4种木霉对核盘菌的抑制作用

通过对峙培养以及对木霉菌(Trichoderma spp.)次生代谢物对病原菌的抑菌率进行了测定,结果表明,供试哈茨木霉(T.harzianum)、绿色木霉(T.viride)、康氏木霉(T.koningii),以及一株未知种名的木霉菌株TY(Trichoderma sp.)均对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum (Lib) de Bary)有明显的抑制作用.在对峙培养中,木霉菌菌落与核盘菌的菌落相向生长一定时间后,挑取核盘菌菌落内部的菌丝进行镜检,发现有木霉菌孢子存在,且核盘菌发生菌丝变形,如原生质浓缩,菌丝断裂,或菌丝消解等现象.并发现不同种木霉所产生的次生代谢物的活性不同,对核盘菌的抑制作用也存在显著差异.     

康氏木霉对向日葵菌核病菌拮抗作用研究

探讨康氏木霉对向日葵菌核病菌的拮抗效果, 为用于该类病害防治奠定基础。研究表明康氏木霉对向日葵菌核病菌具有较强的拮抗作用。同时对康氏木霉的代谢物进行了活性测定, 结果发现: 康氏木霉挥发性代谢物对向日葵菌核病菌菌丝生长的影响与对照在F0 01水平上差异显著。非挥发性代谢物对向日葵菌核病菌菌丝生长的影响也达F0 01显著水平, 但分析过滤灭菌和高压灭菌两种不同灭菌方式对抗生物质活性的影响并无显著性差异, 说明康氏木霉的非挥发性代谢物具有热稳定性。     

11种木霉菌对葡萄灰霉病菌的拮抗作用

对采自宁夏14个市县的170份土样及其它材料进行分离,得到96株木霉菌株,采用形态分类方法鉴定出9种木霉菌以及2种未知名菌种,它们分别为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、绿色木霉(T.viride)、长枝木霉(T.longibrachiatum)、康氏木霉(T.koningii)、拟康氏木霉(T.pseudokoningii)、顶孢木霉(T.fertile)、黄绿木霉(T.aureoviride)、深绿木霉(T.atroviride)、钩状木霉(T.hamatum)以及T.sp1和T.sp2。竞争及对峙培养结果表明:11种木霉菌种对葡萄灰霉病菌(BotrytiscinereaPers.)均有不同程度的拮抗作用,尤其前四种木霉菌表现出了很强的竞争优势,在对峙培养中对葡萄灰霉菌的拮抗系数为Ⅰ￣Ⅱ,抑菌率达61.8%￣77.6%。在光学显微镜下可观察到木霉菌或缠绕或穿入葡萄灰霉菌菌丝生长,并发生菌丝断裂、消解以及细胞原生质浓缩等现象。     

防治油菜菌核病的木霉和粘帚霉菌株筛选及生防的初报

2002年6月至12月中旬,用4批共200颗菌核作诱饵,分离到粘帚霉(Gliocladiumspp.)、木霉(Trichoderma spp.)、镰刀菌(Fusariumspp.)、青霉(Penicilliumspp.)、毛霉(Mucorspp.)、根霉(Rhizopusspp.)、曲霉(Aspergillus spp.)、腐霉(Pythiumspp.)和少量难鉴定菌株,共计171个菌株,其中粘帚霉80株、木霉55株,分别占46.8%和32.2%,在不同采样期内均为优势种群。所诱捕的木霉经鉴定分为7个种,哈茨木霉和康氏木霉出现较早,而黄绿木霉和拟康氏木霉出现较迟。通过测定所获得木霉菌株对核盘菌的拮抗作用,筛选出Tk1、Th2生防潜能较好的菌株。经离体叶片测定,Tk1和Th2对油菜菌核病的防治效果分别达90.6%和89.1%。     

土壤微生物中向日葵核盘菌抗性资源的挖掘及分子鉴定

为从不同来源土壤中筛选对向日葵菌核病具有较强拮抗能力的拮抗菌株,并进行分子鉴定,分别用PDA、MDA培养基培养核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌丝。结果表明,PDA培养基核盘菌菌丝生长较快,MDA培养基核盘菌菌核形成数量较多。从采集到的5个土壤样品中共分离到微生物单株26株,经过筛选,获得3株具有较好拮抗效果的细菌菌株,分别命名为BMD1、BMD2和BMD3。通过Blast对16SrDNA序列对比分析并结合构建系统发育树分析表明,BMD1与Bacillus subtilis(X60646)亲缘关系较近,序列相似度高于99%;BMD2与BMD3有2个碱基差异,二者同Bacillus pumilus(AB098578)、Bacillus altitudinis(AJ831842)、Bacillus stratosphericus(AJ831841)和Bacillus aerophilus(AJ831844)处于系统发育树同一分枝。     

植物内生木霉的鉴定及其抑菌活性

对分离自健康植物的6种内生木霉菌进行活化,再观察菌落形态、颜色,测量生长速度,观察孢子形态,测量孢子直径范围,进而对供试菌株进行分类鉴定。结果初步鉴定,DBs0-13为多孢木霉(Trichoderma polysporum),DBs57为里氏木霉(T.reesei),DBs66为长孢木霉(T.longipile),40为绿色木霉(T.viride),171为康氏木霉(T.koningii),292为哈茨木霉(T.harizianum)。采用生长速率法测定供试真菌发酵液(相当于稀释10倍)对4种病原真菌的抑制效果。结果表明,6木霉菌对小麦赤霉菌、苹果轮纹菌、油菜菌核菌和可可球二孢菌都有不同程度的抑制作用,其中DBs0-13和171的抑菌率相对较高,并对4种病原真菌都具有抑制作用;6种木霉菌中抑菌率最高的是DBs0-13,其对油菜菌核病菌、可可球二孢的抑制率分别为62.89%、41.12%。     

链孢粘帚霉HL-1-1对核盘菌的抑菌作用及其发酵条件的研究

研究了菌寄生菌链孢粘帚霉HL - 1 - 1菌株对核盘菌 (Scherotiniasclerotiorum)的抑菌作用和发酵条件。结果表明 :菌株HL - 1 - 1对核盘菌的菌丝具有较强的抑制作用 ,并能寄生菌核 ,使菌核腐烂。HL - 1 - 1在含 2 0 %马铃薯 ,0 .3%蛋白胨的培养基上培养 ,pH值为 6,温度为 2 8℃ ,摇床转速为 2 0 0r/min时 ,其产生的孢子最多 ,而且对核盘菌的菌落生长抑制作用最强。     

盾壳霉对核盘菌的重寄生机制研究

室内对峙培养和寄生致腐作用测定结果表明 :盾壳霉 (ConiothyriumminitansCampbell)对核盘菌菌丝生长没有明显拮抗作用 ,但对菌核形成有一定抑制作用。被盾壳霉寄生的菌核表面皱缩、软化腐烂 ,后期菌核表面密生大量盾壳霉分生孢子器 ,并从顶端孔口分泌出黑色球状分生孢子黏液。显微镜检盾壳霉寄生的腐烂菌核石蜡切片 ,结果表明 :盾壳霉菌可在菌核的表面和内部疏丝组织寄生 ,并形成分生孢子器。盾壳霉分生孢子器表生、半埋生或埋生于腐烂菌核上。被盾壳霉寄生的菌核 ,后期拟薄壁组织消解断裂成不连续的残片 ,内部疏丝组织消解 ,在发病后期致密的疏丝组织被盾壳霉菌消解成的网状结构所代替。     

木霉菌对棉花黄萎病菌拮抗的作用

以绿色木霉(Trichodermaviride)、康氏木霉(Trichodermakoningii),以及二株未知种名的木霉菌株(Trichodermaspp.)为供试菌,采用对峙培养测定其对棉花黄萎病菌(Verticilliumdahliae)的抑制作用,并研究了四种木霉菌产生的非挥发性代谢物对菌丝干重的影响。结果表明:在对峙培养中,木霉菌对棉花黄萎病菌均有明显抑制作用,木霉菌产生的非挥发性代谢物可以强烈抑制棉花黄萎病菌生长,明显降低其菌丝干重,并具有热稳定性。光学显微镜下观察,木霉菌丝在棉花黄萎病菌丝上平行或波浪式生长且棉花黄萎病菌丝出现细胞原生质浓缩和菌丝断裂等现象。     

辽宁省药用植物根际土壤木霉属真菌的多样性

对采集于辽宁省药用植物62份土壤样品的木霉属真菌进行分离,获得木霉属真菌78株,采用形态学方法从中鉴定出9种木霉属真菌,分别是哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、绿色木霉(T.viride)、粗壮木霉(T.strigosum)、长枝木霉(T.longibrachiatum)、卷曲木霉(T.spirale)、钩状木霉(T.hamatum)、康氏木霉(T.koningii)、顶孢木霉(T.fertile)和多孢木霉(T.polysporum).其中哈茨木霉分离到34株,占分离到木霉菌总数的43.6%.采用对峙培养法,共筛选出对5种靶标菌抑制率大于70%,对靶标菌菌丝抑制作用明显的菌株4株,其中哈茨木霉2株,绿色木霉1株,钩状木霉1株.     

油菜花瓣附生真菌区系及对核盘菌拮抗作用的研究

采集油菜不同部位脱落花瓣和未脱落花瓣进行附生真菌区系的分析，得到1908个菌株．除了核盘菌Sclerotinia sclerotiorum外，其他真菌经鉴定后主要属于10个属，它们是短梗霉属Aureubas／d／umspp．、镰刀菌属Fusarium spp．、交链孢菌属Alternaria spp．、葡萄孢属Botrytis spp．、黑葱花霉属Pericorda spp．、曲霉属Aspergillus spp．、黑孢属Nigrospora spp．、青霉属Peniccillium spp．、木霉属Trichoderma spp．和附球孢菌属Epicoccum spp．．其中，短梗霉菌、镰刀菌和交链孢菌为优势真菌群．通过菌丝间的相互作用、对峙培养方法测定160个菌株对核盘菌抑制作用．结果表明，供试菌株与核盘菌之间存在重寄生作用和溶菌作用等方面的拮抗机制．并初步筛选得到了一批拮抗作用较强、定殖能力也强的菌株．     

核盘菌菌核重寄生菌的分离筛选

从云南、四川、甘肃、陕西、山西、湖南、河北、北京、黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古等12个省市(区)采集土样103份,采用室内菌核诱捕的方法分离得到了148个真菌菌株,分别属于12个属。其中黏帚霉属(Gliocladium spp.)77个菌株,包括4个种,占全部分离菌的52.03%,为优势种群;其次为青霉菌(Penicillium spp.)21个菌株,分离率为14.19%;镰刀菌(Fusarium spp.)16个菌株,占10.81%;木霉菌(Trichoderma spp.)13个菌株,占8.78%;轮枝菌(Verticillium spp.)8个,占5.41%。对其中寄生率较高的菌株进行回接,结果表明,黏帚霉和木霉寄生核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)菌核的能力强,接种1周后导致菌核腐烂,但不同菌株之间存在差异;而镰刀菌、轮枝菌对菌核的寄生能力较差。并且,首次用菌核诱捕的方法从云南省玉溪市烟草田土壤中分离获得了一株能寄生菌核的捕食线虫丝孢菌,经鉴定为椭圆单顶孢[Monacrosporium ellipsosporum(Preuss)Cooke&Dickinson]。     

绿色木霉对土传病原真菌的体外拮抗作用

体外拮抗作用测定表明 ,绿色木霉 [Trichoderma viride Per. ex Fr. ( T0 2 ) ]对土传病原真菌齐整小核菌 [Sclerotium rolfsii Sacc. ( S0 1) ]和半裸镰孢 [Fusarium semitectum Berk.&Rav.( F0 4) ]有明显的拮抗作用 ,在对峙培养中拮抗系数分别为 2～ 3和 2 .在光学显微镜下观察到绿色木霉对半裸镰孢菌丝的缠绕、使细胞质变稀薄、菌丝消解、菌丝断裂或侵入等现象 .绿色木霉对齐整小核菌形成明显的拮抗圈 ,界面处病菌菌丝的细胞质变稀薄、消解或菌丝断裂 ,病菌菌丝停止生长 .绿色木霉还对齐整小核菌菌核形成包围 ,并抑制菌核的萌发 .     

Are mycoparasitism and chitinase production species or isolate dependent in Trichoderma ?

The relationship between taxonomic status of Trichoderma spp., chitinase production in solid substrate fermentation (SSF) on four media and mycoparasitism in dual culture (confrontation assay)against four plant pathogenic fungi was studied. Seventy five Trichoderma isolates belonging to 35species have been screened. The plant pathogenic fungi used in confrontation assay were Botrytis cinerea , Fusarium oxysporum f. sp. dianthi , Rhizoctonia solani and Sclerotinia sclerotiorum . The SSF media contained wheat bran, crude chitin (from crab shells, SIGMA) and salt solutions. The best performing isolates in mycoparasitism tests were Trichoderma flavofuscum, T. harzianum, T.inhamatum, T. koningii and T. strigosum. Some isolates exhibiting good mycoparasitism produced chitinase in SSF only at low or medium level. In contrary there were isolates with excellent extracellular chitinase production but their biocontrol potential did not belong to the leading group.Statistical methods have been used to evaluate the data.……     

油菜花上真菌种类及其对菌核菌拮抗作用的研究

于油菜初花期与盛花期采取油菜不同部位花瓣和花药进行真菌分离.除菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)外,还以不同的频率分离到葡萄孢菌(Botrytis spp.),交链孢菌(Alternaria spp.),芽枝霉菌(Cladosporium spp.),叶点霉菌(Phyllosticta sp.),附球孢菌(Epicoccum sp.),镰刀菌(Fusarium spp.).其中葡萄孢菌、交链孢菌、芽枝霉菌出现较早,为初花期主要真菌群;盛花期还分离到叶点霉菌和附球孢菌,以镰刀菌出现最迟.1991年从分离真菌中选择101个菌株.通过培养皿法和花瓣法测定对菌核菌的拮抗作用,初步筛选出A_3,A_(25),A_(26),B_(10),B_(13),B_(11),B_(26),B_(31),B_(3(?)),C_8,E_1和E_2 12个对菌核菌拮抗作用较强的菌株.用以上拮抗菌和菌核菌的孢子悬液于24h 时内在实验室条件下先后喷雾接种开花的油菜植株,所有拮抗菌占领花朵百分率为63%～96%不等,而菌核菌不能定殖其上.1992年从151个分离菌株中,筛选出59个对核盘菌具有拮抗作用的真菌菌株,其中葡萄孢菌41个占69.49%,交链孢菌5个占8.47%,芽枝霉菌1个占1.69%,镰刀菌12个占20.34%.     

用木霉培养物防治温床蕃茄苗猝倒病

用玻璃纸对峙法测定了57株从西南四省区获得的木霉对蕃茄倒病原菌(Pythium sp.)拮抗作用。结果表明:有37株对 Pythium sp 有明显拮抗作用,占测定菌株的64.9%,其中又以 Trichoderma aureoviride、T.citrinoviride 和哈茨小霉(T.harzianum)居多。木霉对 Pythium sp 的拮抗作用主要表现为菌丝消解和断裂,与木霉对 Rhizoctonia solani 的拮抗现象明显不同。用一株对Pythium sp 有较强拮抗作用的哈茨木霉制成麦麸砂子培养物,防治温床育苗的蕃茄苗猝倒病获得满意的防效,与化学农药敌克松和五氯硝基苯的防效相当,甚至略优。酿热物温床有利于木霉的生长和营养物竞争作用,因此用木霉防治早春蔬菜温床育苗中猝倒病是很有希望的。     

5个木霉菌株的抑菌谱及部分生物学特性

 5个木霉菌株在对峙培养中对水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、棉花枯萎病菌、油菜菌核病菌等18种植物病原真菌和7株土壤习居镰刀菌都有明显抑制效果。哈茨木霉菌株Th-B的抑菌效果显著高于绿色木霉菌株LTR-2和其他3个菌株,哈茨木霉菌株Th-A和Th-B的产孢能力高于其他菌株,Th-B对辣椒灰霉病的预防效果达65.20%.