人抑制素α亚基主动免疫对鸡卵泡发育和性腺激素及产蛋率的影响

用人工合成人抑制素α亚基（１－２６Ｇｌｙ．Ｔｙｒ）片段与ＫＬＨ连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高（Ｐ〈０．０５）,蛋重、卵巢上直径大于１０ｍｍ的卵泡数两组间无显著差异。经放免法测定,免疫组外周血雌二醇基础水平比对照组高,但孕酮没有显著性差异。     

抑制素基因免疫对南阳黄牛生殖激素的影响

选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平.结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异.免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异.另外.抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著.这些结果说明抑制素基因重组质粒可促进肉牛产生特异性抗体,且对FSH、E2和P4水平有影响.     

双拷贝抑制素基因免疫对肉牛卵泡和黄体的影响

 【目的】探讨不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对肉牛生殖能力的影响。【方法】将58头同期发情肉牛随机分为6组, 每组肉牛分别注射0.75（T1）、1.5（T2）、2.25（T3）、3.0 mg/头（T4）pcISI质粒、3.0 mg/头 pcMV-S空质粒（C1）和3 mL/头 生理盐水（Ｃ2）,初次免疫21d后进行加强免疫,以探讨抑制素pcISI基因疫苗对肉牛卵泡和黄体发育的影响。【结果】4个剂量组的大卵泡数均高于对照组,除了T1外,其它3个剂量组均与对照组差异显著（P＜0.05）;T3和T4的中卵泡数均高于对照组,且差异显著（P＜0.05）;T3和T4的小卵泡数均高于对照组,且差异显著（P＜0.05）。无论左侧还是右侧,各剂量组成熟卵泡直径均高于对照组,除了T1外,其它3组两侧成熟卵泡均与对照组差异显著（P＜0.05）。无论左侧还是右侧,4个剂量组黄体直径均高于对照组,且均与对照组差异显著（P＜0.05）;T3黄体最大,T1最小,且T3与T1差异显著（P＜0.05）。加强免疫后10 d（BM10）抑制素抗体与成熟卵泡大小相关显著（r＝0.629,P＜0.05）,与黄体大小相关极显著（r＝0.651,P＜0.01）。【结论】双拷贝抑制素pcISI基因免疫可促进肉牛卵泡和黄体发育,2.25mg为最佳免疫剂量,抑制素抗体水平与卵泡和黄体发育有一定的相关性。     

抑制素主动免疫对母牛卵泡发育的影响

本试验以猪精液抑制素粗提物主动免疫母牛,研究了对母牛卵泡发育和内分泌的影响。免疫,母牛的卵泡发育率为１４５．５％,排卵率为１１８．２％,分别比对照组提高４５．５％和１８．２％。通过放射免疫法对免疫牛血液中ＦＳＨ,ＬＨ,Ｅ２水平测定发现,发情时免疫组母牛ＦＳＨ水平高于对照组,免疫组中多卵发育牛ＦＳＨ水平高于单卵牛,免疫组与对照组中ＬＨ水平相差不大,多卵牛发情时Ｅ２水平较高。     

抑制素基因免疫黄牛的黄体发育与免疫纯度及剂量的关系

为探讨双拷贝抑制素pcISI基因疫苗纯度和剂量对肉牛黄体发育的影响,将150头同期发情的南阳黄牛随机分为8个试验组和2个对照组,试验组用pcISI按2种纯度、4种剂量(0.75、1.50、2.25、3.00 mg/头)进行免疫处理,2个对照组分别用空质粒和生理盐水进行处理;初次免疫21 d后进行加强免疫。结果表明:无论用高纯度还是低纯度疫苗免疫,2.25 mg/头剂量处理对黄体的作用效果最明显,且抗体水平与黄体发育密切相关,2.25 mg/头抑制素融合表达质粒组的黄体显著大于0.75 mg/头组(P<0.05),抗体阳性牛两侧黄体显著比抗体阴性牛的大(P<0.05)。     

抑制素基因免疫对母羊生殖内分泌的影响

用抑制素基因重组质粒(pCIS)免疫生产母羊,剂量分别为每只0.2 mg、0.4 mg和0.8 mg,以生理盐水为对照.结果表明:免疫组抗抑制素抗体阳性率达46.7%.加强免疫后第45天,免疫组的促卵泡素(FSH)水平显著高于对照组(P＜0.05).首次免疫后第20天与加强免疫后第45天抗体阳性羊的促卵泡素水平显著高于抗体阴性羊(P＜0.05).与对照组相比,免疫组的雌激素(E2)与孕激素(P)水平无显著变化(P＞0.05).抑制素基因免疫能调节绵羊的促卵泡素水平,但对雌激素与孕激素的水平无显著影响.     

抑制素基因免疫对母羊生殖内分泌的影响

用抑制素基因重组质粒（pCIS）免疫生产母羊,剂量分别为每只0．2mg、0．4mg和0．8mg,以生理盐水为对照。结果表明：免疫组抗抑制素抗体阳性率达46．7％。加强免疫后第45天,免疫组的促卵泡素（FSH）水平显著高于对照组（P〈0．05）。首次免疫后第20天与加强免疫后第45天抗体阳性羊的促卵泡素水平显著高于抗体阴性羊（P〈0．05）。与对照组相比,免疫组的雌激素（E2）与孕激素（P）水平无显著变化（P〉0．05）。抑制素基因免疫能调节绵羊的促卵泡素水平,但对雌激素与孕激素的水平无显著影响。     

抑制素免疫对崇明白山羊公羔羊生殖发育的影响

利用重组抑制素对崇明白山羊雄性断奶羔羊(n=6)在第0天、第21天、第42天、第63天共进行4次免疫,探讨抑制素免疫对其睾丸发育、激素水平及生殖相关基因表达量的影响。结果表明:试验期间,免疫组抑制素抗体水平均显著高于对照组;在试验的第84天阉割时,免疫组和对照组试验羊在体重[(21.87±2.19)kg vs(23.58±5.13)kg]、阴囊周长[(20.95±0.74) cm vs (21.57±1.65) cm]、睾丸质量[(56.88±4.96) g vs(62.99±4.17)g]方面无显著差异;睾丸组织石蜡切片分析表明,免疫组和对照组试验羊在睾丸组织学上没有显著差异;血清卵泡刺激素(FSH)及睾酮(T)水平在二免后7 d免疫组显著高于对照组,其余采样时间无显著差异;血清促黄体生成素(LH)水平免疫组和对照组无显著差异;qRT-PCR检测结果表明,免疫组睾丸组织染色体联会相关基因Dmrtc2表达量极显著高于对照组(3.04 vs 1.00),性腺发育相关基因SOX30基因表达量显著高于对照组(1.48 vs 1.00),雄激素受体基因AR表达量显著低于对照组(0.59 vs 1.00),而FSH受体基因FSHR、LH受体基因LHR、精子发生相关基因GPx4以及减数分裂相关基因DDX4基因表达量两组之间没有显著差异。综上所述,抑制素免疫能短暂提高崇明白山羊FSH及T水平,提高睾丸Dmrtc2、SOX30基因的相对表达量,但对体重、LH激素水平、睾丸质量、睾丸组织学形态、睾丸FSHR、LHR等基因水平无显著影响。     

抑制素基因免疫诱导单胎绵羊孪生的研究

应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P <0 0 5 ) ,免疫羊的抗体阳性率可达 4 6 7%。免疫组与对照组促卵泡素 (folliclestimutatinghormone ,FSH)的含量在加强免疫第 4 5天时差异显著 (P <0 0 5 )。在首次免疫第 2 0天与加强免疫第 4 5天 ,抗体阳性羊的促卵泡素含量显著高于抗体阴性羊 (P <0 0 5 )。免疫羊的双羔率达 39 2 % ,显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,比对照组提高 2 9 2 %。     

细菌DNA和gm-csf基因对抑制素基因免疫的作用

40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,抗体以IgG2α型为主,gm-csf佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P<0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P<0.05),免疫对动情期孕酮水平无显著影响(P>0.05)。上述结果表明,细菌DNA和gm-csf能增强抑制素基因的免疫效果。     

Effect of Inhibin α(1-32)Gene Immunization on the Follicular Development and Reproductive Hormones in Rats

A total of 40 rats, aged in 30 days, were divided into 4 groups and immunized (intramuscularlyinjection) with 0 μg(control), 15 μg (group 1), 25 μg (group 2) or 40 μg(group 3) of inhibin α(1-32) re-combinant expression plasmid pcINH in combination with liposome. Booster was given without liposome onday 20 after primary immunization. The results showed that 50%(13/26) rats were detected in positive anti-body against inhibin. However, the increase of immunization dosage and booster did not promote the ratio ofantibody positive rats. The number of matured follicles above 0.8 mm in diameter in the antibody positive ratswas 2.3 more than that in the negative rats (P＞0.05). The concentration of blood plasma FSH increased dis-tinctively on day 10 after primary immunization (P＜0.05), but no increase was observed after booster immu-nization. The 17-β-estradiol levels in blood plasma of rats between the positive and the negative groups had noremarkable differences (P＞0.05). These results suggested that recombinant inhibin expression plasmid couldstimulate animal body to produce antibody against inhibin.     

抑制素基因免疫京白鸡后在心脏组织中的表达

[目的]探讨基因免疫的安全性。[方法]抑制素基因免疫京白鸡后,取其心脏组织制备石蜡切片,再利用免疫组化方法检测心脏组织切片中是否有抑制素基因残留（即是否有阳性点的存在）。[结果]在心脏组织切片中,试验组和对照组均无阳性点。[结论]抑制素免疫后京白鸡的心脏组织中无外源抑制素表达,说明抑制素基因免疫是安全的。     

抑制素主动免疫对山羊排卵率的影响

抑制素主动免疫对山羊排卵率的影响＊刘玉清＊＊黄群山王建辰（西北农业大学动物医学系,陕西杨陵７１２１００）张家骅（西南农业大学动物养殖学院ＥｆｅｃｔｏｆＡｃｔｉｖｅＩｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎＡｇａｉｎｓｔＩｎｈｉｂｉｎｏｎＯｖｕｌａｔｉｏｎＲａｔｅｉｎＧ...     

抑制素主动免疫对青年奶山羊生殖的影响

本试验研究了抑制素主动免疫对青年奶山羊外周血生殖激素和产羔的影响。选用8只青年奶山羊,随机分成两组,每组各4只。试验组用人抑制素α亚单位片段(1-32)3次皮下注射进行免疫,生理盐水作对照,然后对8只羊间隔11d连续3次颈部肌肉注射氯前列烯醇(PG)0.1mg,末次注射PG发情后本交配种。结果为试验组4只奶山羊首免后均产生了抗体,末次免疫分别达到1∶64,1∶128,1∶64和1∶64,而对照组均未检测出抗体。8只青年奶山羊第3次注射PG后36～42h内全部发情,试验组的外周血促卵泡激素(FSH)的浓度高于对照组,且峰值的出现较对照组早,雌二醇(E2)的平均浓度显著高于对照组,而促黄体激素(LH)和孕酮(P)的平均浓度差异不显著。试验组比对照组产羔数提高80%。结果说明抑制素主动免疫能提高青年奶山羊的生殖性能。     

抑制素基因免疫京白鸡后在卵巢组织中的表达

为了了解用融合表达质粒DNA免疫后,外源DNA在卵巢组织中的表达情况,探讨基因免疫的安全性,在pC IS免疫京白鸡后,取卵巢组织,用免疫组织化学的方法检测切片中是否有抑制素基因表达（即是否有阳性点的存在）。结果发现,在卵巢组织切片中,实验组和对照组均无阳性点。抑制素基因免疫后,经过长时间的代谢,京白鸡的卵巢组织中无外源抑制素表达。     

母猪血脑屏障转运卵泡抑制素的动力学研究

 应用玻璃珠层析和密度梯度离心法从二花脸和长白各5头母猪大脑皮质中制备血脑屏障微囊,从微囊浓度、最适反应时间、离子通道、渗透压等角度分析影响血脑屏障转运卵泡抑制素的因素,获得最适工作条件,建立体外转运方法。应用该方法分析猪血脑屏障转运卵泡抑制素的动力学参数,发现二花脸猪和长白猪的Km值分别为0.17和0.07 pmol·L-1,Vmax值分别为1.15和2.27 pmol·min-1·mg-1(P>0.05)。     

FMDV P1基因DNA疫苗构建及免疫实验

[目的]构建口蹄疫DNA疫苗[方法]构建以PRV为载体的表达FMDV P1基因的质粒pIESZP1和pUTK3CP1,免疫小鼠并检测了免疫后小鼠的抗体水平.将构建的2个真核表达质粒分别转染Vero细胞,通过PCR、IFA、Western-blot等方法检测目的基因的转录和表达.将正确表达目的基因的DNA质粒肌肉接种3周龄的Balb/C小鼠,采用ELISA和SN方法检测了免疫小鼠体内的抗体水平.[结果]携带有FMDV衣壳蛋白P1基因的DNA质粒能引起小鼠产生特异性的体液免疫反应,两重组质粒诱导小鼠产生抗FMDV的抗体水平无差异.[结论]该研究为含有FMDV P1基因重组PRV以及重组病毒的动物免疫试验以评价基因工程疫苗的免疫效果奠定了基础.     

抑制素质粒DNA免疫对跑山鸡产蛋性能和蛋品质的影响

为了探索抑制素质粒(pcISI)DNA免疫跑山鸡能否提高其产蛋性能及产蛋品质,在某养鸡场随机对自由敞放野养在山林的跑山鸡进行口服含有抑制素真核表达质粒pcISI菌落的试验。结果表明:抑制素基因疫苗可以提高跑山鸡的产蛋性能,且对鸡蛋品质无影响,可以大规模应用在蛋鸡生产中。     

不同bFF对延边黄牛卵母细胞成熟及发育的影响

在成熟液中添加不同处理及来源的牛卵泡液(bFF),以研究其对延边黄牛卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响。结果表明:未抽滤组与抽滤组间成熟率差异不显著(P>0.05),但未抽滤组显著提高囊胚率(P<0.05);卵泡直径2~8 mm组、>8 mm组和混合组(2~8 mm组与>8 mm组的混合)之间成熟率、卵裂率和囊胚发育率差异不显著(P>0.05);两试验组(黄体组、卵泡组)成熟率、卵裂率和囊胚率差异不显著(P>0.05),两试验组与血清组相比囊胚率显著提高(P<0.05)。试验结果提示,未抽滤黄体期卵巢表面卵泡内bFF能有效提高卵母细胞体外囊胚发育率。