DNA的酯酶催化活性研究

应用萘酯坚固蓝反应显色法对ＤＮＡ的酯酶催化活性进行了研究。结果表明，辣椒ＤＮＡ、鲱鱼精ＤＮＡ具有分解萘酯的活性；反应混合物中鲱鱼精ＤＮＡ浓度为０．００３４ｍｇ／ｍＬ时，ＤＮＡ仍有分解萘酯的活性；随着ＤＮＡ浓度增加，ＤＮＡ的催化活性增强。６种寡聚核苷酸均具有催化萘酯水解的能力，但活性强弱不同；４种ｄＮＴＰ均不能催化萘酯水解。双链ＤＮＡ、单链ＤＮＡ的显色反应完全来自ＤＮＡ的催化萘酯水解反应     

DNA催化活性的研究：Ⅱ.DNA分子催化机理探讨

通过乙酸萘酯水解产物的显色反应，研究了ＤＮＡ分子二级结构对催化萘酯水解活性的重要性，结果表明：双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）分子具有良好催化乙酸－α－萘酯、乙酸－β－萘酯水解的活性，而单链ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）则完全不具备这种活性，ＤＮＡ完全酶解产物也不能使α－萘酯产生显色反应。因此认为，ＤＮＡ分子是具有催化活性的生物高分子。从ＤＮＡ二级结构角度探讨了其催化萘酯水解的反应机理。     

DNA催化活性的研究：Ⅰ.裸露DNA分解萘酯活性的检测

将小麦、鲤鱼和λ－噬菌体的裸露ＤＮＡ溶液分别与萘酯－固蓝染色液混合温浴，检测出ＤＮＡ分解萘酯的活性，支持了王身立等关于绿豆ＤＮＡ具有分解萘酯活性的发现，讨论了ＤＮＡ催化活性检测的有关问题及ＤＮＡ催化活性研究的重要意义     

DNA催化活性的研究 Ⅲ.多聚核苷酸的催化作用

以多聚腺苷酸（ｐｏｌｙＡ），多聚尿苷酸（ｐｏｌｙＵ）及其混合复性的ｐｏｌｙＡ·ｐｏｌｙＵ与乙酸－α－萘酯及坚牢蓝ＲＲ盐混合保温，研究了多聚核苷酸催化乙酸－α－萘酯水解的作用，结果表明：由ｐｏｌｙＡ·ｐｏｌｙＵ组成的双链ＲＮＡ具有与ＤＮＡ分子相似的催化活性，ｐｏｌｙＡ这一单链多聚物也能起催化作用，ｐｏｌｙＵ则没有这一功能。据此认为，核酸分子的催化活性与核糖２＇－位脱氧与否无关，而碱基的堆积为素酯分子的疏水奈环基团提供足够的疏水空间，则是催化活性所必须的。双链ＤＮＡ及双链ＲＮＡ都能满足这一条件，ｐｏｌｙＡ中嘌呤碱基堆积则刚能容纳下萘环，所以均能催化萘酯的水解；而ｐｏｌｙＵ中嘧啶碱基的堆积不足以容纳下萘环，因而不具备这一催化作用。     

普洱茶中黑曲霉蛋白酶的催化特性

【目的】探明普洱茶中黑曲霉蛋白酶的催化特性以及影响蛋白酶催化活性的因素，为普洱茶渥堆发酵过程中高效利用黑曲霉蛋白酶提供依据。【方法】以普洱茶渥堆发酵过程中的优势菌黑曲霉为材料，设置不同pH、不同温度、不同浓度金属离子以及金属络合剂EDTA的环境，采用福林酚法测定普洱茶中黑曲霉蛋白酶的酶活。【结果】黑曲霉产生的蛋白酶是由多种蛋白酶组成的复合蛋白酶系，属于酸性蛋白酶。pH 6.0、反应温度60℃时，黑曲霉产蛋白酶的活性最高；Mn²⁺具有增强黑曲霉蛋白酶活性的作用；Ca²⁺具有抑制黑曲霉蛋白酶催化活性的作用。【结论】在合适条件下，黑曲霉蛋白酶将促进普洱茶渥堆发酵过程中茶叶蛋白质的分解。     

植物酯酶反应活性影响条件研究

研究酶液用量、pH值、温度、乙酸-1-萘酯用量等条件对酶促反应影响以及几种金属离子对酶促反应活性的影响,并建立酶抑制方程。结果表明:酶液用量0.25 mL、乙酸-1-萘酯0.6 mL、pH值6.5、温度38℃为酶促反应的最佳条件。Cu2+、Mn2+、Ca2+、Fe2+、Co2+等离子在一定浓度范围内对酶促反应活性具有激活作用,且Cu2+浓度为0.06 mol/L时激活作用最为明显,能提高60.37%。Co2+浓度为0.04 mol/L时次之,能提高51.75%。     

萘乙酸衍生物的合成及其生物活性的测定

从α-萘乙酸出发,衍生合成了萘乙酸甲酯、萘乙酰肼、丙酮萘乙酰腙、唑酮萘乙酰腙、萘乙酸三唑醇酯和萘乙酸烯唑醇酯,并通过核磁共振氢谱进行了结构表征.测定了所有化合物诱导大豆苗生根的活性和萘乙酸三唑醇酯、萘乙酸烯唑醇酯的室内抑菌活性.结果表明,所有衍生物均具有一定的植物生长调节活性,其活性的大小与化合物的油水分配系数没有直接的相关性;α-萘乙酸与三唑醇和烯唑醇等杀菌剂成酯反应后,酯化产物的抑菌活性比三唑醇和烯唑醇本身的抑菌活性低.     

酶抑制法测定有机磷农药含量

通过测定乙酸-1-萘酯在酯酶(蚕蛹酶、鸡肝酶和面粉酶)催化下水解生成的乙酸被有机磷农药抑制前后pH值的变化,推算出有机磷农药对酯酶的抑制率,从而检测出有机磷农药的含量.以ΔpH值为指标,经由单因素试验得出最佳酶促反应条件:反应时间30 min、反应温度35 ℃、固蓝B盐1 mL、乙酸-1-萘酯3 mL.结果发现蚕蛹酶活性最高,且农药对酶的抑制具有选择性,混合酶液未出现特异性提高.     

酯酶同工酶的醋酸萘酯-铁氰化钾染色法的研究

酯酶可将α-醋酸萘酯和β-醋酸萘酯水解生成醋酸和萘酚，利用萘酚能与铁氰化钾反应生成有色物质萘醌的性质可对电泳凝胶上的酯酶同工酶进行染色。     

木瓜蛋白酶的应用

木瓜蛋白酶（Ｐａｐａｉｎ）,又称木瓜酶,来源于番木瓜（ＣａｒｉｃａｐａｐａｙａＬ）末成熟的果实。国际上作工业用途的木瓜酶都指末纯化品,是成分复杂的多酶体系,蛋白电泳带大多在５条以上;其中含木瓜蛋白酶,木瓜凝乳蛋白酶Ａ和Ｂ（ＣｈｙｍｏｐａｐａｉｎＡａｎｄＢ）,木瓜肽酶Ａ（ＰａｐａｙａｐｅｐｔｉｄａｓｅＡ）。它既有很强的蛋白水解催化活性又含凝乳和溶菌活性,还具脂解能力及蛋白合成功能,主要是催化蛋白质水解,也能分解小肽。它的切割分解点很多,大致优先分解精氨酶,苯丙氨酸的肽键。目前应用较多的是它的蛋白分…