盐胁迫对苜蓿愈伤组织细胞形态结构的影响

为了解盐胁迫对苜蓿细胞形态结构的影响,更好地进行耐盐诱变育种,本研究以青睐苜蓿为试材诱导分化了耐盐愈伤组织,并对其愈伤组织细胞的形态和结构进行了比较。结果表明:盐胁迫使愈伤组织细胞面积减小,仅为对照的1/4,对照愈伤组织细胞半径是耐盐愈伤组织细胞的2.22倍,液泡半径是耐盐细胞的2.93倍;盐胁迫对细胞核和叶绿体大小影响不大,但使愈伤组织细胞变短,细胞形状更接近于球形,细胞核位于细胞中间,单位面积中的叶绿体数量增加,并使愈伤组织外观呈黄绿色,细胞排列紧密、均匀,硬度增加。     

大叶蒲公英愈伤组织耐盐突变体诱导与鉴定

为获得大叶蒲公英耐盐突变体,以其叶片为外植体,进行了愈伤组织耐盐突变体的筛选。结果表明,愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基分别为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.04 mg/L与MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 0.02 mg/L+NAA 0.2 mg/L。将继代培养5次的愈伤组织接种在含有不同质量浓度盐的诱导培养基上,经过4次耐盐胁迫,筛选出了耐盐的愈伤组织突变体。通过RAPD检测发现,在NaCl质量浓度为8、10、12 g/L的培养基上愈伤组织扩增条带与不含NaCl的培养基(对照)有差异,证明耐盐的愈伤组织中确实产生了DNA的突变。     

水稻成熟胚愈伤组织耐盐变异体的筛选

在培养基中加入一定浓度的Nacl,对水稻F_2代成熟胚愈伤组织的耐盐突变体进行细胞水平上的筛选，采用逐渐加盐浓度多次继代筛选法。结果表明：此方法是提高耐盐变异体频率的有效措施。诱导愈伤组织Na十Nacl0．3％继代3次的愈伤组织→Ms分化频率达15．74％，获得了在0.3％含盐土壤上种植能正常生长的耐盐株系四个。     

水稻野生型愈伤组织中耐盐细胞频率的影响因素

利用组织培养技术研究愈伤组织的倍性、品种、外植体对野生型愈伤组织中耐盐细胞频率的影响。发现：（１）单倍体和二倍体愈僵组织的耐盐细胞频率比较接近，四倍体愈伤中耐盐细胞频率一般比单倍体和二倍体愈伤组织的小；（２）不同品种的耐盐细胞频率差异大；（３）二倍体植株幼穗培养产生的二倍体愈伤组织和四倍体植株花药培养产生的二倍体愈伤组织的耐盐细胞频率没有显著的差异。     

黑亚14号不同类型愈伤组织结构的透射电镜观察

[目的]通过透射电镜来观察黑亚14号不同类型愈伤组织的超微结构。[方法]采用常规电镜样品制备和观察方法。[结果]透射电镜观察结果表明,初始愈伤组织细胞有非常明显的液泡,细胞核被其挤压位于细胞的边缘一角,但仍可观察到核仁;胚性愈伤组织细胞壁与初始愈伤组织细胞壁相比加厚,在靠近细胞膜的胞质区域里有较多的淀粉粒,且可观察到其内含有淀粉粒的叶绿体;非胚性愈伤组织细胞基本只能观察到液泡,几乎无其他细胞器;褐化愈伤组织细胞器崩解,基本没有细胞器。[结论]亚麻不同类型愈伤组织在细胞超微结构水平上有显著的差异,可以作为反映愈伤组织细胞分化能力的指标。     

玉米体细胞抗盐突变体的筛选及耐盐性鉴定

玉米幼胚所诱导的愈伤组织在继代繁殖后,用NaCl作选择剂,在含质量浓度10～20g·L-1NaCl的N6筛选培养基上连续筛选3代,再转移到无盐的继代培养基上培养3代,得到耐20mg·L-1的抗盐愈伤组织变异体.对愈伤组织相对生长量和游离脯氨酸含量等指标的测定表明,该愈伤组织变异体是耐盐的.耐盐愈伤组织变异体在分化培养基上可分化出再生植株,在10g·L-1NaCl胁迫下耐盐变异体再生植株相对电导率小于对照再生植株,而可溶性糖含量高于对照植株.耐盐株自交得T1代种子,在不同质量浓度NaCl胁迫下测定其发芽率,耐盐变异体后代种子发芽率均高于对照种子发芽率,说明变异体的耐盐性是可遗传的.     

广布野豌豆耐盐性研究

研究了盐胁迫对广布野豌豆种子萌发力与愈伤组织形成的影响.结果表明:广布野豌豆种子的萌发能够适应低于0.6%NaCl浓度的盐胁迫,而更高浓度的NaCl对广布野豌豆种子的萌发不利.广布野豌豆种子萌发的耐盐半致死浓度及耐盐极限浓度分别为1.0%和1.75%.将广布野豌豆下胚轴接种在Ms培养基上培养发现,2,4-D浓度是影响下胚轴愈伤组织形成的主要因素,而NaCl浓度是影响愈伤组织形态结构的主要因素.在0.3%Nacl、1.5 mg/L 2,4-D、0 mg/L 6-BA、0.1%Ca(NO3)2条件下,广布野豌豆下胚轴的出愈率高,愈伤组织的形态也较好.高浓度NaCl对广布野豌豆愈伤组织的形成有不利影响,一定浓度的Ca(NO3)2可缓解高浓度NaCl对广布野豌豆外植体的毒害作用,提高出愈率.     

百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性研究

［目的］从细胞水平分析比较百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性。［方法］应用不同浓度（0、5、10、15、20 g/L）的NaCl 处理百喜草成熟种子，诱导产生耐盐的颗粒状愈伤组织和同种普通愈伤组织，研究其含水量、细胞膜透性、MDA含量、POD酶活性、SOD酶活性的变化。［结果］结果表明：随NaCl胁迫浓度的升高,百喜草耐盐组愈伤组织与对照组愈伤组织在多方面存在明显差异,前者含水量、丙二醛含量均高于后者; POD酶活性、SOD酶活性亦均高于对照组。在提高愈伤组织耐盐性诸因素中,脯氨酸起着重要作用。［结论］该研究为进一步筛选百喜草耐盐突变细胞系奠定了良好的基础。     

玉米耐盐愈伤组织变异体筛选体系的建立

为了寻找离体筛选耐盐作物类型的新途径,特选配了4个适于幼胚培养的玉米杂交组合,以其幼胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。继代5次后,用200 mmol/L的NaCl和5.5 mmol/L的Hyp连续筛选3次,获得耐盐愈伤组织变异体。试验确定了适于玉米幼胚培养的诱导培养基和分化培养基,比较了2种筛选剂的选择效果:用Hyp筛选得到的愈伤组织,其分化频率高于用NaCl筛选的愈伤组织;Hyp的选择频率是NaCl的两倍,表明用Hyp间接筛选玉米耐盐变异体,是一条较为合适的途径。     

大叶蒲公英耐盐突变体的筛选与植株再生

为获得大叶蒲公英耐盐突变体再生植株,以其叶片为外植体,将诱导出的愈伤组织经过不同浓度耐盐胁迫处理,经过筛选与随机扩增多态性DNA(RAPD)检测,确定了耐盐愈伤组织突变体。再分别通过诱导突变愈伤组织形成不定芽和不定根,获得了耐盐突变体的再生植株。结果表明,大叶蒲公英愈伤组织诱导最适培养基为MS+0. 5 mg/L 6-BA+0. 04 mg/L 2,4-D,耐盐突变体不定芽发生的最适培养基为MS+0. 2 mg/L 6-BA+0. 01 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0. 3 mg/L NAA。     

马铃薯耐盐突变体的离体筛选

以4个马铃薯栽培品种的叶片为外植体进行耐盐突变体筛选,结果表明:不同品种愈伤组织的耐盐性存在差异,东农303、鄂1号两品种在细胞水平对NaCl的最大耐受质量浓度为8g/L,费乌瑞它为6g/L,夏波帝为4g/L。当继代次数低于10次,叶片耐盐愈伤组织在无盐胁迫诱导分化培养基上才有进一步诱导再生植株发生的能力;而在盐胁迫诱导分化培养基中,愈伤组织继代次数超过8次即很难继续分化再生。     

栽培番茄耐盐突变体的离体筛选

栽培番茄品种“矮黄”的子叶作为外植体诱导愈伤组织 ,用 Na Cl进行直接高盐胁迫筛选。结果表明 ,2 2 5 mmol/LNa Cl直接高盐胁迫获得了耐盐突变体 ,1 0株完整的再生耐盐植株 ,在 1 5 0 mmol/L Na Cl的盐胁迫下 ,成活率可达 70 % ,而未经胁迫筛选过的原始株成活率则为零。其中 ,1株耐盐突变株能正常开花、结果。对其后代离体培养的茎尖和下胚轴外植体耐盐性进行比较 ,表明其后代仍然保持耐盐性     

体细胞突变体筛选法获得象草耐盐植株

以象草幼穗离体培养诱导产生的胚性愈伤组织为外植体,在愈伤组织继代培养基中添加10～0 g/LNaCl,离体筛选得到的白色颗粒状愈伤组织在分化培养基上再生出植株.再生植株耐盐性鉴定结果:6 g/L海盐的1/2 Hoagland营养液每隔7 d浇灌1次,共浇灌4次,处理24 d时,对照植株全部致死;处理42 d时,24 g/L NaC1离体筛选获得的MN12-1和MN12-2体细胞再生植株生长良好.取MN12-1、MN12-2植株和对照株的节间嫩芽组培苗进行耐盐盆栽鉴定:4 g/L、6 g/L海盐的1/2 Hoagland营养液每隔7 d浇灌1次,共浇灌3次,生长28 d时,MN12-1 和MN12-2植株的叶、茎、根干重显著高于对照植株,MN12-2植株各部分的干重比对照植株提高100%以上,差异极显著.SRAP检测结果表明,MN12-1、MN12-2植株与对照植株在分子水平上存在差异,确认获得了耐盐体细胞突变体.     

利用细胞工程技术培育玉米耐盐自交系及单交种

以玉米骨干自交系黄早 4、齐 319和 8112的幼胚为外植体 ,用含有 10g/LNaCl的培养基筛选获取耐盐愈伤组织。耐盐愈伤组织分化出幼苗 ,自交结实。子一代通过水培进行耐盐性测定 ,选择耐盐植株 ,对其后代继续进行耐盐性鉴定、筛选 ,获得耐盐突变体。以农艺性状稳定和耐盐性稳定的自交系为材料 ,组配出耐盐杂交种N2 - 1×N1- 4A和 8112 - 1×N1- 6A等杂交组合。盐碱地试验表明 ,这些组合适合于在中度盐碱地种植 ,且在生长后期可以用 5 0 %海水灌溉     

柚汁胞愈伤组织的诱导及耐盐性的研究

本试验以柚汁胞为培养物,脱分化产生愈伤组织。研究了汁胞愈伤组织布不同NaCl浓度处理下矿质营养元素的变化。试验表明:在MT附加2,4-K 0.5+BA 1.0.培养基中,柚汁胞愈伤率达98.5％。愈伤组织几乎都是从汁胞柄上产生。在NaCl盐逆境下,愈伤组织生长受抑制。在NaCI 0％～0.5％范围内愈伤组织能够生长,在1.0％～2.0％范围内,生长量不到对照的10％。则定的13种矿质元素中,愈伤组织内Na~+含量为外源Na~+浓度的2.3～4.6倍。而P,K,Ca与Na~+含量成线性相关。     

不同逆境胁迫条件对草珊瑚总黄酮含量的影响

[目的]研究高温、盐、紫外等逆境胁迫及SNP处理对草珊瑚愈伤组织总黄酮代谢的影响。[方法]采用不同的胁迫条件处理愈伤组织，定期取样监测总黄酮含量的变化情况。[结果]30℃下总黄酮含量峰值为45．6μg／ml；50、100mmol／L盐胁迫下总黄酮含量峰值分别为62．1和50．4μg／ml；紫外胁迫处理后，总黄酮含量为40．2μg/ml，是对照组的3．94倍；1、5mmol／L SNP处理后总黄酮含量分别达55．1和78．2μg／ml。[结论]在一定胁迫程度下，高温、盐、紫外等逆境及SNP处理均能显著提高草珊瑚愈伤组织总黄酮含量。     

盐胁迫对麻黄愈伤组织生理生化指标的影响

研究了中麻黄愈伤组织在0.1%(A)、0.2%(B)0、.4%(C)、0.6%(D)0、.8%(E)、1.0%(F)NaCl处理下,生长状态、质膜透性、叶绿素、脯氨酸、丙二醛(MDA)及可溶性糖含量的变化.结果表明:0.2%以下的盐浓度对愈伤组织的增殖影响不大,其耐盐的极限值在0.6%-0.8%.随NaCl浓度的增大和胁迫时间的延长,叶绿素含量总体呈降低趋势;膜透性增强;脯氨酸含量在前期(10 d)和中期(20 d)变化不明显,胁迫后期(30 d)明显增加;MDA含量在前期、中期增加,后期处理A、B、C、D的MDA含量降低,但在0.8%和1.0%盐浓度下继续升高;可溶性糖含量总体均比对照有所增加,但在不同时期及不同处理下积累量有所不同.     

玉米耐盐愈伤组织变异体的筛选及耐盐性分析

为了筛选玉米耐盐愈伤组织变异体,选用4个适于玉米组织培养基因型的幼胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。继代5次后,分别用200 mmol/L NaCl和5.5 mmol/L Hyp连续筛选3次,获得耐盐愈伤组织变异体,分别称为rn变异体和rh变异体,以普通继代培养基上培养的愈伤组织为对照。经一代回复培养,分别在200,250和300 mmol/L NaCl胁迫下,分别测定了rn变异体r、h变异体和对照愈伤组织存活率,胚性愈伤组织百分率,K+、Na+含量;在300 mmol/L NaCl胁迫下,测定了rn变异体、rh变异体和对照愈伤组织的生长量及脯氨酸含量。结果表明,rh变异体愈伤组织的分化频率高于rn变异体,Hyp的选择频率是NaCl的2倍左右;在不同浓度NaCl胁迫下,rh变异体具有较高的愈伤组织存活率和K+、Na+含量;在300 mmol/L NaCl胁迫下,rh变异体的生长量和脯氨酸含量均最高,表现出了较好的耐盐性。     

盐胁迫对芦苇愈伤组织抗氧化酶活性及脯氨酸含量的影响

[目的]探讨芦苇愈伤组织对盐胁迫的生理响应。[方法]以2种芦苇沙芦和水芦愈伤组织为试材,将其置于添加不同浓度NaCl的培养基进行胁迫处理,13 d后测定各项生理指标。[结果]50 mmol/L NaCl胁迫下水芦愈伤组织的细胞活力、TBARS以及活性氧含量均明显增加,而沙芦愈伤组织的则比对照略有降低;300 mmol/L NaCl胁迫下2种芦苇愈伤组织中TBARS与活性氧含量均有所增加;50和300mmol/L NaCl处理下水芦愈伤组织内脯氨酸含量增加,而沙芦愈伤组织的虽在50 mmol/L NaCl处理下降低,但在300 mmol/L NaCl处理下则远远高于水芦愈伤组织的;300 mmol/L NaCl处理下沙芦愈伤组织的4种抗氧化酶活性均显著升高,而水芦愈伤组织的SOD和POD活性虽有所增加,但增幅不如沙芦愈伤组织的。[结论]沙芦愈伤组织具有更强的耐盐性。     

NaCl对咸海卡拉白鱼血清离子、皮质醇和组织Na+,K+-ATP酶活性的影响

将卡拉白鱼(Chalcalburnus chalcoides aralensis)在分别含NaCl 0,2,4,6,8 g/L的水体中饲养30 d后发现,NaCl质量浓度2 g/L和4 g/L组鱼相对增重率与对照组相比无显著性差异,生长良好;6 g/L和8 g/L组鱼相对增重率低于对照组(P<0.05),生长受抑制。血清渗透压随盐度升高而增高(P>0.05);NaCl 4,6,8 g/L组血的Na ,Cl-浓度高于对照组(P<0.05);6 g/L和8 g/L组血K 浓度低于对照组(P<0.05);鳃Na ,K -ATP酶活性除8 g/L组下降外,其余各组鱼均高于对照(P<0.05);血清皮质醇水平随NaCl的升高而呈线性增加的趋势(P>0.05)。