ,２,４－Ｄ,ＢＡ三种激素培养的绞股蓝愈伤组织的总皂甙含量最高。     

遗传转化过程中水稻愈伤组织的内源植物激素变化动态研究

 【目的】通过对遗传转化过程中水稻愈伤组织本身的3种内源激素含量变化动态研究，探讨水稻愈伤组织生长发育过程中内源激素变化规律和激素间的相互关系，旨在为水稻遗传转化体系中合理使用植物生长物质提供参考依据。【方法】以广粳1号、特青、V20B为遗传转化供试材料，采用高效液相色谱法（HPLC）测定了遗传转化过程中4个主要时期愈伤组织中的内源脱落酸（ABA）、生长素（IAA）和玉米素核苷（Z）的含量。【结果】IAA主要存在于种胚诱导出的愈伤组织上及芽中，且过高的IAA含量不利于愈伤组织的诱导和生长；Z主要存在于种胚中，对愈伤组织诱导的启动有决定性作用，如果外植体中的Z含量太低，即使有较高的IAA含量也不能诱导出愈伤组织；过高的ABA对愈伤组织的诱导不利，但在继代培养时适量升高ABA含量有利于胚性愈伤组织的形成。 【结论】内源激素对愈伤组织的生理状态有着极其重要的影响，其种类、含量及协调平衡是水稻愈伤组织形成和分化的关键。同时，诱导培养基中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的浓度与水稻愈伤组织培养物中的培养力（愈伤组织质量，芽长和诱导率）有一定的相关性，且在培养基中加入2,4-D等生长调节剂类物质会对愈伤中的内源激素含量有一定的影响。     

盾叶薯蓣愈伤组织培养及其高产系的筛选

以盾叶薯蓣的块茎、茎、叶和茎尖为材料,对其进行了愈伤组织培养,并根据愈伤组织个体间生长速度和皂甙含量差异,进行了高产系的筛选。结果表明：盾叶薯蓣不同外植体（块茎、茎、叶、茎尖）均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖形成愈伤组织最快,皂甙元含量最高;不同培养基、ｐＨ值、接种量、温度、激素等因子对愈伤组织的形成、生长及皂甙元含量有很大的影响;改良ＭＳ培养基、２,４－Ｄ浓度为２．０～４．０ｍｇ／Ｌ、ＢＡ为０．５     

北海道黄杨叶片离体培养及其细胞耐盐性

以北海道黄杨叶片为材料进行愈伤组织诱导及细胞增殖培养试验,同时开展不同浓度NaCl胁迫下愈伤组织培养,探讨外源激素对叶片离体培养的影响及其愈伤组织的耐盐性。结果表明,北海道黄杨叶片诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.3 g/L,有利于愈伤组织增殖的激素为2,4-D0.5 mg/L;0.2%NaCl胁迫对愈伤组织生长影响较小,NaCl浓度高于0.4%时,随盐浓度升高愈伤组织脯氨酸含量增加,生长量急剧降低。     

激素对组织培养绞股蓝生长及酶活性的影响

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法,对添加不同激素组织培养的绞股蓝愈伤组织的过氧化物酶同工酶及总皂甙含量进行了测定。结果表明：添加ＮＡＡ培养的愈伤组织的ＰＯＤ同工酶在阴极区酶带活性强,添加ＢＡ培养的合成伤组织的ＰＯＤ同共酶在阳极区产生了新的酶带,同时添加ＮＡＡ,ＢＡ,２,４－Ｄ三种激素培养的愈伤组织的绞股蓝总皂甙含量最高。     

白桦组培再生系统的研究(Ⅱ)——影响因素及培养程序

在“白桦（Ｂｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌａｓｕｋｓ）组培再生系统的研究（Ⅰ）”的基础上，以展叶顶芽、休眠腋芽和种子为最初外植体，通过初始培养获得无菌苗后，选取无菌苗的不同部位作外植体，如：茎节、嫩枝、愈伤组织等，经过诱导培养、分化培养及生根培养，形成再生植株。研究了培养基、激素种类及浓度、无性系、外植体类型、蔗糖浓度对诱导及生根的影响，提出白桦组培的最佳条件及程序。最佳无性系的一个外植体，经三次继代培养增殖达３０００株，最佳培养基上的生根率达９５％以上，Ⅰ、Ⅱ级苗的移栽成活率达９０％。     

组织培养生产高山红景天有效成分的研究 Ⅰ．高山红景天愈伤组织的诱导与培养

以高山红景天的叶片、子叶、茎和根为外植体。诱导产生了大量的愈伤组织．筛选出适于愈伤组织大量培养的固体培养基．以６ＢＡ４～８ｍｇ／ｌ，ＮＡＡ２～２．５ｍｇ／ｌ为最佳激素种类和浓度．研究了固体培养条件下愈伤组织生长规律，绘制了生长曲线，并筛选出优良的细胞无性系．     

柠条锦鸡儿愈伤组织的培养与分化

取柠条的子叶和胚轴切段作为外植体，接种于含不同激素的７种ＭＳ培养基上诱导愈伤组织发生，确定最佳愈伤组织培养基为ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，２，４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ。在ＭＳ＋６－－Ｂ１ｍｇ／Ｌ，ＩＡＡ１０ｍｇ／Ｌ的培养基上生长的愈伤组织中，在距愈伤组织表面一定距离处常形成分生组织带，很像形成层带。分生组织带内部的细胞分化产生排列不规则的长形管状细胞，分生组织带两侧的细胞分裂产生正常的愈伤组织细胞。生长在ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５／Ｌ，２，４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ的培养基上的愈伤组织中可分化出胚性细胞（团），这样的愈伤组织转移至无激素培养基后，胚性细胞（团）可进一步分化出原胚、球形胚、心形胚、子叶胚和试管苗。     

枣树组织培养养愈伤组织诱导的研究

将枣树不同品种的不同器官及其部位的外植体接种含有不同激素的培养基中培养，对其愈伤组织诱导条件进行了条件，结果表明，灌阳长枣（中国）和普通枣（日本）为较适宜组培的品种，胚，嫩枝顶部，芽为适宜组培的器官；以ＭＳ（１／２ＮＯ＾－３）的作基本培养基，并添加３μｍｏｌ左右Ｚｅａｔｉｎ和约３０μｍｏｌＮＡＡ或ＩＡＡ可以获得数量较多，质量较好的愈伤组织，叶所产生的愈伤组织颜色较深，数量也较少，并在初代培养时易产     

草地早熟禾愈伤组织诱导和分化中内源激素水平分析

以草地早熟禾‘午夜2号’、‘新格莱德’、‘橄榄球2号’成熟种子为材料,进行愈伤组织的诱导和分化培养,利用高效液相色谱法对愈伤组织在不同培养期中的内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素(ZT)进行测定和分析.结果表明:愈伤组织诱导率与成熟种子中IAA和ABA水平呈正相关.3个品种种子中的IAA水平相对较高,分别为0.574、0.393和0.415μg/g,内源激素ABA的含量微小,分别为0.157、0.088和0.123μg/g,ZT含量在3个品种间差异不大;在供试材料愈伤组织的继代培养和分化阶段,IAA含量在‘午夜2号’中始终处于较高的水平,分别为0.425μg/g和0.554μg/g,变化幅度不大,在愈伤组织生长旺盛和分化成芽期最高,分别为0.495μg/g和0.629μg/g,ABA和ZT含量在愈伤组织培养和分化过程中一直处于较低水平,ABA分别为0.120μg/g和0.141μg/g,ZT分别为0.111μg/g和0.202μg/g,二者在胚性愈伤组织形成期含量逐渐升高,在愈伤组织分化能力强的时期也有升高趋势,对胚性愈伤组织的形成和分化出芽有促进作用;高ZT∶IAA和高ABA∶IAA有利于愈伤组织的生长发育,并促进胚性愈伤组织的形成,高ABA∶IAA有利于愈伤组织分化形成芽.     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

The Influence of Endogenous Hormones on Culture Capability of Different Explants in Rice

The endogenous hormones (EHs) content of different explants (anther, young panicle, young embryo and mature embryo)and calli with different culture capability were analyzed by means of high performance liquid chromatography (HPLC). The results showed that the contents and ratio of endogenous hormones were one of the key factors affecting callus induction frequencies (CIF) and green plantlet differentiation frequencies (GPDF). The influence of endogenous hormones of different explants on CIF represented as: Zoatin ribosile (ZR) showed negative effect, indole-3-acetic acid (IAA) did positive effect, and gibberellic acid (GA) did negative effect except for mature embryos. The influence of endogenous hormones on green plantlet differentiation frequency (GPDF) showed: IAA and GA were negative effect; abscisic acid (ABA) and zeatin+ zeatin riboside (Z+ZR) were positive effect. The mixture ratio of endogenous hormones played a role on CIF and GPDF. IAA/Z+ZR had a positive effect on CIF, and there was a notable positive correlation between Z+ZR/IAA and GPDF, so was between ABA/IAA and GPDF.     

保温与外源激素对大棚茶树新梢内源激素的影响

研究了不同保温处理与喷施外源激素对大棚茶树新梢内源激素的影响.结果表明:喷施外源激素处理能够提高茶芽头赤霉素(GA3)含量;喷施混合外源激素明显提高了茶树新梢吲哚乙酸(IAA)的含量;保温措施和喷施外源激素都能降低脱落酸(ABA)含量;茶新梢玉米素ZT含量与茶园保温措施密切相关,喷施混合外源激素对新梢ZT含量无明显影响;新梢内源激素平衡GA3/ABA、ZT/IAA比值与茶芽萌发存在密切关系;喷施外源激素能提高茶芽各类内源激素,明显催促进茶芽萌发.     

外源激素对甘蔗幼苗分化及其内源激素的影响

 报道了在甘蔗幼苗分化培养基中添加不同浓度配比的外源激素对绿苗分化及内源激素的影响。结果表明:外源激素对分化苗中的内源激素有促进或抑制作用,外源激素的添加对IAA,GA_1＋3产生不同程度的抑制作用,其中高比例的生长素/细胞分裂素对分化苗中的IAA抑制作用强,对GA_1＋3的抑制作用弱,而外源激素的添加对CTK产生促进作用,其中低比例的生长素/细胞分裂素对细胞分裂素的促进作用强。同时,在甘蔗愈伤组织分化幼苗过程中,合适配比及水平的外源激素添加有利于幼苗分化。     

切花秋菊‘神马’花芽分化与内源激素的关系

 【目的】研究短日处理下菊花（Chrysanthemum morifolium）花芽分化与内源激素的关系。【方法】以切花秋菊‘神马’为试材,通过对短日处理下花芽的形态解剖观察及顶芽和叶片中内源激素的测定,研究花芽分化过程中内源激素的动态变化。【结果】花芽分化过程中顶芽中GA3含量下降且大多时期保持在较低水平,叶片中GA3变化与之相反;顶芽中IAA含量先下降,在小花原基分化初期达到最小值,到花冠形成中期达到最大,叶片内源IAA含量在总苞鳞片分化初期前呈上升趋势,随后逐渐下降,到花冠形成期趋于平稳;内源CTK含量大幅增加,均高于未分化期;顶芽中ABA含量先下降,后期呈现上升趋势,叶片中ABA含量变化与顶芽相反,呈现先积累,经短暂平稳期后逐渐减少的趋势。花芽分化开始后CTK/IAA、CTK/GA3、ABA/IAA和ABA/GA3的比值均增大。【结论】高水平的CTK和ABA与菊花花芽分化相关联。在花芽分化初期,顶芽中低浓度IAA、GA3,以及叶片中高含量的IAA、GA3关系到菊花由营养生长向生殖生长转变;在花芽分化后期,顶芽中GA3和IAA的积累关系到花冠形成。从激素平衡来看,维持高比率的CTK/IAA、CTK/GA3、ABA/IAA和ABA/GA3有利于菊花的花芽形成。     

乙炔催花对凤梨‘丹尼斯’花芽分化及内源激素含量的影响

为了探讨凤梨开花的生理机制以及为凤梨花期调控提供理论依据,以凤梨‘丹尼斯’为试材,研究乙炔催花对其花芽分化及内源激素含量的影响。结果表明：乙炔催花7天后诱导‘丹尼斯’进入花芽分化状态,其花芽分化进程可分为花芽未分化期、花序原基分化期、花原基分化期、花萼花瓣分化期、雌雄蕊分化期。在整个花芽分化过程中,植株生长点及叶片中生长素（IAA）、脱落酸（ABA）含量未见明显改变,而玉米素核苷（ZRs）在花序原基分化期和花原基分化期呈现出2次显著增加,赤霉素（GAs）含量在花序原基分化期和器官分化早期显著下降,从而引起ABA/GAs、ZRs/GAs、ZRs/IAA比值在花序原基分化期、花原基分化期和器官分化早期显著增加。表明,高水平的ZRs含量、ABA/GAs、ZRs/GAs、ZRs/IAA比值以及低水平的GAs含量有利于凤梨‘丹尼斯’花芽分化的完成。     

叶底红花芽分化期叶片内源激素的动态变化

应用高效液相色谱法(HPLC)测定了叶底红花芽分化期叶片中内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZR)和脱落酸(ABA)等4种内源激素含量的动态变化。结果显示,这4种激素均有明显的变化规律,其中GA3和ZR含量在花芽分化基本完成时均达到高峰,相反IAA含量处于低谷;ABA含量在花芽分化中期达到高峰,而此时GA3和ZR含量处于低谷;内源激素含量峰、谷时间和叶底红花芽分化的完成时间相一致;4种激素含量的变化均达到极显著差异。研究表明这几种激素均与叶底红花芽分化密切相关,高水平的ABA/IAA、ZR/IAA、ZR/GA3有利于花芽分化,高水平的ABA/GA3有利于花芽孕育。     

3个葡萄品种花芽分化过程中内源激素含量变化初报

[目的]研究3个葡萄品种在花芽分化过程中内源激素含量的变化,探寻葡萄花芽分化及发育的生理机制.[方法]在葡萄花芽分化期,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定巨峰、维多利亚、赤霞珠等3个葡萄品种花芽内4种内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素核苷(ZRs)和脱落酸(ABA)含量的变化.[结果]3个葡萄品种在花芽分化过程中IAA含量均表现为先降低到后期又略有升高;GA3含量在花芽分化期间表现为逐渐减少,到后期降至一个极低水平;ZRs含量均表现为前期降低、后期有较大幅度升高;维多利亚和赤霞珠的ABA含量表现为逐渐下降,巨峰的ABA含量表现为前期升高后急剧下降,3个品种的ABA含量后期均维持在一个较稳定的水平.[结论]巨峰、维多利亚、赤霞珠葡萄的花芽分化需要较高水平的ZRs、低水平的GA3和较低水平的IAA.     

安祖花愈伤组织增殖与分化培养基的优化

[目的]优化安祖花愈伤组织增殖与分化的培养基。[方法]以安祖花愈伤组织为材料,研究基本培养基、外源激素6-BA和NAA对其增殖、分化及分化苗质量的影响,同时检测内源激素含量的变化,观察分化苗的表型特征。[结果]安祖花愈伤组织增殖的适宜基本培养基为:改良MS(1/2NH4NO3+1/2CaCl2),增殖倍数达4.97倍。6-BA和NAA均影响安祖花愈伤组织的增殖、分化,在适宜的温度条件下,当6-BA浓度为0.75mg/L时,愈伤组织增殖较快,分化苗的质量好。安祖花愈伤组织增殖与分化适宜的NAA浓度范围为0.05~0.2mg/L。外源激素的变化引起了安祖花愈伤组织内源激素的改变。[结论]安祖花愈伤增殖与分化的适宜培养基为:MS(1/2NH4NO3+1/2CaCl2)+0.75mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L白糖+7.0g/L琼脂粉(pH值5.8~6.0)。