牛磺胆酸对小鼠胸腺细胞凋亡影响的研究

为研究牛磺胆酸(TCA)对体外培养小鼠胸腺细胞凋亡的影响,探讨其免疫调节作用,采用梯度离心法分离获取小鼠胸腺细胞,37℃培养12 h后与不同浓度TCA共孵12 h。以流式细胞术对原代培养胸腺细胞早期凋亡进行定量检测;应用分光光度法检测了凋亡特异性蛋白酶Caspase-9、Caspase-3活性的变化。结果表明,TCA3组(终浓度为0.30μg/m L)与胸腺细胞共孵12 h后,可极显著抑制磷脂酰丝氨酸外翻,抑制细胞凋亡,TCA2组(终浓度为0.15μg/m L)可显著提高Caspase-9、Caspase-3活性,诱导细胞凋亡。说明TCA通过对体外培养小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用来调节机体免疫功能。     

犬细小病毒通过促进ROS产生/线粒体损伤诱导宿主细胞的凋亡

为探讨犬细小病毒(CPV)引起宿主细胞凋亡的分子机制,用CPV感染MDCK细胞,感染后通过台盼蓝染色法检测不同时间的细胞存活率,用Annexin V-FITC/PI法检测磷脂酰丝氨酸外翻情况,用试剂盒检测Caspase-3活性,分析CPV诱导细胞的凋亡。并通过流式细胞术检测细胞线粒体的损伤和ROS的产生探讨其分子机制。结果显示,随着病毒感染时间的不断延长,CPV可明显降低MDCK细胞存活率,促进磷脂酰丝氨酸外翻,增强Caspase-3活性,表明CPV可引起细胞凋亡。同时还发现CPV可明显提高细胞内ROS的水平,引起线粒体的损伤,这可能是CPV诱导细胞凋亡的重要分子基础。由此可见,CPV诱导MDCK细胞凋亡与CPV增加细胞ROS的产生和线粒体的损伤有关。     

马尾藻多糖对猪脾细胞免疫活性及其抗病毒活性的影响

采用MTT法测定不同浓度马尾藻多糖(Sargassum polysaccharide,SP)对正常猪脾淋巴细胞体外增殖及其感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)后培养活性的影响,并用Griess和ELISA法分别检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。试验结果表明:25～400μg.mL-1的SP能协同伴刀豆球蛋白(ConA)显著促进T淋巴细胞体外增殖,400μg.mL-1的SP显著促进脂多糖(LPS)刺激的B淋巴细胞体外增殖活性。SP提高正常猪脾细胞体外培养不同时间段的NO分泌量,与对照组比较,差异显著(P<0.05);不同浓度SP提高PRRSV感染的猪脾细胞体外培养分泌NO量,与病毒对照组比较,培养8 h时200μg.mL-1SP、12 h时100～400μg.mL-1SP、24 h时100μg.mL-1和400μg.mL-1SP均能显著地促进NO分泌(P<0.05)。400μg.mL-1SP极显著促进体外培养的猪脾细胞分泌IL-2(P<0.01),100μg.mL-1和400μg.mL-1SP显著促进PRRSV感染猪脾细胞IL-2和IFN-γ的分泌。结论:马尾藻多糖通过促进猪脾细胞增殖和分泌NO、IL-2和IFN-γ来调节免疫细胞活性和抗病毒能力。     

红参多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

为了研究红参多糖对免疫抑制模型小鼠免疫功能的调节作用,对40只雄性小鼠,随机分为空白对照组、免疫抑制模型组和RJPE高、低剂量组,并腹腔注射100mg/kg环磷酰胺3次,建立小鼠免疫功能低下模型,灌胃RJPE连续14d,测定白细胞数、脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性。体外试验采用ELISA法测定脾细胞分泌白介素-2(IL-2)的能力。结果表明,100,200mg/kg RJPE可提高免疫抑制模型小鼠的白细胞数(P<0.01)和脾脏T,B淋巴细胞增值能力(P<0.05或P<0.01),200mg/kg的RJPE可提高免疫抑制模型小鼠NK细胞的活性(P<0.01)。20～60μg/mL红参多糖在体外试验中可提高小鼠血清中白介素-2(IL-2)的分泌(P<0.01)。因此,RJPE对免疫抑制模型小鼠具有增强免疫功能的作用。     

酶催化制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸及其抗肿瘤活性研究

以亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R 134a)作为非水介质,以磷脂酶D催化鱿鱼卵磷脂与L－丝氨酸的酰基转移反应制备富含多不饱和脂肪酸(EPA/DHA)磷脂酰丝氨酸(PS),探讨了亚临界R134a体系条件对酶促反应的影响.采用四氮唑蓝还原法(MTT法),研究所制备的EPA/DHA磷脂酰丝氨酸对人宫颈癌细胞(Hela细胞)和结肠癌细胞(Caco-2细胞)的体外抗肿瘤活性.结果表明,磷脂酶D在亚临界R134a中显示出高活性,在6 MPa 、40℃、加水2.4 mL、反应240 min的条件下,酰基转换反应制备EPA/DHA磷脂酰丝氨酸的转化率为84.77％;制备的EPA/DHA磷脂酰丝氨酸对Hela细胞和Caco-2细胞增殖有显著抑制.200 μg/mL PS作用于Hela细胞72 h,可使其存活率下降30％;200 μg/m LPS作用于Caco-2细胞72 h,可使其存活率下降40％.     

白术多糖的提取、纯化和活性研究

[目的]提取和纯化白术多糖,并探讨多糖中蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。[方法]采用醇沉分级、脱蛋白和Sephadex G-75制备柱从中药白术中提取分离得到cPAM、zPAM和PAM 3种多糖,并对这3种多糖进行体外淋巴细胞转化试验。[结果]3种白术多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖均有促进作用;浓度为5μg/ml的zPAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用;浓度为5和10μg/ml的PAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用。[结论]白术多糖的纯化程度与脾淋巴细胞增殖有一定关系;纯化程度高的多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖有促进作用;白术粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

中药芪苓制剂血清药理学方法探讨

以小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖活性为指标,考察中药芪苓制剂血清药理学试验中的给药剂量、给药天数、血清添加剂量和孵育时间等最佳条件.结果表明:按小鼠每公斤体重给生药0、12.5、25.0、50.0 g连续3和6 d,25.0 g.kg-1的剂量对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进作用显著或极显著地优于0、12.5、50.0 g.kg-1(P<0.01或P<0.05),其中连续6 d给药的效果更好;体外细胞培养体系中加入体积分数为20%或40%的含药血清,与加入5%、10%、80%、100%含药血清比较,能够极显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.01),其中以添加20%的效果更好,孵育2 d比孵育3 d的效果更好.     

鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohem agglutin in,PHA)(0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中PHA浓度为400μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80μg/mL)和高浓度组(1000μg/mL、1200μg/mL)(P<0.05),略高于中浓度组(200μg/mL、600μg/mL、800μg/mL),差异不显著(P>0.05)。由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400μg/mL。(2)用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Mu lticyc le AV软件进...     

红三叶寡肽对小鼠免疫功能的影响

[目的]以由红三叶草叶蛋白制备的寡肽为原料,研究其对小鼠生长及免疫功能的影响。[方法]选用64只,体重18～24g的昆明小鼠,随机分成4组,每个处理16只,雌雄各半,分笼饲养。所有小鼠每天上午灌胃一次,灌胃量为0.3ml,其中,3个试验组寡肽溶液灌胃浓度分别为5.0、1.0、0.1mg/ml,对照组灌胃生理盐水,试验期21d。[结果]①灌胃0.1mg/ml寡肽试验组体增重极显著地高于对照组(P<0.01),灌胃1.0mg/ml寡肽试验组增重显著高于对照组(P<0.05);②灌胃0.1mg/ml寡肽试验组的脾重系数极显著高于对照组(P<0.01),所有试验组的胸腺重系数均显著提高(P<0.05),其中,5.0mg/ml试验组与对照组间差异达到极显著水平(P<0.01);③1.0mg/ml试验组的溶血素水平极显著高于对照组(P<0.01),而0.1mg/ml试验组与对照组相比也达到了显著水平(P<0.05);④0.1mg/ml试验组小鼠右耳增厚程度显著高于对照组(P<0.05),表明小鼠迟发性变态反应明显;⑤各试验腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均显著提高(P<0.05),其中,1.0、0.1mg/ml试验组的影响达极显著水平(P<0.01);⑥1.0mg/ml试验组T淋巴细胞百分比显著高于对照组(P<0.05)。[结论]红三叶草寡肽能够有效促进小鼠的生长及免疫力的提高,且以寡肽溶液灌胃浓度为1.0、0.1mg/ml时的效果更为明显。     

牛磺胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为了阐明TCA对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响,本研究分别采用鸡红细胞半体内法和体外培养的腹腔巨噬细胞吞噬中性红法测定了TCA对体内、外小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果证明,高、低剂量的TCA均能极显著的提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率（P〈0.01）,显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的鸡红细胞吞噬指数;0.015μg/ml、0.3μg/ml、1.5μg/ml和15μg/ml的TCA均能显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬率（P〈0.05）,表明TCA具有提高巨噬细胞吞噬功能的作用。采用ELISA法测定了TCA对小鼠巨噬细胞分泌白介素-1β的影响,试验结果表明,高、低剂量的TCA均能极显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中的含量（P〈0.01）,1.5和15？g/mL的TCA可显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.015μg/ml和1.5μg/ml的TCA可极显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.3μg/ml和15μg/ml的TCA可显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.05）,表明TCA具有促进腹腔巨噬细胞的分泌IL-1β的功能。     

山豆根多糖对小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响

为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流武细胞术进行观察和检测.结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体.流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P＜0.01),且随着山豆根多糖剂量增大,凋亡率降低,山豆根多糖腹腔注射剂量为400mg/kg时凋亡率最低,表明山豆根多糖剂量为50～400mg/kg时对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡有明显的抑制作用.     

迭鞘石斛所含多糖对小鼠免疫细胞影响的研究

[目的]研究迭鞘石斛（Dendrobinm chryseum Rolfe）所含多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的影响。[方法]分离提取小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,通过添加和不添加迭鞘石斛所含多糖进行体外培养,以MTT法检测这些免疫细胞增殖的变化情况。[结果]石斛多糖在中、高浓度时可极显著提高小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增值（P﹤0.01）,低浓度时没有增强作用。[结论]迭鞘石斛所含石斛多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的增殖有增强作用,说明对小鼠具有免疫增强作用。     

水稻倒伏指数的配合力分析

采用抗倒伏能力不同的遗传类型的粳稻品种，按Ｇｒｉｆｉｎｇ方法Ⅰ配制成５×５完全双列杂交Ｆ１、Ｆ２，以倒伏指数作为衡量抗倒伏能力的指标。结果表明，倒伏指数的遗传以加性效应为主，倒伏指数的一般配合力在早期世代间较稳定，特殊配合力变化较大、倒伏指数的一般配合力可以在早期世代测定，水稻倒伏指数的一般配合力效应值（ｇｉ）与亲本倒伏指数呈正相关，从亲子间倒伏指数关系的分析中也得出，双亲倒伏指数的平均值对后代倒伏指数的影响大于亲本之一的影响。因此，在抗倒伏育种中最好采用倒伏指数低×低的组配方式。     

银杏叶提取物对体外培养的肉仔鸡脾脏淋巴细胞 增殖及分泌IL-2的影响

为研究银杏叶提取物(EGB)对体外培养的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖及分泌白介素-2(IL-2)的影响,将不同质量浓度的EGB分别加入到体外培养的由伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞中,培养24 h、48 h和72 h后,再分别采用MTT法、ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化和IL-2的分泌量。结果显示,质量浓度为3.33、6.67、13.33、20.00、26.67和33.33 mg.mL-1的EGB能显著促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2(P0.05),其中质量浓度为20.00 mg.mL-1的EGB作用效果较好,表明EGB在体外能促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2。     

花生主要营养品质性状和农艺性状配合力的研究

 以白沙1016、东平立蔓、青岛小洋花生3个高脂肪、高亚油酸品种（其中白沙1016和青岛小洋花生为高蛋白质品种）和牟平兔子墩、五莲大粒墩、文登大粒墩3个低脂肪、高油酸品种进行完全双列杂交。利用Griffing方法2，研究荚果产量、蛋白质和脂肪含量、氨基酸和脂肪酸组分等22个主要营养品质性状和农艺性状的配合力。结果表明，多数性状一般配合力方差达极显著水准，而且大多数性状一般配合力方差都大于特殊配合力方差，说明由加性和非加性基因共同决定这些性状，而以加性基因效应为主。一般配合力和特殊配合力效应分析显示，同一亲本不同性状间一般配合力效应差异较大，同一性状不同亲本间差异亦较大。同一性状不同组合间特殊配合力的变幅较大，而且一般配合力低的亲本间杂交也可以出现特殊配合力高的组合。     

甘草多糖对小鼠脾淋巴细胞的免疫作用

通过体外脾淋巴细胞的培养试验,测定不同浓度的GPS对淋巴细胞的能量代谢水平和IL-2活性的影响.结果表明,添加GPS能明显增强淋巴细胞的能量代谢水平和IL-2的分泌量(P＜0.01),在添加浓度为300 μg/ml时,基本上达到阳性对照组的水平(P＞0.05),再继续增加浓度,测定结果没有明显的差异.表明GPS能诱导激活淋巴细胞,提高其能量代谢水平和IL-2的分泌,具有免疫调节作用.     

玉米抗茎倒折性状遗传的研究

以10个具有抗茎倒折差异的玉米自交系,按完全双列式组配的45个组合为供试材料,经遗传参数估算和通径分析结果：所有抗茎倒折性状基因型间存在显著差异;抗茎倒折性状基因型变异中其一般配合力比特殊配合力重要;同一抗茎倒折性状不同自交系,同一自交系不同抗茎倒折性状一般配合力表现明显差异;多数抗茎倒折性状间的遗传正相关显著,丰产的玉米组合表现较优的茎秆强度。以利用加性遗传效应为主的育种方案,对抗茎大倒折性状改良是有效的。     

丙氨酰-谷氨酰胺对建鲤体外培养淋巴细胞增殖的影响

【目的】探讨丙氨酰-谷氨酰胺（Ala-Gln）对免疫抑制和应激建鲤体外培养淋巴细胞增殖的调控作用。【方法】通过对建鲤注射环磷酰胺和皮质醇来建立免疫抑制和应激模型,以注射生理盐水为对照,分离头肾、脾脏和外周血淋巴细胞进行体外培养,测定培养液中不同浓度Ala-Gln（0.0,2.0,4.0,6.0,8.0和10.0 mmol/L）对淋巴细胞转化率的影响。【结果】免疫抑制模型及应激模型中,建鲤头肾、脾脏和外周血的淋巴细胞转化率均显著低于对照组（P<0.05）,Ala-Gln浓度在0.0～8.0 mmol/L时,可以促进免疫抑制建鲤的淋巴细胞增殖（P<0.05）,在0.0～6.0 mmol/L 时,可以促进应激建鲤的淋巴细胞增殖（P<0.05）,随着Ala-Gln浓度的进一步增大,淋巴细胞转化率不再继续增大（P＞0.05）。【结论】Ala-Gln对离体培养免疫抑制和应激条件下的建鲤淋巴细胞增殖具有明显的促进作用,是有潜力的鱼用抗应激免疫增强剂。     

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白组分影响的研究

以分组对比的方法(加镉组、对照组)研究镉对体外培养的鸡脾淋巴细胞膜蛋白组分的影响。通过体外分离培养鸡脾淋巴细胞,加镉组在培养体系中加入终度为10μmoL/L氯化镉,而对照组加入同体积10.0mmoL/L的PBS,分别培养12、24、36、48和72h后收集细胞,提取膜蛋白,用SDS-PAGE的方法对膜蛋白组分进行分析。结果表明:区带Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ蛋白的百分含量变化不明显;区带Ⅰ和区带Ⅷ蛋白的百分含量呈增加趋势,区带Ⅱ、区带Ⅴ和区带Ⅸ蛋白的百分含量降低,而且在48和72h加镉组的电泳图前沿出现了高分子聚合物,分子量为70900.00。可以得出镉对体外培养的鸡脾淋巴细胞的膜蛋白组分产生损伤的结论。     

玉米测验种类别的比较研究

试验对玉米三类测验种（综合种、单交种、自交系）测定待测系一般配合力（ＧＣＡ）的测定效果进行了比较研究。结果表明，在测定产量ＧＣＡ时，测验种的类别是筛选优良测验种的一个重要参考指标。综合种是较优良的测验种类别，它们基本上都可单独用作测验种；单交种、自交系经严格筛选也能选到优良测验种。在测定农艺性状ＧＣＡ时一般不必对测验种作严格筛选。