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目的:探讨EBV-LMP对人高分化鼻咽癌细胞株CNE1增殖能力的影响。方法:以人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒转染CNE1细胞。以载体质粒转染及CNE1细胞为对照。用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞仪测定各细胞周期和细胞PCNA的检测,观察细胞增殖能力的变化。结果:体外细胞增殖实验,A比值实验组(2.86±0.12)显 相似文献
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目的:探讨EBV-LMP对人高分化鼻咽癌细胞株CNE1增殖能力的影响。方法:以人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒转染CNE1细胞。以载体质粒转染及CNE1细胞为对照。用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞仪测定各细胞周期和细胞PCNA的检测,观察细胞增殖能力的变化。结果:体外细胞增殖实验,A比值实验组(2.86±0.12)显著高于空白组(1.62±0.05)及阴性对照组(1.38±0.03)(P<0.01);实验组细胞软琼脂克隆形成率(25.2%)显著高于空白组(11.2%)及阴性对照组(13.4%)(P<0.01);FCM法测定细胞周期,实验组S期细胞(34.9%)高于空白组(26.2%)及阴性对照组(30.8%);PCNA免疫组化染色,实验组细胞PCNA阳性率(84.6%)明显高于空白组(61.1%)及阴性对照组(67.2%)(P<0.01)。结论:EBV-LMP对CNE1细胞体外增殖能力有明显的促进作用,提示LMP在NPC细胞演进过程中可能起重要作用 相似文献
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甜瓜抗CMV转基因植株的分子生物学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究建立了转目的基因植物基因整台及表达的分子生物学鉴定系统,并用报告基因检测、SDS-PAGE、Dot-ELISA、PCR特异扩增、Western-Blot等方法,研究了用叶盘法经Ti质粒转化的甜瓜再生植株CMV-CP基因的整合与表达。结果表明:再生植株基因组中整合了CMV-CP基因,长度为1kb,并能有效表达。表达产物分子量为24Kd,确为CMV的外壳蛋白,其表达量占细胞总蛋白约5%。 相似文献
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本文通过对pE3-mMT-I-cDNA克隆质粒的分离纯化及鉴定,确定了mMT-I基因确实已整合进入PE3植物双元表达载体上。并通过三亲株杂交法将pE3-mMT-I基因转化根癌农杆菌LBA4404。原位杂交结果表明,转化后的根癌农杆菌菌株LBA4404中带有mMT-I基因。 相似文献
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根据烟草花叶病毒U1株系TMV-U1序列,人工合成引物,通过PCR扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系(TMV-B)的外壳蛋白(CP)基因和3′端非编码区.DNA全序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长459个碱基,编码151个氨基酸,3′端非编码区全长224个碱基.与TMV-U1株系相比,TMV-B仅在CP基因上有一个碱基缺失,并导致CP基因提前终止,使其编码的氨基酸少7个.将CP基因及3′端非编码区插入pGEMEX-1的T7基因10中,转入E.coli后诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带.Western免疫检测证明,该特异带与TMV抗血清呈阳性反应.将CP基因正向插入植物表达载体PBⅠ121中,置于花椰菜花叶病毒35S启动子控制之下,获得了植物表达载体pZL5 相似文献
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大麦黄矮病毒GAV株系通读蛋白基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
以大麦黄矮病毒(BYDV)GAV为模板,通过RT-PCR护增获得通读蛋白(readthrough protein RTP)基因的目的版段,将其重组到pGEM-7zf( )并转化JM109利到了含有完整RTP基因的重组子,采用又脱氧终上法进行序列分析。结果表明,RTP基因为1337nt,与文献报道的血清学较密切的BYDV MAV-PS1相比,核苷酸和氨其酸的同源性分别为87.4%和87.1%。将些RTP基因克隆到原核表达质粒pET-5a上,在大肠植菌BL21(DE3)中用IPTG旅导表达,利用 分离包含体的方法结合SDS-PAGE电泳,利到了纯化的分子是为66ku的非融合蛋白。 相似文献
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尿激酶原基因cDNA在BHK21细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
将人尿激酶原基因cDNA分别插入到真核表达载体pcDNA3的CMV启动子和pSV2neo的SV40启动子下游,构建了重组表达质粒pcDNA3-UK和pSV-2-UK分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染BHK21细胞。ELISA检测结果表明,pcDNA3-UK和pSV2-UK在哺乳动物细胞中能够表达,72h表达量分别为28.7ng/ml和13.5ng/ml。 相似文献
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将人尿激酶原(Pro-UK)基因cDNA分别插入到真核表达载体pcDNA3的CMV启动子和pSV2-neo的SV40启动子下游,构建了重组表达质粒pcDNA3-UK和pSV2-UK,分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染BHK21细胞。ELISA检测结果表明,pcDNA3-UK和pSV2-UK在哺乳动物细胞中能够表达,72h表达量分别为28.7ng/ml和13.5ng/ml。 相似文献
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马立克氏病病毒gB基因的重组痘苗质粒构建 总被引:1,自引:0,他引:1
根据马立克氏病病毒(MDV)gB基因序列设计PCR引物,以gB质粒为模板,扩增出MDVgB基因5’端到3’端388bp的DNA片段。用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶消化PCR产物,将其克隆入pBluescript质粒,构建中间质粒Ⅰ;用XbaⅠ消化gB质粒,切出MDVgB基因XbaⅠ片段,并正向克隆入中间质粒Ⅰ的XbaⅠ位点,将MDVgB基因137bp的PCR产物与其XbaⅠ片段正向连接,构建中间质粒Ⅱ用EcoRⅠ调出中间质粒Ⅱ中的MDVgB基因,正向克隆入痘苗病毒表达载体p16启动子下游,构建MDVgB基因表达质粒p16-MDVgBMDVgB基因重组痘苗表达质粒的成功构建,为下一步进行重组病毒的构建及CTL应答的深入研究奠定了基础 相似文献
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猪大肠杆菌病病原学研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
猪的大肠杆菌病主要由产肠毒大肠杆菌(ETEC)引起,包括仔猪黄痢、仔猪白痢、猪水肿病等就ETEC的毒力因子和O抗原群,猪的日龄及其肠道受体与这些疾病的关系作了比较详尽的综述并讨论了可能存在的其它猪大肠杆菌病病型 相似文献
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《Science (New York, N.Y.)》1940,92(2381):142-143
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本文采用聚集指标、聚集指标的模糊聚类分析和空间格局的回归分析等方法,对黄瓜花叶病传毒介体——瓜蚜自然种群动态进行分析,春秋两季瓜蚜种群均为聚集分布;秋季瓜蚜种群空间格局聚集性可划分为前、中、后三种类型;春季瓜蚜分为前、后两种类型。 相似文献
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观察测量屠宰肉尸452头,其中440头为有无腹股沟深淋巴结的形态学观察;10头为后躯被检淋巴结的形态学观察;2头为管道注射,观察引流区。结果:1.猪有腹股沟深淋巴结,在统计230头,460例肉尸中,有24头存在,占10.43%。腹股沟深淋巴结平均重0.88±0.38克,平均大小为2.82±0.70×1.64±0.36×0.47±0.13厘米;汇集股部内侧和下腹部的淋巴液,注入髂内侧淋巴结。2.髂内侧淋巴结平均重1.87±0.71克,平均大小为3.19±0.80×1.38±0.42×0.55±0.18厘米;输入管数为5—6条,管外径为0.09±0.04厘米,输出管数为1—3条,管外径为0.24±0.10厘米。3.髂内侧淋巴结收纳腘浅淋巴结,腹股沟浅淋巴结和髂下淋巴结引流区的淋巴液和部分盆腔内脏的淋巴液。管辖范围广,位置恒定,淋巴结较大,浅在胴体脏面,易找到,不破坏商品,不影响商品的外观,是屠宰肉尸后躯被检的主要淋巴结。 相似文献
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本文对多发风险模型的负盈余持续时间进行了计算,从数值上对古典风险模型与多发风险模型的负盈余持续时间进行了比较,进一步说明了二者的不同之处。 相似文献
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鸡腿菇菌丝体的酯酶同工酶研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选择碳源(玉米粉)、氮源(蛋白胨)、pH、温度、培养时间等培养条件,采用L27(5^5)五元二次回归正交试验.液态培养鸡腿菇菌丝体。同工酶分析结果表明,鸡腿蘑菌丝体酯酶(EST)同工酶在不同培养案件间存在差异。 相似文献
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