连翘果实连翘酯苷提取及复配保鲜喷洒液应用研究

以商洛连翘果实为原料,采用超声辅助乙醇提取响应面优化连翘酯苷提取工艺,在连翘酯苷提取物抑菌实验的基础上,以氯化钙、植酸、柠檬酸为复配物,确定最佳保鲜喷洒液配方。结果表明:固定乙醇体积分数为60%、提取温度为50℃的前提下,优化后的提取条件为超声功率150W、提取时间50 min、料液比1∶15,连翘酯苷提取率为5. 852%;最佳保鲜喷洒液配方为2%连翘酯苷提取物+1%氯化钙+0. 15%植酸+2%柠檬酸,对圣女果具有较好的保鲜效果,可适当延长保藏时间。研究结果可为商洛连翘果实中连翘酯苷在食品保鲜方面的应用提供技术参考。     

连翘栽培技术

连翘常用的繁殖方法有播种、分株和扦插。 1、播种在秋季8～9月份采集连翘种子,挑选成熟果实,晒干,敲打,去掉杂质得到纯净种子。贮存5～10℃条件下,翌年3月10日左右,开始催芽（据播种还有25～35天）。方法是将种子在1：2000的赤霉素酒精溶液中浸泡3～4小时,打破休眠;再按重量1：1000比例与湿河沙充分混合,置于10-20℃温度条件下,30天左右即可发芽。然后条播到备好的宽120厘米,高15厘米的畦中,深度为2厘米,行距30厘米,每畦3行。及时浇水,除草,当年可长到60～90厘米。     

不同水分胁迫条件对辽东鞍山地区灌木耐旱性的影响

以辽东鞍山地区的3种常见灌木紫丁香、连翘和榆叶梅为试验对象,研究了不同水分胁迫条件对3种灌木生长和细胞膜透性及酶活性的影响。试验结果表明,紫丁香和榆叶梅的质膜通透性在后期处理中小于连翘,而酶活性高于连翘,所以紫丁香和榆叶梅的耐旱程度高于连翘,适合当地种植。     

洛南县连翘产地气候因素分析研究

以全国知名连翘主产区——陕西省洛南县为研究对象,分析产地2006-2015年十年间的气温、降水量、光照时数、无霜期等气候因素年际变化规律,参照相应年份连翘产量,探讨连翘生产与气候因素的关系。研究表明:产地主要气候因素基本满足连翘生长的要求;连翘产量随气候因子的年际变化而波动,良好的气候状况是连翘正常生长、产量提高的基础生境条件。以期为该县科学应对气候变化,促进县域连翘产业发展提供参考依据。     

高效液相色谱法同时测定连翘中连翘酯苷A、连翘苷和表松脂素含量

目的:采用高效液相色谱仪,同时测定连翘中3种活性成分:连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素含量。方法采用Thermo C18Column(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1 m L·min-1;检测波长为203 nm。结果 3种活性成分(连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素)具有良好的线性关系:连翘酯苷A 0.168~4.200μg(r=0.9998)、连翘苷0.00975~0.24375μg(r=0.9995)和表松脂素0.03~0.75μg(r=0.9999);平均加样回收率分别为:99.44%、99.84%、100.17%,RSD分别为1.82%、2.13%和1.50%。结论:该法测定样品,具有结果准确、重复性好、操作方便和实验条件易于满足等优点。     

湖北小连翘与贯叶连翘中金丝桃素的含量比较

[目的]比较测定贯叶连翘和湖北小连翘中金丝桃素的含量,以期为湖北小连翘这一新金丝桃素植物资源的开发利用奠定基础。[方法]采用HPLC法测定金丝桃素含量,色谱条件为：Supelcosi lODS色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-水-0.3%磷酸,（V∶V=45∶50∶4.5∶0.5,用三乙胺调pH值至6.0）,流速为1ml/min,检测波长为590nm。[结果]相同生长环境下的湖北小连翘中金丝桃素含量约为贯叶连翘中的3倍;湖北小连翘中金丝桃素的含量随着海拔高度的升高呈逐渐下降趋势;金丝桃素在湖北小连翘各部位中以花和幼果中含量最高,可达0.617%～0.877%,在叶和成熟果实中的含量约为0.35%,根和茎中含量极低。[结论]该试验为湖北小连翘的人工种植和科学采收研究提供了理论指导,为湖北小连翘这一新金丝桃素植物资源的开发利用奠定基础。     

星点设计-效应面法优化连翘颗粒剂的制备工艺研究

试验以药用糊精含量、乙醇浓度、干燥温度为主要影响因素,以最低抑菌浓度(MIC)为评价指标,用星点设计-效应面法选择制备工艺的最佳条件。结果表明,连翘颗粒剂的最佳制备工艺条件为:药用糊精含量67.03%,乙醇含量72.91%,干燥温度35.94℃,3个参数为自变量的二次回归模型方程为R1=0.010-1.914.10-3×A+2.288.10-4×B+2.288.10-4×C-1.172.10-3×A×B+1.953.10-3×A×C-3.906.10-4×B×C-4.374.10-4×A2+6.675.10-4×B2-1.542.10-3×C2,利用以上最优工艺,生产三批产品并测定MIC值,均为0.00625μg.mL-1。以上结果显示,用星点设计-效应面法优选连翘颗粒剂的制备工艺方法简便,预测性好。     

甲醇提取连翘苷的工艺优化研究

以连翘为原料,通过单因素试验及正交试验研究了不同因素对提取连翘苷得率的影响,确定了甲醇提取法提取连翘苷的最佳工艺参数。结果表明,影响连翘苷的最佳提取工艺因素为提取时间料液比提取次数,最佳提取工艺条件为A2B2C2。即,提取条件在提取时间2 h,料液比1∶20,提取次数为3次的条件下得率最高为1.21%。     

不同加工方式对连翘药材品质的影响

为明确不同加工方式对连翘药材品质的影响,以生晒法为对照,研究了煮-晒、蒸-晒、煮-烘和一体化机器加工方式对连翘水分、总灰分、醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量的影响。结果表明:不同加工方式下,连翘药材水分和总灰分含量与对照差异不显著;一体化机器加工的连翘药材中醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量显著高于其他加工方式;煮-晒、蒸-晒和煮-烘加工方式下,连翘药材中醇溶性浸出物和连翘酯苷A含量均显著高于对照。不同加工方式对连翘药材品质影响差异较大,各指标都达到《中国药典》规定范围内,一体化机器加工的连翘药材品质最优,煮-晒、蒸-晒和煮-烘方式次之,生晒方式效果最差。     

商洛连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量比较研究

使用高效液相色谱法(HPLC),对比8、9和10月份商洛连翘叶和果实中连翘苷及连翘酯苷A的含量,以探究主要次生代谢产物在连翘成熟期中积累量的变化。研究显示,8-10月连翘苷和连翘酯苷A在叶中的积累逐步增加,而果实中含量则变化不大;连翘同一部位中连翘苷和连翘酯苷A比例的动态变化显示,连翘果实中连翘酯苷A是连翘苷的13倍左右,而在连翘叶中则只有3倍左右。通过比较连翘叶和果实中连翘苷和连翘酯苷A含量变化,可以更加清楚了解主要有效成分的积累变化,为商洛地区连翘采收期选择及规范化生产提供借鉴。     

连翘叶片原生质体分离及瞬时转化

【目的】研究高效分离连翘叶片原生质体的条件，并以PEG介导进行瞬时转化，为连翘基因的同源表达提供技术。【方法】以金叶连翘（Forsythia koreana‘Suwon Gold’）组培苗幼嫩叶片为材料，采用4因素3水平L₉(3⁴)正交试验，分析纤维素酶质量浓度（15，20，25 g/L）、离析酶质量浓度（3，5，7 g/L）、甘露醇浓度（0.2，0.4，0.6 mol/L）及酶解时间（5，7，9 h）对原生质体分离的影响，探索最优酶解条件，并在此条件下分离原生质体，之后以PEG介导转化pSuper1300::GFP质粒，研究其遗传转化效果。【结果】L₉(3⁴)正交试验结果显示，不同处理的金叶连翘叶片原生质体产量为1.17×10⁶~5.71×10⁶ g^-1，影响最大的因素为离析酶质量浓度，且4个因素对产量均有极显著影响；原生质体活力为81.19%~90.69%，影响最大的因素为离析酶质量浓度，且其对活力的影响达到显著水平。最佳酶解条件为：在20 g/L纤维素酶、5 g/L离析酶、0.2 mol/L甘露醇的混合液中酶解9 h，在此条件下原生质体产量为5.57×10⁶ g^-1，活力为86.79%。PEG介导法结果显示，以GFP为报告基因，在转化后的金叶连翘原生质体中可以检测到绿色荧光信号。【结论】获得金叶连翘叶片原生质体分离的最佳条件，且在此条件下原生质体产量、活力较高，能够成功进行瞬时转化。     

4种连翘属植物对土壤含水量变化的生理反应

采用盆栽控水法使土壤含水量由高到低持续减小,研究了连翘、金钟花、东北连翘和金叶连翘4种连翘属植物的生理反应。结果表明:高土壤含水量条件下脯氨酸和丙二醛含量显著增加,相对电导率、可溶性糖含量和PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)变化不显著;当土壤含水量降至10%(饱和含水量的30%)时,可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸和丙二醛的含量急剧增加,相对电导率也明显增大,但是Fv/Fm值在土壤含水量降至2%(饱和含水量的6%)时才开始急剧下降,说明PSⅡ反应中心受到胁迫影响相对较晚。土壤含水量降至5%(饱和含水量的15%)时4种连翘均出现明显的失水萎蔫症状。综合分析4种连翘的抗旱能力依次为:连翘>金钟花>金叶连翘>东北连翘。     

山西历山自然保护区连翘群落及物种多样性

对山西历山自然保护区连翘(Forsythia suspensa)群落进行野外调查,采用TWINSPAN群落分类方法,样方DCA的第1轴基本上反映了各植物群落所在生境光照和水分情况,即DCA第1轴从左到右,海拔逐渐降低,将山西历山自然保护区连翘群落35个样方划分为8个群落类型:①连翘-披针叶苔草群丛;②连翘-披针叶苔草+蓝萼香茶菜群丛;③连翘-披针叶苔草+委陵菜群丛;④连翘+虎榛子-披针叶苔草群丛;⑤连翘-披针叶苔草+委陵菜+兔儿伞群丛;⑥连翘+山核桃-披针叶苔草群丛;⑦连翘-披针叶苔草+大火草群丛;⑧连翘+荆条-卷柏群丛。光照强度逐渐增强,群落土壤的水分条件逐渐改善;第2轴从下到上,海拔逐渐降低,气温逐渐升高。30个优势种DCA排序说明,植物群落中优势种的分布格局,在很大程度上决定着群落类型的分布格局。采用Patrick指数、Simpson指数、Shannon-Wiener指数、Pielou指数、Alatalo指数等反映连翘灌丛的物种多样性,分析了连翘灌丛物种多样性与群落类型、结构及环境因子的关系,结果表明:连翘灌丛物种多样性受其所处的坡向、坡度、土层以及群落物种组成、人类活动干扰等因素共同影响。     

商洛连翘氮磷钾不同配比施肥效应研究

在分析评价试验区生态环境及土壤性状的基础上,对供试连翘氮磷钾不同配比的产量、质量及经济效益等施肥效应进行系统研究,确定氮磷钾优化施肥配比,为商洛连翘优质高产高效种植提供合理的施肥依据。通过正交试验设计16个不同氮磷钾配比的施肥处理方案进行田间试验,获取连翘的产量数据;采用HPLC测定各处理连翘苷的含量;根据试验产量、市场行情及肥料投入,测算增收率。结果表明:1施肥能显著提高连翘药材产量。氮磷钾三元素配施的产量增幅显著,处理14(N4P2K3)效果最为明显,较对照提高464.42%,三元素对连翘产量的影响为氮钾磷。2合理的氮磷钾配比能够提高连翘药材质量。氮磷钾三元素配施的处理10(N3P2K4)连翘苷含量最高是对照的4.7倍,三元素对连翘苷含量的影响为钾氮磷。3施肥是增产增收的重要生产环节。施肥处理的增收率均明显高于对照,处理14(N4P2K3)效果最为显著高达446.3%。研究条件下,依据连翘产量及经济效益得出商洛连翘氮磷钾配比的优选方案为处理14(N4P2K3,折合为N 199.98、P2O544.44、K2O 88.88 kg·hm-2);依据连翘苷含量作为指标成分的配比方案为处理10(N3P2K4,折合为N 133.33、P2O544.44、K2O 133.33 kg·hm-2)。     

不同花型连翘花粉活性比较

[目的]比较不同花型连翘花粉的活性.[方法]应用TTC液染色法、I2-KI染色法和醋酸洋红染色法3种方法测定连翘短花柱二雄蕊花、短花柱三雄蕊花、长花柱二雄蕊花和长花柱三雄蕊花4种花型的花粉生活力,并应用离体培养法比较短花柱二雄蕊花与长花柱二雄蕊花在不同条件下的萌发率.[结果]浓度1％醋酸洋红染色法是连翘花粉活力的最佳检测方法.二雄蕊花的花粉活性高于三雄蕊花;当雄蕊数相同时,短花柱花的花粉活性高于长花柱花.短花柱二雄蕊花和长花柱二雄蕊花2种花型花粉离体萌发的适宜组合为浓度15％蔗糖＋浓度0.01％硼酸＋浓度1.5％琼脂.[结论]试验比较了不同花型连翘花粉的活性,为连翘的进一步开发利用提供了依据.     

连翘苷的提取及其稳定性研究

采用甲醇提取法提取连翘叶中的连翘苷,HPLC法进行含量测定,并用分光光度法测定温度、酸碱度、光照条件和不同食品添加剂对连翘苷提取液稳定性的影响。结果表明,样品连翘苷含量为48.182 mg·L-1,纯度为96.3%。连翘苷提取液不耐高温,50℃以上时,吸光度值下降;连翘苷提取液在中性条件下最稳定,并且光稳定性好。糖类对连翘苷稳定性无明显影响,经过蔗糖、麦芽糖、葡糖糖和果糖处理之后其吸收值在0.4035~0.4037之间;柠檬酸盐类对连翘苷提取液的稳定性影响较大,但与时间因素无关。     

中草药清咽润喉含片的制备

以金银花、菊花、玄参、连翘为主药,以乳糖—甘露醇、山梨醇、糊精、硬脂酸镁为辅料,确定药材和辅料的最佳配比。最佳方案为玄参∶金银花∶菊花∶连翘=4∶3∶3∶2,确定在制备清咽润喉含片时乳糖-甘露醇∶山梨醇∶总膏的质量比为2∶3∶2,润滑剂硬脂酸镁占总混合物料量的2%,粘合剂糊精占总混合物料的3.5%。选用玄参、金银花、菊花、连翘提取物,可在药效作用上相辅相成,四种提取物合用可治疗由肝火旺盛、热邪阻闭于内所致咽喉炎症及细菌感染引起的咽喉炎症,使含片的作用增强。本试验通过设计正交实验,结合药典规定的药品标准及实验经验选择最好的条件,研究得出清咽润喉含片的制备方法是切实可行的。     

基于响应面法的连翘果实总黄酮闪式提取工艺优化

基于响应面法对连翘果实总黄酮的闪式提取工艺条件进行研究,通过单因素试验比较了连翘果实试液液料比、乙醇浓度、闪式提取时间及闪式提取电压对连翘果实总黄酮提取率的影响,然后利用响应面法建立模型进行分析,得出连翘果实总黄酮闪式提取工艺的最优参数并进行验证。结果表明,在连翘果实试液液料比、闪式提取时间和闪式提取电压分别在27∶1、80 s和109 V时能达到最优提取条件;在此条件下,连翘果实总黄酮提取率最高,可达18.256%,重复验证得到连翘果实黄酮提取率的实际均值为18.030%,接近理论值,说明获得的最佳工艺参数准确可靠。研究结果可为连翘果实中黄酮的工业化提取提供一定的理论参考。     

连翘开花结实习性与物候期的观测

采用实地观测的方法,对连翘的物候期及开花习性、果实生长发育规律进行研究,以期为提高连翘产量和研究连翘的栽培、繁殖提供依据。记录了连翘各个生长发育阶段的日照及温度条件、连翘花部特征、连翘果实生长发育动态,并研究了海拔高度对连翘坐果率的影响。结果表明,温度、日照和海拔是影响连翘生长发育的主要因素。适宜连翘种植的年平均温度为5.0~15.6℃,连翘开花结实需要充足的光照,连翘生长的最佳海拔高度为800~860m。     

竹山县连翘简化栽培技术

竹山县有适合连翘生长的地理环境、气候、土壤,而连翘对本地的环境条件适应能力强,野生资源丰富、历史悠久,近年来人工栽培面积逐年递增,通过技术员介绍连翘简化栽培技术,引导、示范带动农户种植连翘、早日脱贫。