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相似文献
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1.
采用JQ-700型高速基因枪,以NPTⅡ基因为选择标记基因,以抗菌肽D基因为目的基因,设25mm和35mm2种火药套管,长短2种容器室,一次和两次轰击共8种处理组合,对甘蔗胚性愈伤组织进行轰击转化.结果25mm火药套管短容器室二次轰击和35mm火药套管短容器室二次轰击的2种处理组合,胚性愈伤组织经过连续3代筛选后在选择分化培养基中共长出12株转基因甘蔗白化苗  相似文献   

2.
对福农86/17、桂糖11号和粤糖57/423等3个甘蔗基因型的胚性愈伤组织进行了原生质体分离,研究了聚乙二醇(PEG)预处理对福农86/17胚性愈伤组织原生质体分离的影响.结果表明,桂糖11号的原生质体活力较高,但得率较低,福农86/17的原生质体活力和得率都较低,粤糖57/423的原生质体得率较高,但活力也较低.PEG预处理可以提高胚性愈伤组织分离的原生质体活力.一定质量浓度和一定时间的PEG预处理能够成倍地提高原生质体的得率,以质量浓度为0.50mg·L-1的PEG预处理15min,甘蔗福农86/17每克胚性愈伤组织可分离获得1×106个有活力的原生质体  相似文献   

3.
为培养适合转基因的甘蔗胚性愈伤组织,我们在不同外植体浸泡时间、不同培养基、不同培养环境以及不同的采样时间等对甘蔗愈伤组织培养的影响进行研究.结果表明,使用MS培养液浸泡外植体20 min能减轻培养过程中褐变的影响;MS+3.0 mg/L 2.4-D的培养基有利于胚性愈伤组织的诱导和增殖;在暗环境中培养有利于愈伤组织的整齐生长;在8月份的采样,培养材料褐变程度较小,胚性愈伤的诱导率及生长率均较高.在培养过程中会出现表型各异的愈伤组织,经染色后制成玻片在显微镜下观察,从细胞学角度为甘蔗转基因寻找合适的受体.结果表明,乳白色颗粒状的胚性愈伤组织,细胞排列紧密,细胞核大,分生能力强,是甘蔗转基因愈伤组织受体材料中的最佳选择.  相似文献   

4.
农杆菌介导的BT基因导入甘蔗的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以甘蔗品种台糖22的胚性愈伤组织为试材,以MS 2.4-D1.5mg/ml培养基为基本培养基,进行愈伤组织的诱导。运用真空渗入与农杆菌相结合法,通过菌株LBA4404-Q5将来源于苏云金芽孢杆菌的抗虫基因(Bt基因)转入胚性愈伤组织细胞,经过卡那霉素(Km)的2次筛选培养,获得了抗性愈伤组织及再生植株。通过特异性引物的PCR扩增检测,在1.1kb处获得阳性条带,初步表明基因整合到甘蔗染色体基因组中。  相似文献   

5.
以甘蔗幼嫩叶鞘为外植体,经多种培养基诱导出愈伤组织,选择产愈率较高的三种培养基继代,对增殖效果较好的培养基再次进行不同蔗糖浓度梯度的增愈试验。结果表明,低蔗糖浓度(1.5%)有利于愈伤组织的生长发育,组织块质量好.产愈量和产胚量高;高浓度则不利于愈伤组织增殖。  相似文献   

6.
本试验采用甘蔗愈伤组织作离体培养,在培养基中加入甘蔗黑穗病粗毒素滤液为选择压力。采用电导率、生长量、蛋白质含量作为选择抗病性突变体的一种技术方法加以研究。实验表明:粗毒素滤液具有与黑穗病孢子相同的致病性,可替代孢子用于甘蔗抗黑穗病突变体的筛选与鉴定。测定甘蔗愈伤组织受侵染后的生长量和愈伤组织的电导率,可作为选择抗病突变体鉴别方法之一。  相似文献   

7.
以生产上广泛应用的甘蔗商业品种新台糖16号的愈伤组织为受体材料,以含有GUS基因的植物表达载体pBI121为外源DNA,利用基因枪PDS 1000/He,设定不同的参数,将pBI121轰击新台糖16号愈伤组织.经GUS染色,结果发现在发射距离1/4in、可裂膜压力1100psi、轰击距离6cm时转化效率最高.  相似文献   

8.
玉米自交系Ⅱ型胚性愈伤组织诱导及遗传转化初报   总被引:18,自引:2,他引:16  
以玉米自交系340芽尖、4112未成熟幼胚为试验材料,诱导出良好的Ⅱ型胚性愈伤组织;用这2种材料的Ⅱ型胚性愈伤组织为受体,通过基因枪轰击法将Bar基因转入玉米细胞,然后用GUS基因检测。结果为阳性。  相似文献   

9.
为培养适合转基因的甘蔗胚性愈伤组织,我们在不同外植体浸泡时间、不同培养基、不同培养环境以及不同的采样时间等对甘蔗愈伤组织培养的影响进行研究。结果表明,使用MS培养液浸泡外植体20 min能减轻培养过程中褐变的影响;MS+3.0 mg/L 2.4-D的培养基有利于胚性愈伤组织的诱导和增殖;在暗环境中培养有利于愈伤组织的整齐生长;在8月份的采样,培养材料褐变程度较小,胚性愈伤的诱导率及生长率均较高。在培养过程中会出现表型各异的愈伤组织,经染色后制成玻片在显微镜下观察,从细胞学角度为甘蔗转基因寻找合适的受体。结果表明,乳白色颗粒状的胚性愈伤组织,细胞排列紧密,细胞核大,分生能力强,是甘蔗转基因愈伤组织受体材料中的最佳选择。  相似文献   

10.
影响大麦植株再生及基因枪转化因素的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
以2个澳大利亚啤酒大麦品种为供试材料,研究了基因转化和植株再生过程中Cu2+浓度、不同受体材料、高渗处理对基因转化频率的影响.结果表明,Cu2+浓度为5.0μmol·L-1时可以显著地促进胚性愈伤组织的形成及植株再生;预培养9d的幼胚愈伤组织作为受体材料其愈伤组织的抗性率明显高于剥取当天和预培养3~4d的幼胚;基因枪轰击前6h和轰击后18h,用0.5mol·L-1的甘露醇进行渗透处理,可提高愈伤组织的再生频率.  相似文献   

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