柑橘内生真菌的分离与鉴定

自2002—2004年,对广东梅州、重庆北碚、湖南石门的不同种类的柑橘（柑、橙、柚）进行了12次定点取样分离,共分离到柑橘内生真菌5642株,其中有5136株已鉴定,分别属于24个属,在这24个属中,出现频率在1％以上的只有Colletotrichum spp.,Fusarium spp.,Alternaria spp.,Penicillium spp..柑橘内生真菌的静息部位依种类而异,Colletrichum spp．主要分布在柑橘的叶片、枝条、果皮内;Fusarium spp．则主要分布在根中。     

柑橘内生细菌的分离与鉴定

从湖南省石门县园艺场采集到的柑橘材料中,得到柑橘内生细菌分离物75份,经鉴定,分别属于气芽孢杆菌属(Aerobacillus sp.)、气单胞菌属(Aeromonas spp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、黄单胞杆菌属(Xanthomonas spp.)、假单胞杆菌属(Pseudomonas spp.)、土壤杆菌属(Agrobacterium sp.)、乳杆菌属(Lactabacillus sp.).柑橘内生细菌在不同种类的柑橘及同一种类的不同器官中出现的频次不同.     

不同抗性小麦品种叶部真菌区系分析

对抗、感叶枯病小麦品种不同生育时期叶部的附生和内生真菌区系进行了系统分析．结果表明,每个品种都有自己独特的叶部真菌区系,抗病和感病品种叶部附生真菌区系差异不大,但内生真菌区系组成则有明显不同,一般感病品种内生真菌种类多于抗病品种．研究结果还发现,小麦内生真菌种数明显多于附生真菌．小麦叶部内生真菌优势属主要为链格孢属（Alternaria spp．）、青霉属（Penicillum spp．）和曲霉属（Aspergillus spp．）;附生真菌优势属多为木霉属（Trichoderma spp．）和镰刀菌属（Fusarium spp．）．生育时期对小麦叶部真菌区系组成具有较大影响,随生育时期延长,叶部附生和内生的真菌种类也不断增多．     

杨树内生真菌群落多样性1）

为了探究杨树内生真菌的群落多样性,采用组织分离法,从杨树的叶、枝、干皮及根中分离出992个真菌菌株,经过鉴定,这些菌株分别归属于2亚门、4纲、4目、5科、13属。研究表明,链格孢属（Alternaria spp．）和茎点霉属（Phoma spp．）为优势菌种。不同部位、不同树龄、不同品种的杨树内生真菌的数量和种类具有一定的差异,说明内生真菌具有一定的宿主和组织专一性。运用多样性指数可以定量的直观地体现内生真菌群落多样性的高低。     

苦楝内生真菌的生物多样性研究

本文首次对生长于安农大校园、安徽灵璧、江苏无锡、陕西咸阳的苦楝植物内生真菌进行了生物多样性研究。初步分离培养获得290株内生真菌，经分离纯化、形态观察、显微鉴定，它们分属于1亚门、5目、6科、11属。研究发现：不同地理来源的相同部位内生真菌的分离频率不同，不同地理来源不同季节相同部位内生真菌的分离频率也不同；不同部位的内生真菌密度存在显著的差异；各个部位内生真菌的密度在春、夏季和秋季的变化不尽相同，体现了其明显的生物多样性规律。     

鱼腥草内生真菌多样性分析

为探索鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb)内生真菌类群组成及多样性,采用组织分离法对不同季节、不同部位的鱼腥草内生真菌进行分离,以形态学和分子生物学方法鉴定,通过分离频率、Shannon-Wiener多样性指数等分析鱼腥草内生真菌的多样性。结果表明,分离得到内生真菌3 822株,分属于19个属,其中交链孢属Alternaria和镰孢菌属Fusarium为优势菌群,分别达37.55%和18.50%;在夏季分离得到的内生真菌最多;根中分离得到的内生真菌Shannon-Wiener多样性指数(H′)最大,为2.06;不同季节中鱼腥草内生真菌春季和夏季的相似性最高,为0.74;不同组织中叶与花的相似性最高,为0.83。鱼腥草内生真菌具有多样性,不同季节和不同组织部位的鱼腥草内生真菌存在差异性。     

柑橘黄龙病植株叶片中脉内生真菌多样性

从柑橘黄龙病植株叶片中脉中分离获得内生真菌21株,经分子鉴定属于11个属,优势菌群是炭疽菌属。从健康植株中分离获得内生真菌35株,经分子鉴定属于18个属,优势菌群同样是炭疽菌属。黄龙病植株内生真菌数量和种类都少于健康植株。     

蛇足石杉内生真菌的动态分布

不同的季节分别对药用植物蛇足石杉（Huperzia serrata）根、茎和叶中的内生真菌进行分离,共得到内生真菌98株,根据形态学进行鉴定为12个属,其中Alternaria和Aspergillus在组织中出现的频率较高,为其优势种群。分类研究结果表明,内生真菌在蛇足石杉的组织中分布存在较大差别,具有一定的组织选择性。该研究丰富了内生真菌资源,为该植物内生真菌资源的开发利用提供了理论基础。     

几株内生真菌对三峡地区柑橘的生物保鲜作用

从三峡地区自然腐烂的柑橘果实上分离出1株优势致腐菌,经r DNA-ITS序列分析和形态学观察,鉴定该菌为Penicillium citrinum。用来自三峡地区特有灌木疏花水柏枝(Myricaria laxiflora)的12株具较高抗氧化活性内生真菌,分析其对柑橘致腐菌的拮抗作用。结果表明,其中4株具有较好的拮抗效果,菌株SG-4的发酵液水相粗提物的抑菌活性最好,在柑橘中亦可抑制致腐菌生长,自然贮藏过程中有效阻止柑橘果实腐烂,说明可在三峡地区柑橘的生物保鲜中进行推广和利用。     

野菊内生真菌生物多样性与生态分布

通过采样、分离、培养与鉴定,对信阳地区野菊[Dendranthema indicum (L.) Des Moul.]内生真菌的群落结构及生态分布进行了研究.结果表明,野菊内生真菌具有丰富的生物多样性,分离得到真菌21种,它们多数为半知菌,少数为子囊菌.其中,刺盘孢菌(Colletotrichum spp.)、拟茎点霉(...     

油菜菌核菌拮抗性柑桔内生细菌的筛选及菌种鉴定

采用对峙培养法,从87个柑桔内生细菌分离物(YS01～YS87)中筛选到对油菜菌核病菌具有拮抗作用的内生细菌分离物6个.结果表明,柑桔内生细菌不同分离物之间对油菜菌核病菌的抑菌作用有显著差异,抑菌能力最强的是YS45,其抑菌圈直径达2.7 cm,显著优于其他分离物.经细菌分类学鉴定,该分离物为枯草芽孢杆菌(Bacill...     

三株柑橘溃疡病生防内生细菌对脐橙感染溃疡病后几种防御酶活性的影响

防御酶活性是寄主防卫反应能力的重要指标,很多生防因子可引起植物的防御酶活性增强。在前期工作中筛选到3株对柑橘溃疡病有防治效果的内生细菌Bacillus sp.、GN222、Kosakonia cowanii GN223和Bacillus subtilis GN232,为明确其防病机理,测定了3株细菌对纽荷尔脐橙感染溃疡病菌后几种防御酶活性的影响。结果表明,在感染溃疡病菌的情况下,3株内生细菌均可不同程度地诱导和增强脐橙树体内防御酶的活性。其中内生细菌对树体多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)的诱导强度小于溃疡病菌对这2种酶的诱导;菌株GN222对树体过氧化氢酶(CAT)的增强作用明显强于其他菌株;菌株GN223对树体过氧化物酶(POD)的诱导作用强于其他菌株;各处理中SOD活性总体较弱。总之,待测内生细菌对脐橙感染溃疡病菌过程中防御酶具有一定的诱导作用,但酶活性变化的时间和幅度因内生菌株不同而有明显的差异。试验结果可为3株内生细菌应用于柑橘溃疡病的生物防治提供理论依据。     

不同柑橘品种对链格孢褐斑病的感病性离体评价

链格孢褐斑病（Alternaria alternata pv. citri）主要为害橘类,以及橘和柚,或橘和橙的杂交柑橘,引起落叶、落果、枯梢,带病果实因果面病斑而难以鲜销。文章应用该病菌的孢子悬浮液接种离体叶片法评价了42个柑橘品种对褐斑病的感病性,发现橘类中的太田椪柑、新生系3号椪柑、岩溪晚芦、红橘418、杨小2\|6南丰蜜橘、乳橘、无核早橘、瓯柑和满头红均高度感病,少核本地早、朱红和砂糖橘表现免疫;杂柑中的明尼奥拉、奥尔兰多、诺瓦橘、卡拉橘、濑户香、天草、津之香和默科特高度感病,大谷伊予柑和西之香为轻微感病,而爱伦达尔、红玉柑、清见、不知火和南香免疫;橙类、柚和柠檬对褐斑病免疫;而温州蜜柑、常山胡柚和金柑等一些品种的感病性则有待进一步确定。     

柑桔高效离体再生系统研究

研究了植物激素、刻伤、放置方式等因子对广柑子叶和上胚轴切段离体再生的影响 ,建立了一个高效的再生系统 .该系统的最佳条件是 :采用实生苗子叶和上胚轴茎段作为外植体 ,MS无机盐 B5维生素 5%蔗糖 0 .8%琼脂 7.5mg/ L BA 1mg/ L NAA(p H5.7)作为不定梢诱导培养基 ;子叶沿中间纵切为二 ,同时在非切面部分横向刻伤 ,切面朝下与培养基表面接触放置 ;上胚轴则切成 0 .5～0 .8cm长的切段 ,横放于培养基上 .培养条件为恒温 (2 6± 1)℃ ,首先在黑暗下培养 15d,而后转移至16 / 8h光 /暗周期下 ,共经过 70 d培养 ,95%子叶外植体均能发生不定梢 ,平均每个外植体上发生不定梢数为 11.11个 ,96 %的上胚轴切段能发生不定梢 ,平均每个外植体上发生不定梢数为 5个 .这一系统再生频率高 ,操作简便 ,适用于广柑的遗传转化     

桂中南柑橘园区的土壤养分状况分析

在桂中南柑橘园区武鸣区、德保县、西乡塘区、来宾市、隆安县、马山县、上林县、钟山县等8个市(县、区)选取104个具代表性的柑橘园采集土壤样本,定量测定土壤pH、有机质和矿质元素含量等,并进行主成分和聚类系统分析,以探明桂中南柑橘园区土壤养分丰缺状况。结果表明：桂中南柑橘园土壤pH值以酸性为主,最适宜柑橘生长的微酸性土壤(5.5≤pH<6.5)占比仅为19.2%;49.0%的橘园土壤有机质含量不足;土壤碱解氮及有效镁、有效锌、有效铜、有效硼含量普遍不足,低于适量水平的比例分别为51.0%、93.3%、93.3%、89.4%、92.3%,特别是镁和锌缺失严重,缺失水平占比分别为59.6%和63.5%;有效磷和有效钙主要处于适宜水平,适量以上水平的占比分别为76.0%和71.2%;土壤有效钾丰缺并存,不足、适宜、超标的比例分别为42.3%、24.0%、33.7%;有效铁、有效锰含量丰富,处于适量以上水平的比例分别为83.7%和89.4%;主成分和聚类分析表明,德保县、钟山县和武鸣区果园的土壤养分综合状况要好于其他市(县、区)。可见,桂中南柑橘产区生产上应当注意调节土壤pH,适当补充氮、镁和锌肥及增施有机肥,减少铜制剂用量,控制土施硼肥,并重视磷、钙和钾肥的补充与平衡。     

正交试验法优化橘皮色素的超声提取工艺研究

[目的]为提高柑橘附加值,用正交试验法优化橘皮黄色素的提取工艺。[方法]采用单因素试验研究超声波乙醇提取橘皮黄色素的工艺,并采用正交试验确定最佳提取工艺。[结果]试验得出的橘皮色素超声提取的最佳工艺是:提取溶剂70%乙醇,料液比1∶10g/m L,提取温度80℃,超声时间为30 min,超声波功率为200 W。[结论]研究可为橘皮提取色素提供理论依据,为橘皮的综合开发利用提供参考。     

柑桔合子胚早期离体培养获得植株

通过柑桔胚胎发育观察表明,授粉后50天左右,胚囊内仅有一个合子胚,未见珠心胚侵入胚囊,为单独分离合子胚培养的最好时期。取这一发育期的幼果,分离合子胚(或将胚囊预培养后分离合子胚),接种于 White 基本培养基附加腺嘌呤(Ad)20毫克/升、水解乳蛋白(LH)400毫克/升、椰乳(CM)10%和蔗糖10%,在光照条件下发育成双子叶胚。转入 MT 基本培养基附加玉米素(Ze)0.25毫克/升、赤霉素(GA_3)5～10毫克/升,蔗糖浓度降至2%,便发育成苗。