小麦白粉菌早期发育与初侵染行为的细胞学研究

病菌孢子的萌发不受寄主专化抗性的影响，在叶面及玻片上均可正常进行；但有些抗源材料可抑制附着胞分瓣的正常分化；附着胞分瓣的形成需要一定的接触刺激，否则将导致产生纤细附着胞；病菌附着胞的多分瓣现象是其多次入侵的表现；高抗性小麦品种多在病菌吸器产生前发生过敏性坏死反应；乳突频率的高低与乳突抗性强弱无必然联系。     

白粉病菌初生芽管对小麦诱导抗性的细胞学研究

利用多种细胞学方法对不同抗病性小麦白粉菌初生芽管的侵染行为及寄主细胞的诱导抗性进行了研究。结果表明，病菌初生芽管可诱导单个寄主细胞，产生比大麦和燕麦更为强烈的抗性，足以抵制后来附着胞的入侵，且这种诱导抗性还可向相邻细胞传递；在超微结构上，诱导抗性表现为寄主乳突反应能力增强，寄主细胞能够在附着胞入侵位点下，产生比高乳突抗性品种结构更为精致和坚硬的半圆形乳突，令附着胞入侵栓无法穿处。此外，本文还对诱导     

白粉病菌初生芽管对小麦诱导抗性的细胞学研究

利用多种细胞学方法对不同抗病性小麦白粉菌初生芽管的侵染行为及寄主细胞的诱导抗性进行了研究。结果表明，病菌初生芽管可诱导单个寄主细胞，产生比大麦和燕麦更为强烈的抗性，足以抵制后来附着胞的入侵，且这种诱导抗性还可向相邻细胞传递；在超微结构上，诱导抗性表现为寄主乳突反应能力增强，寄主细胞能够在附着胞入侵位点下，产生比高乳突抗性品种结构更为精致和坚硬的半圆形乳突，令附着胞入侵栓无法穿入。此外，本文还对诱导抗性的利用问题进行了讨论。     

小麦抗白粉病菌侵染乳突反应的超微结构与细胞化学(英文)

利用透射电镜对小麦白粉病菌与不同抗性寄主相互作用中乳突反应的超微结构进行了系统研究．结果表明,在超微结构上乳突反应是所有侵染位点的共有特征;线粒体、多聚核糖体、高尔基体及各种小囊泡参与了小麦乳突的形成;进入乳突沉积区的大量小囊泡首先形成一个个结构致密的小颗粒,然后堆积起来形成乳突的内部主体和核心,其外围是细胞器解体后沉积的一层染色淡而均匀的无定形物质．乳突沉积开始的早晚及其沉积速度和持续时间决定乳突最终的形态结构、大小及其抗性强弱．乳突抗性的决定因素是乳突沉积的早晚与速度,而不是最终沉积量．乳突抗性强的材料如ＫｈａｐｌｉｘＣｃ８总是在入侵栓进入前已形成较完整的半圆形乳突;而高感寄主如高加索的绝大部分乳突物质是在病菌入侵栓进入后沉积的,所形成的多是沿吸器颈部沉积的筒状无抗性乳突．病菌侵染时寄主细胞壁上过氧化物酶活性显著增强,但与乳突抗性无关     

不同诱导因素对玉米大斑病菌附着胞产生的影响

 附着胞是许多叶部病原真菌的重要侵染机构。在不同温度、光照条件、基质和培养时间下,对玉米大斑病菌1号小种和2号小种分别在玻璃平板和玉米叶片上进行附着胞的室内诱导,发现分生孢子的水悬浮液在玻璃平板和玉米叶片的上表面及下表面都可产生附着胞,附着胞都能正常萌发并产生侵入丝,但在玉米叶片上附着胞和侵入丝的产生时间要晚于玻璃平板,产生数量也少。玉米大斑病菌分生孢子在PD培养基中产生的附着胞数目少于清水处理。影响玉米大斑病菌附着胞生长和发育的决定因素是温度,在玻璃平板上10～36℃培养24h后就可以产生附着胞,但最适宜的     

小麦抗白粉菌初侵染过敏性反应的细胞学研究

利用细胞学方法对小麦抗白粉菌初侵过敏性反应的研究表明，高抗寄主的反应是在病菌入侵栓活动前，由初生芽管或附着胞侵染诱导的主动防卫反应；而在中抗寄主的反应与高感寄主细胞的死亡，则是由坏死的病菌吸器诱导的；且吸器周转的寄主细胞器越少细胞坏死也戟甲，不论是感病还是抗病寄主细胞死亡时，细胞壁上的过氧化物酶活性均显著增强，说明它可能不是决定抗性的重要因子。     

小麦抗白粉菌初侵染过敏性反应的细胞学研究

利用细胞学方法对小麦抗白粉菌初侵染过敏性反应的研究表明，高抗寄主的反应是在病菌入侵栓活动前，由初生芽管或附着胞侵染诱导的主动防卫反应；而在中抗寄主的反应与高感寄主细胞的死亡，则是由坏死的病菌吸器诱导的；且吸器周围的寄主细胞器越少细胞坏死也越早．不论是感病还是抗病寄主细胞死亡时，细胞壁上的过氧化物酶活性均显著增强，说明它可能不是决定抗性的重要因子．     

小麦白粉病菌侵入阶段的观察

用21个白粉病菌系在6个不同抗性小麦品种上进行苗期混合接种,以观察其侵入阶段病菌的发生发展特征。结果表明,在不同品种上,病菌分生孢子萌发率、萌发速度以及附着胞的形成和成熟均无任何差异,只是在侵入阶段和侵入后才表现差异。这与品种的抗性一致。可以认为,苗期接种进行侵入期的观察可作为品种抗性鉴定的方法之一。     

H2O2参与大麦对白粉菌的防卫反应

抗病品种Ｓｕｌｔａｎ－５及其突变体与白粉菌小种Ａ６互作的细胞学研究表明,接种３６ｈ后,抗感品种中白粉菌分生孢子形成附着胞的频率及侵入频率无显著差异。抗病品种比感病品种过敏性反应细胞明显增多,过生反应与Ｍｌａ－１２基因型的大麦品种对白粉菌的小种专化抗性有关,用ＤＡＢ（地氨基联苯胺）观察到Ｈ２Ｏ２在乳突和过敏性反应细胞中积累。接各ｈ后在初生芽管的乳突以及接种１５ｈ后在附着胞下面的乳突有晕圈处有Ｈ２Ｏ２     

特异性MEK抑制剂U0126对玉米大斑病菌孢子萌发、附着胞产生和致病性的影响

 【目的】研究MAPK信号转导途径对玉米大斑病菌生长、发育和致病性的调控作用，为明确玉米大斑病菌和玉米之间互作的分子机制奠定基础，对玉米大斑病的有效防治也有重要的理论意义。【方法】利用MEK特异性抑制剂U0126处理玉米大斑病菌，观测该抑制剂对玉米大斑病菌孢子萌发、附着胞发育和致病性的影响。【结果】U0126对玉米大斑的菌落形态和生长速度没有显著影响，可以形成正常的菌丝、分生孢子，但分生孢子萌发时间晚，芽管短，分生孢子萌发百分率和附着胞产生数目下降，玉米叶片的发病时间延迟2～3 d，发病率下降30%左右。在一定浓度范围内，U0126对分生孢子萌发和附着胞产生的抑制程度随着浓度增加而上升，但随着处理时间的延长而下降。【结论】玉米大斑病菌的分生孢子萌发、附着胞产生和对感病玉米叶片的致病能力受U0126抑制的MAPK信号转导途径调节。     

柑桔叶面炭疽病Colletotrichum gloeosporioides附着胞的研究

在自然条件及人工接种外观无症柑桔叶片表明,柑桔叶片表面存在大量炭疽病菌的附着胞。人工接种幼苗的叶片上虽有大量附着胞存在,但经23个月后仍未见显症发病现象。接种植株上的新叶未见病菌附着胞。叶片组织解剖未发现病菌菌丝,这说明柑桔炭疽病潜伏侵染结构是普遍存在于柑桔叶面的附着胞。     

黄瓜抗白粉性组织病理学研究

用整叶透明染色法研究了黄瓜白粉菌在不同抗病类型品种上的组织病理学表现。结果表明，抗病事件于附着胞产生后的各侵染阶段表达，随品种抗病性增强，附着胞畸形率增大，侵入率降低，吸器数目减少，菌落扩展缓慢，寄主细胞坏死发生时间早，机率高。此外，乳突出现频率与抗病性无关，抗病品种中乳突下形成的吸器较少，表明乳突具有一定的抗侵入作用。     

DHN黑色素与玉米大斑病菌附着胞膨压形成的关系

 【目的】探讨玉米大斑病菌胞内DHN黑色素在附着胞膨压产生过程中的作用,明确玉米大斑病菌的侵入机理。【方法】通过诱导玉米大斑病菌附着胞产生,确定附着胞形成的最佳条件,利用溶质排斥技术及incipient-cytorrhysis技术对玉米大斑病菌野生型菌株01-23和黑色素缺失突变体△St3hnr附着胞细胞壁孔径大小和膨压进行测定。【结果】野生型菌株01-23细胞壁孔径范围是2.1—2.7 nm,膨压在5.4 MPa左右;黑色素缺失突变体△St3hnr细胞壁孔径范围是2.7—3.3 nm,膨压在4.1 MPa左右;缺乏黑色素的附着胞不能形成高膨压,丧失了穿透能力。【结论】黑色素层对溶质分子外渗的阻挡作用导致了附着胞高膨压的产生,膨压产生的机械穿透力在玉米大斑病菌穿透基质平面的过程中发挥了重要作用。     

油菜菌核病致病机理的研究Ⅳ．病菌侵入途径和附着胞结构的观察

油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum)能从寄主表皮直接侵入，还可以由气孔沿着保卫细胞内侧间接侵入表皮细胞，病菌侵入前能形成单一菌丝顶端膨大的单胞附着胞和多细胞组成的复合侵染垫两种侵染结构。这些结果补充了前人观察的不足。     

葱紫斑病发生及防治若干问题的初步研究——I．分生孢子萌发侵染、潜育显症及杀菌剂筛选

对葱紫斑病菌孢子萌发侵染、潜育显症、杀菌剂筛选等进行了研究。结果表明：葱紫斑病病原菌分生孢子在适温下的清水中3h的萌发率可达到87％，附着胞开始形成，6h后附着胞的形成达到高峰。分生孢子的侵入率和附着胞的形成率呈高度正相关；23—30℃适宜孢子萌发，25℃为孢子萌发的最适温度；萌发后干燥6d后孢子死亡。氮、磷、钾肥均可显著降低葱紫斑病的侵染，且氮、钾肥对大葱抗侵染的效果好于磷肥。葱紫斑病的潜育期为3d，其累积显症率与时间的关系曲线为“倒J”型；百菌清对葱紫斑病菌孢子萌发的抑制效果最好，新万生、大生和杀毒矾的效果次之，而多菌灵、甲基托布津、三唑酮效果较差。     

玉米大斑病菌小柱孢酮脱水酶StSCD家族鉴定及其功能分析

【目的】小柱孢酮脱水酶（scytalone dehydratase,SCD）是黑色素合成过程中的关键酶。本文旨在鉴定玉米大斑病菌（Setosphaeria turcica）小柱孢酮脱水酶基因（StSCD）家族,并分析玉米大斑病菌附着胞发育过程中StSCD基因家族表达量差异及SCD抑制剂对黑色素合成的影响,为进一步研究StSCD基因家族在黑色素合成和附着胞发育中的作用打下基础。【方法】利用玉米大斑病菌野生型菌株01-23的全基因组数据,获得StSCD基因家族的全序列,并与玉米小斑病菌（Cochlibolus heterostrophus）、稻瘟病菌（Pyricularia oryzae）、瓜类炭疽病菌（Colletotrichum lagenaria）等真菌的SCD进行序列比对;收集玉米大斑病菌附着胞不同发育时期的材料进行实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析,获得不同时期、不同StSCD的表达量,从而确定与病菌侵染和附着胞黑色素化密切相关的脱水酶基因;使用SCD抑制剂环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌,测定菌落生长速度、黑色素合成量、附着胞膨压等,确定StSCD在附着胞发育过程中的作用。【结果】玉米大斑病菌全基因组中共鉴定到4个StSCD,其编码蛋白具有SCD保守结构域及保守的催化及底物结合氨基酸残基。StSCD3与灰葡萄孢（Botrytis cinerea）中功能冗余的SCD2蛋白具有较高同源性,StSCD4与多主棒孢（Corynespora cassiicola）中参与黑色素合成的SCD蛋白具有较高同源性。通过分析玉米大斑病菌生长发育过程中不同时期StSCD的表达量发现,在附着胞时期4个StSCD表达量均上调,其中StSCD3、StSCD4表达量上调尤为显著,附着胞再生菌丝时期StSCD3、StSCD4的表达量均显著下降,并且在附着胞诱导整个时期StSCD4的表达量较高。环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌后,黑色素合成受阻,附着胞膨压显著降低。【结论】玉米大斑病菌含有4个StSCD,推测StSCD4参与DHN（1,8-间苯二酚）黑色素的合成,并进而影响附着胞膨压积累。     

STK1对玉米大斑病菌附着胞发育过程中糖原和脂肪积累的影响

【目的】通过研究STK1与附着胞发育的关系,明确附着胞发育过程中STK1对糖原和脂肪合成的调控作用,为阐明玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)附着胞发育的分子机制打下基础。【方法】以玻璃平板为疏水基质表面,通过"插片分离菌丝"法使菌丝附着于载玻平板表面,然后将附着有菌丝的玻璃平板置于保湿培养皿中22℃、14 h光照和10 h黑暗交替培养,诱导野生型菌株(WT)和STK1基因敲除突变体(ΔSTK1)的菌丝形成附着胞,每隔12 h显微观测附着胞的形态和发育过程;分别将附着有未经诱导的WT和ΔSTK1菌丝的玻璃平板和经过48 h附着胞诱导的玻璃平板浸没在I2/KI染色液中静置染色48 h,显微观察附着胞发育过程中糖原的变化;分别将附着有未经诱导的WT和ΔSTK1菌丝的玻璃平板和经过48 h附着胞诱导的玻璃平板置于-70℃的超低温冰箱中冷冻处理30 min,然后将玻璃平板置于Oil-red O染色液中静置染色24 h,显微观察附着胞发育过程中脂肪的代谢变化;利用real-time PCR技术检测附着胞发育过程中糖原和脂肪合成关键酶基因的表达情况。【结果】玉米大斑病菌WT菌株和ΔSTK1菌株利用菌丝尖端在玻璃平板的疏水表面均能够产生附着胞,但ΔSTK1菌株的附着胞发育与WT菌株显著不同,WT菌株48 h内为单胞附着胞,诱导48 h后少数附着胞形成了多细胞附着胞,而ΔSTK1菌株在诱导24 h后即出现了扭曲附着胞的异形附着胞形态,48 h后还出现了双杈、多杈和O型等多种异常的附着胞类型;WT菌株和ΔSTK1菌株的菌丝和附着胞进行糖原和脂肪的染色后,发现WT菌株的菌丝和附着胞都有均匀分布的糖原和脂肪,而ΔSTK1菌株的附着胞内几乎没有糖原和脂肪的积累,与WT菌丝的结果不同,在ΔSTK1菌株的菌丝内糖原沉积减少,脂肪主要分布于菌隔部位;附着胞诱导48 h后,WT菌株糖原合酶(glycogen synthase,GS)和二酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol O-acyltransferase,DGAT)基因的表达量比诱导前分别增加了6.6%和40.3%,而⊿STK1菌株GS基因的表达量则下降了9.0%,DGAT基因的表达量仅上升了24.5%。【结论】STK1的功能缺失使玉米大斑病菌的附着胞发育形态异常,糖原积累下降,脂肪分布不均,糖原和脂肪合成的关键酶基因表达量均显著下降,表明糖原和脂肪代谢与玉米大斑病菌的附着胞发育密切相关。     

过氧化物酶在棉花对枯萎病抗病性中的作用

分析了氟乐灵（２μｇ／ｇ土）诱发处理及枯萎病菌侵染后棉苗叶片和根茎部不同细胞定位过氧化物酶（ＰＯＤ）活性的变化．结果表明：（１）总可溶性ＰＯＤ、胞内ＰＯＤ、胞间ＰＯＤ以及细胞壁结合型ＰＯＤ的活性抗病品种高于感病品种；（２）氟乐灵诱发处理及枯萎病菌侵染可提高棉苗组织中上述五类ＰＯＤ的活性，细胞间隙ＰＯＤ及胞壁结合ＰＯＤ活性上升更为明显；（３）枯萎病菌侵染后经氟乐灵诱发处理并产生诱导抗性的棉苗及抗病品种棉苗中胞壁结合ＰＯＤ活性快速上升，增加幅度大，而感病品种前期无明显增加，后期才有较小幅度的上升．这说明过氧化物酶在棉苗对枯萎病的抗病性及由氟乐灵诱发的诱导抗性中起到重要作用     

木荷皂苷对稻瘟病病原细胞的致毒作用

为了探索木荷皂苷抗稻瘟病菌的作用方式,通过显微观察、血球计数板计数、活体侵染等方法,测定木荷5种皂苷对稻瘟病菌孢子和附着胞的致毒作用。结果显示,木荷皂苷对稻瘟病菌孢子及附着胞的抑制作用均强于阳性对照稻瘟灵,R2-A、R2-1、R2-2、R2-3、R3-4、稻瘟灵对稻瘟病病菌的孢子萌发抑制EC50分别为2.73、2.27、0.61、0.95、4.68、13.94μg/m L;在浓度为10μg/m L时,它们对孢子产附着胞的抑制率分别为78.68%、93.27%、97.23%、91.93%、36.34%、9.11%;抑制稻瘟病病菌附着胞产黑色素的MIC分别为7.0、6.0、4.0、6.5、17.0、18.0μg/m L。受处理的稻瘟病病菌孢子侵染活体水稻叶片能力会不同程度下降,同时抑制附着胞黑色素的积聚成为空胞,难以形成高压渗透钉,阻断了稻瘟病病菌的侵染传播。研究表明,木荷皂苷抗稻瘟病病菌对稻瘟病病原不同类型细胞不具选择性,除了作用于菌丝细胞膜外,还可通过抑制孢子萌发、附着胞黑色素积累等方式产生作用;R2-1、R2-2、R2-3是木荷抗稻瘟病病菌的主要活性先导物。     

过氧化物酶在棉花对枯萎病抗病性中的作用

分析了氟乐灵（２μｇ／ｇ土）诱发处理及枯萎病菌侵染后棉苗叶片和根茎部不同细胞定位过氧化物酶（ＰＯＤ）活性的变化。结果表明：（１）总可溶性ＰＯＤ、胞内ＰＯＤ、胞间ＰＯＤ以及细胞壁结合型ＰＯＤ的活性抗病品种高于感病品种；（２）氟乐灵诱发处理及枯萎病菌侵染可提高棉苗组织中上述五类ＰＯＤ的活性，细胞间隙ＰＯＤ及胞壁结合ＰＯＤ活性上升更为明显；（３）枯萎病菌侵染后经氟乐灵诱发处理并产生诱导抗性的棉苗及抗病品