灰毡毛忍冬(金银花)的组织培养研究

[目的]优选灰毡毛忍冬的组织培养的最佳培养基。[方法]选用春季萌发的带腋芽的灰毡毛忍冬茎段为外植体,探讨外植体的最佳灭菌时间,并以MS为基本培养基,附加不同激素浓度配比,筛选丛生芽诱导、增殖及生根培养的最佳培养基。[结果]材料的表面灭菌方法为浓度75%酒精浸泡30 s,然后放到0.1%的HgCl2溶液浸泡8~10 min;在此条件下,污染率为20%,成活率可达80%。最佳诱导培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,萌发率达100%。诱导不定芽增殖的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,增殖率为3.5。诱导生根的最佳培养基为:1/2MS+0.8 mg/L NAA,生根率为90%。[结论]该方法筛选了灰毡毛忍冬的组织培养的最佳培养基,为灰毡毛忍冬的快繁技术提供了理论依据。     

灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶显微特征比较研究

目的 为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法 采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果 灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态（叶形、叶大小）和内部构造（毛茸、气孔指数等）均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论 灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。     

灰毡毛忍冬与丝瓜套种立体种植模式研究

[目的]研究灰毡毛忍冬栽培品种"湘蕾一号"(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)与丝瓜[Luffa cylindrica(L.)Roem.]套种的立体种植模式。[方法]设1个试验组和1个对照组。试验组中灰毡毛忍冬与丝瓜利用大棚棚架进行套种,灰毡毛忍冬株行距为1.5 m×2.0 m,丝瓜栽种于棚架两侧,株距0.3 m;对照组单独种植灰毡毛忍冬,株行距为1.5 m×2.0 m。[结果]套种丝瓜明显促进灰毡毛忍冬的生长,试验组比对照组叶长增加了28.2%,叶宽增加了29.1%,花冠长增加了58.9%,千花蕾鲜重增加了59.1%,绿原酸含量增加了26.0%,鲜花产量增加了36.4%,由于增加了丝瓜收入,最终收益试验组比对照组增加了92.0%。[结论]综上所述,利用废弃的大棚设施,灰毡毛忍冬和丝瓜实施立体套种,不仅产量得到了提高,还大幅度增加了种植效益,最终效益可达12.766 5万元/hm2。     

红外指纹图谱和聚类分析法在山银花(华南忍冬)产域分类鉴别中的应用

[目的]研究红外指纹图谱在山银花产域鉴别中的可行性.[方法]以山银花(华南忍冬)的红外指纹图谱(红外光谱、二阶导数谱)为依据,采用聚类分析对来自6个产地(海南和广东)的华南忍冬进行了分析.[结果]药材粉末的一维红外光谱分析表明,海口、湛江和韶关3个产地与其他3个产地(文昌、琼中、屯昌)在某些化学成分方面有着较显著的差异,表现为湛江区具有3407 cm-1特征吸收峰,韶关区具有1 637 cm-1特征吸收峰,第3号海口区和韶关区分别为具有1 066、1 074 cm-1特征吸收峰,海口、湛江和韶关区具有611、610和615 cm-1特征吸收峰;而另外3个地域(文昌、琼中和屯昌)的华南忍冬化学成分则较相似;根据聚类分析结果可将6个产地分为四类.[结论]红外光谱可为药材的质量控制和产区鉴别提供一个快捷、准确、可行的鉴别方法.     

灰毡毛忍冬生产技术规程

按照《中药材生产质量管理规范》的要求,从范围、规范性引用文件、产地环境、生产技术、病虫害防治、采收加工、分级与包装、生产档案等方面,制定灰毡毛忍冬生产技术规程,以期为灰毡毛忍冬的规范化种植提供依据。     

灰毡毛忍冬生产技术规程

按照《中药材生产质量管理规范》的要求,从范围、规范性引用文件、产地环境、生产技术、病虫害防治、采收加工、分级与包装、生产档案等方面,制定灰毡毛忍冬生产技术规程,以期为灰毡毛忍冬的规范化种植提供依据。     

秀山灰毡毛忍冬中绿原酸、提取工艺的研究

[目的]优选灰毡毛忍冬中绿原酸的最佳提取工艺。[方法]以浸膏得率和绿原酸含量为考察指标,采用L9(34)正交试验方法优选重庆秀山灰毡毛忍冬水提工艺,并采用UV和HPLC测定绿原酸的含量。[结果]以总浸膏得率为指标:15倍水量、提取2次、提取温度85℃、每次30 min;以绿原酸为指标:15倍水量提取2次、提取温度80℃、每次30 min。[结论]该工艺简便、快捷稳定,可为灰毡毛忍冬质量控制提供实验依据。     

忍冬属黄酮合成酶基因FNSII的SNP分析

为挖掘鉴别金银花与山银花的黄酮合成酶基因(flavone synthase II gene,FNSII)SNP位点,以基源确定的5个忍冬属(忍冬、灰毡毛忍冬、红腺忍冬、黄褐毛忍冬、华南忍冬)共计12个样本为研究对象,采用同源克隆法从各忍冬属植物中克隆FNSII基因,分析不同忍冬属植物中的SNP位点。结果显示:克隆分离到的各忍冬属FNSII基因的同源性和相似性高达95%以上;成功克隆获得红腺忍冬、黄褐毛忍冬和华南忍冬的FNSII序列;系统进化分析表明,获得的忍冬属序列与基源鉴定结果一致;通过序列比对,从12个样本中克隆得到的20条FNSII序列中鉴定到38个SNP位点,其中19个SNP位点可用于区分各种属,依据各种属间SNP的差异进行分型,获得5种基因型。     

基于SRAP分子标记的贵州5种忍冬属药用植物遗传多样性分析

[目的]分析贵州5种忍冬属药用植物的遗传多样性,为忍冬属药用植物鉴定、良种筛选及开发利用提供理论依据.[方法]采集贵州6份忍冬属药用植物材料的嫩芽为试验材料,采用SRAP分子标记研究其遗传多样性,并利用NTSYS-pc2.1计算各材料间的遗传相似系数,利用UPGMA进行聚类分析.[结果]从154对SRAP引物组合中筛选出15对重复性好、条带清晰、多态性丰富,且扩增条带(100~1000 bp)数目≥5的引物组合.15对SRAP引物共扩增出197条带,其中178条为多态性条带,多态性条带比率为90.36%,平均每对引物扩增11.87条多态性条带.引物组合Me8-Em10扩增的多态性条带数最多(16条);引物组合Me2-Em2扩增的多态性条带最少(8条);引物组合Me4-Em2扩增条带数为15条,均为多态性条带,但从5种忍冬属药用植物的扩增条带数不同.聚类分析结果显示,6份忍冬属药用植物材料间遗传相似系数为0.4213~0.8477,平均0.5672;其中,野生忍冬与栽培忍冬间遗传相似系数最大(0.8477),二者亲缘关系最近,灰毡毛忍冬与野生忍冬遗传相似系数最小(0.4213),二者亲缘关系最远.在遗传相似系数0.4873处,6份忍冬属药用植物分为两大类,第Ⅰ类包括灰毡毛忍冬、红腺忍冬和黄褐毛忍冬,均为山银花的基源植物;第Ⅱ类包括野生忍冬、栽培忍冬和红白忍冬,均为金银花的基源植物.[结论]贵州5种忍冬属药用植物具有丰富的遗传多样性,SRAP分子标记能有效分析其遗传多样性及亲缘关系,其引物组合Me4-Em2可用于鉴别5种忍冬属药用植物.     

灰毡毛忍冬开花特性及繁育系统的研究

本试验对灰毡毛忍冬开花进程和昆虫访花特性进行了观察,采用离体培养法测定了花粉活力,用联苯胺-过氧化氢法和套袋测定柱头可授性,运用杂交指数、花粉-胚珠比、套袋实验对灰毡毛忍冬繁育系统进行研究.结果表明,灰毡毛忍冬群体花期约30 d,单株花期约16 d,单花花期2～3d.灰毡毛忍冬开花前12 h至开花后36 h柱头可授性强,而花粉活力以开花当天正午时最高.灰毡毛忍冬传粉昆虫以膜翅目和鳞翅目昆虫为主,它们的活动对灰毡毛忍冬的传粉起到了重要的作用.杂交指数OCI=4,判断繁育系统为异交,部分自交亲和,需要传粉者;花粉-胚珠比P/O约为664.4,繁育系统为兼性异交;套袋实验测定自交结实率3.03％,异花授粉结实率为79.17％,繁育系统为异花授粉.灰毡毛忍冬繁育系统为异交,部分自交亲和,异花授粉需要传粉者.     

金银花与山银花的性状差异及鉴别方法

综述了金银花的植物来源忍冬和山银花的植物来源灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬和黄褐毛忍冬,并对其来源植物花蕾性状在表面、萼筒、萼齿、花丝和花蕾大小等方面的特点加以区分,从内部显微结构和挥发油、黄酮类化合物、有机酸类化合物等化学成分对二者进行比较,同时结合DNA指纹图谱的研究,寻找金银花与山银花的区别,形成一套多元多息鉴别...     

灰毡毛忍冬愈伤组织诱导和增殖的研究

将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS 2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA 0.5 mg/L。     

超声波对灰毡毛忍冬种子萌发能力的影响

研究超声波的处理时间、温度、功率对灰毡毛忍冬(Lonicera macrathoides Hand.-Mazz.)种子萌发能力的影响,寻找其超声波处理的最佳组合,为提高灰毡毛忍冬种子的发芽势和发芽率提供理论依据。在适宜的温度、湿度和充足的氧气条件下,进行常规的种子萌发试验,统计灰毡毛种子在不同组合的超声波处理时间、温度、功率条件下的发芽势和发芽率。灰毡毛忍冬种子经适当的超声波处理,可以提高其发芽势和发芽率,正交试验发现10 min、40℃、40 W的超声波处理条件最适宜于灰毡毛忍冬种子的萌发。超声波可以打破灰毡毛忍冬种子的休眠,提高其发芽势和发芽率。     

忻城县金银花种质资源调查及绿原酸含量比较

调查了忻城县金银花种质资源情况。结果表明,忻城县共有红腺忍冬、毛花柱忍冬和细毡毛忍冬3种金银花分布。不同金银花样品的绿原酸含量和千花蕾鲜重／干重存在品种间和地区间差异,且随海拔升高而增加。毛花柱忍冬经济性状综合积分最高,其次为红腺忍冬。     

山银花繁殖技术研究进展

为充分开发和利用山银花,实现山银花规范化育苗和种植,对山银花灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬和黄褐毛忍冬四个品种的扦插繁殖、组织培养、种子繁殖等有关繁殖技术研究情况进行归纳总结,为山银花的科学育苗和改良山银花的品种研究提供参考。     

金银花的过氧化物酶和淀粉酶同工酶遗传多样性研究

[目的]探讨不同产区金银花的亲缘关系。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术,利用过氧化物(POD)同工酶和淀粉酶(AS)同工酶对10个地区11个金银花样品的遗传多样性进行分析。[结果]金银花过氧化物酶同工酶谱带形成2个电泳区域,共有3个酶位点,Rf值分别为0.324、0.671和0.863。其淀粉酶同工酶谱也形成2个电泳区域,共有4个酶位点,Rf值分别为0.125、0.306、0.67和0.792。不同产区金银花的过氧化物酶和淀粉酶具有较丰富的多态性,说明金银花不同居群在遗传本质上是有区别的。聚类分析表明10个产区的11个金银花样品可聚为3个类群。[结论]不同产区金银花的亲缘关系与其遗传本质和地理位置有关。     

忍冬属植物茎的同工酶谱分析研究

[目的]研究忍冬属植物茎的POD同工酶谱,以期为忍冬属植物亲缘关系的鉴定提供依据。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对西宁地区的4种忍冬属植物和作为外类群的1种猬实属植物的茎的POD同工酶谱进行了研究。[结果]5种植物的POD同工酶电泳共出现7条酶带,其中POD-1、POD-2为所共有的酶带,POD-6是忍冬属4种植物所共有的酶带,POD-3和POD-7为猥实所特有的酶带。因而,POD-3,6,7可作为忍冬属和猥实属植物的分类鉴定依据。聚类分析结果将所选的5个植物品种可分成大2类,即忍冬属的盘叶忍冬、红脉忍冬、金花忍冬和兰果忍冬归为1类,猥实属的猬实独自归为另1类。[结论]POD同工酶分析技术在忍冬属植物的分类鉴定中有一定的应用价值。