虫生真菌粗提物抗肿瘤活性的研究

以中国仓鼠卵巢CHO细胞株作为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对42株虫生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验.结果发现有10株菌株对CHO细胞的抑制率超过了50%.并进一步用不同溶剂对这10株虫生真菌次生代谢物质进行提取,并进行体外抗肿瘤活性试验,结果发现菌株RCEF0800的甲醇相活性最高,对CHO细胞的IC50为97.80 μg·mL-1.     

一株虫生真菌的分离鉴定及杀虫活性初探

[目的]为虫生真菌在害虫防治中的应用提供参考。[方法]以从罹病昆虫体表分离的虫生真菌Ekks1为供试菌种,对其进行形态鉴定;以ITS4和ITS5为引物,对Ekks1的ITS序列进行PCR扩增、电泳检测和序列分析,并检测Ekks1对小菜蛾和豆蚜虫的杀虫效果。[结果]经形态鉴定,Ekks1为半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丝孢科,白僵菌属,球孢白僵菌（Beauveria.bassiana）;经PCR扩增,成功获得了Ekks1菌株的ITS1-5.8s-ITS5 rDNA序列,经分析,ITS1-5.8s-ITS5序列为555 bp,菌株Ekks1与GenBank中B.bassiana（EF672309）的同源性为99%;菌株Ekks1在孢子浓度为1.5×10^7个/ml时,感染8 d后小菜蛾的校正死亡率为76%,感染72 h后豆蚜虫的校正死亡率为61%。[结论]Ekks1为白僵菌属真菌,其孢子浓度为1.5×10^7个/ml时,对小菜蛾和豆蚜虫均具有一定的致死效果。     

喜树内生真菌的分离及其抗肿瘤活性菌株的筛选

以中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)株作为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对197株喜树内生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验.结果发现,不同采集部位及不同地理环境分离出的菌株抗肿瘤活性有明显差异,其中以树皮中分离出的内生真菌具有抗肿瘤活性的比例最高.从采集的地理位置分析,由安徽黄山标本所分离的内生真菌抗肿瘤活性菌株比例高于其他2个采集地点.1株从黄山喜树果实上分离的菌株对CHO细胞的抑制率超过50%,初步鉴定为Rhizopycnis属真菌.     

虫生真菌Isaria cateniannulata次级代谢产物及抗肿瘤活性研究

[目的]对虫生真菌环链棒束孢(Isaria cateniannulata)的次级代谢产物进行分离并研究其抗肿瘤活性。[方法]采用溶剂萃取、硅胶柱色谱、凝胶Sephadex LH-20等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定,利用MTT法对化合物的抗肿瘤活性进行测试。[结果]从虫生真菌Isaria cateniannulata中共分离得到8个化合物,分别为β-麦角甾醇、豆甾-4-烯-3-酮、5α,8β-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯3β-醇、4-methyl-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one、(R)-甲羟戊酸内酯、对羟基苯甲醛、β-石竹烯和石竹烯氧化物。除化合物4外,其余化合物均是从该种中首次分离得到。抗肿瘤结果显示,化合物7、8对肿瘤细胞具有一定的抑制能力。[结论]该研究为新的抗肿瘤药物开发方面提供了广阔空间。     

40株虫生真菌发酵液对白色念珠菌的抑制作用

以白色念珠菌(Candida albicans)作为模型菌株,采用杯碟法对40株虫生真菌液体发酵后的代谢产物进行抑菌活性试验,从而筛选出与高活性抑菌代谢产物相对应的菌株.结果表明,古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii)RCEF0866、RCEF0857菌株、斜链拟青霉(Paecilomyces sp.)RCEF0189菌株、多形白僵菌(Baeuveria amorpha)RCEF0285菌株、绿色野村菌(Nomuraea prasina)RCEF0879菌株经液体发酵产生的代谢产物具有较强的抑制白色念珠菌活性,其抑菌圈直径分别为17.28、16.59、17.07、15.66和22.78 mm.     

虫生真菌的研究与利用

虫生真菌的研究与利用湖南省植物保护研究所李宏科利用昆虫病原微生物防治害虫是在虫生真菌研究基础上发展起来的。虫生真菌研究最早可追溯到１７７６年，当时Ｄｅｇｅｅｒ记载了虫霉属（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）。１９３４年，Ｂａｓｓｉ研究证明，家蚕白僵病的菌原...     

几株虫生真菌对小菜蛾的毒力测定

为筛选出对小菜蛾具有强毒力的菌株,对采自不同地方被真菌侵染死亡的68头昆虫上分离出的62株虫生真菌,再以小菜蛾(Plutella xylostella)为试验昆虫,从中选出14株生长快、产孢多的菌株进行毒力测定。结果表明:14株真菌对小菜蛾均有致病性,但不同菌株对蚜虫的毒力存在明显差异,毒力最强的为11号、12号和13号菌株,在1.5×107个孢子/mL下,对小菜蛾的校正死亡率高达96%、98%和98%。     

虫生真菌的毒力稳定性研究

在虫生真菌生防制剂的应用越来越重要的今天，突破虫生真菌田间毒力不稳定的技术瓶颈是其制剂产业化的前提。本文对虫生真菌毒力不稳定的表现，导致的原因和克服对策的国内外研究进展进行了简要综述，并探讨了该领域的研究方法。     

几种虫生真菌代谢产物生物活性的初步研究

检测了虫生真菌拟青霉属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）５个种以及镰孢属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）２个种共１０个菌株的代谢产物对小麦胚芽鞘伸长生长的影响。结果表明,粉质拟青霉（Ｐ．ｆａｒｉｎｏｓｏｕｓ）的８０＾＃菌株代谢产物粗提物各稀释倍数（１０００００,１０００和１０倍）处理皆能显著促进小胚芽鞘的伸生长,生长率分别为９１．７％,７４．２％和９８．３％;宛氏拟青霉（Ｐ．ｖａｒｉｏｔｉｉ）２５＾＃菌株在上述浓度     

虫生真菌在农林害虫生物防治中的应用

简要回顾了虫生真菌的研究历史和现状,列举了虫生真菌所属的32个属,并对研究和应用较多的白僵菌属BeattveYia和绿僵菌属Metarhizium等9种虫生真菌的特性进行了较详细的分析：雕蚀菌属Coelomornyces适合于防治蚊Culicidae幼虫;白僵菌属是目前世界上应用最成功的虫生真菌,它可用来防治玉米螟Pyrausta nubilalis和松毛虫属Dendrolimus等多种农林害虫;绿僵菌在防治土居害虫方面如金龟子属Anisoplia幼虫有着独特的效果等。分析了虫生真菌的侵入机制,最后讨论了应用虫生真菌防治农林害虫的优势和不足。优势主要是昆虫病原真菌能侵染害虫的各个发育阶段和能引起疾病的流行等,而不足则是虫生真菌的施用效果受环境中的温湿度影响较大,且防治效果较慢等。表1参24     

秦巴山区虫生真菌的分离鉴定与多样性分析

【目的】对陕西境内秦巴山区5个不同地区采集的昆虫进行虫生真菌分离鉴定及多样性分析,为秦巴山区农林作物害虫的生物防治提供菌种资源。【方法】2018-2019年连续2年从陕西境内秦巴山区的留坝县、柞水县、凤县、周至县和鄠邑区5个地区,选择阔叶林、针叶林及低矮灌木等不同生境进行昆虫样本采集。在无菌操作条件下,利用孟加拉红培养基分离虫生真菌,采用形态学和分子生物学方法对虫生真菌进行鉴定,并采用Simpson多样性指数、Shannon-Wiener指数和均匀度指数(Pielou)对秦巴山区虫生真菌的多样性进行分析。【结果】2018-2019年连续2年从陕西境内秦巴山区的留坝县、柞水县、凤县、周至县和鄠邑区共采集昆虫样本243只,归属于8个目。利用孟加拉红培养基从采集的243只昆虫表面和虫体中分离得到虫生真菌187株,经形态学和分子生物学鉴定归属于9目13科22属。优势目为丛梗孢目（Moniliales）,共120株虫生真菌（占比64.17%）,归属于2科9属,其中棒束孢属（Isaria）占比最大(占总数量的18.72%)。多样性分析结果表明,秦巴山区虫生真菌群落多样性丰富,但物种均匀度偏低,优势种属现象较为明显,有4个地区的优势菌均为棒束孢属（Isaria）。此外,5个昆虫采集地区虫生真菌群落具有一定的多样性,但单一地区物种分布的均匀程度较整体偏高。【结论】秦巴山区虫生真菌种类多、分布广,多样性较为丰富。     

20株拟青霉属虫生真菌甲醇提取物

用二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基酶标仪法,对拟青霉属5个种的20个菌株培养液提取物的自由基清除活性进行了比较研究,发现不同种拟青霉的甲醇提取液的自由基清除活性差异很大,在浓度为5.0 mg·mL-1,37℃保温10 min时,自由基清除活性最高为71.9%,最低为15.9%;同种不同菌株之间的活性也有较大的差异.自由基清除活性均与反应时间和样品浓度成正相关关系.二苯基苦基苯肼自由基薄层实验结果表明,该属菌株培养液提取物中自由基清除剂都不是单一成分,且组成也不完全相同.     

杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑菌活性研究

为了研究杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑制作用,以苹果腐烂病菌(Cytospora sp.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cintrea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)、玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)为供试菌种,对49株杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)内生真菌及其次生代谢物进行了抑菌活性试验。结果表明,有22株内生菌至少对3种测试菌有抑制作用,9株内生菌对6种测试菌都有抑制作用;11株内生菌的次生代谢产物至少对3种测试菌有抑制作用,4株内生菌的次生代谢产物对6种测试菌都有抑制作用。说明从杜仲内生真菌中可以选择出对植物病原真菌具有良好抑制作用的菌种。     

红树内生真菌BYY-1中一个酚类化合物的分离鉴定与抗肿瘤活性

采用硅胶柱层析、薄层层析、Sephadex LH-20柱层析从红树内生真菌BYY-1的次级代谢产物中分离到化合物B1.通过乙酰化、NMR、HR ESI-Q-TOF MS等技术鉴定了化合物B1的结构,确定其为首次从红树内生真菌中分离到的化合物.运用MTT法和流式细胞术研究了化合物B1的抗肿瘤活性,结果表明,化合物B1可显著抑制Hela细胞的增殖（IC50=3.3μg/mL）,并且质量浓度为4μg/mL时,能诱导Hela细胞发生明显的凋亡.     

银杏中抗病原真菌的内生真菌的分离筛选

从银杏的根、茎、叶中分离到66株内生真菌，研究结果表明，内生真菌数量与银杏树龄有关，树龄越高，其含有的内生真菌数量越多。抑菌试验测定结果表明，29株银杏内生真菌代谢产物对农作物病原真菌具有一定的抑制作用，表明银杏中存在农用活性菌株。