40株尖镰孢菌SRAP遗传多样性分析

[目的]明确尖镰孢菌种内遗传多样性与亲缘关系为尖镰孢菌的分类鉴定及该类病害综合防控提供理论依据。[方法]本试验利用筛选出的12对SRAP引物,对40株尖镰孢菌进行PCR扩增,用POPGENE Version 1.32软件计算遗传多样性参数,用NTSYS-pc Version 2.10s软件对供试菌株进行聚类分析与主成分分析。[结果]共扩增出125个谱带,多态性位点比例达100%,平均每对引物产生多态性条带10.4条。供试菌株的平均Nei's基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I)分别为0.1 876和0.3 139。晋中地区菌株的Nei's基因多样性指数和Shannon's指数均最大(0.172,0.2876),遗传分化水平最高,多样性最丰富。地理群体间遗传分化系数(Gst)和基因流(Nm)分别为0.3 106、1.1 098,省内3个居群间的遗传距离较其与河北居群间的遗传距离近,表明4个尖镰孢菌群体间存在一定的遗传分化,群体内遗传多样性大于群体间的多样性。地理群体间遗传距离与地理距离存在一定的相关性。聚类与主成分分析结果表明,菌株SRAP类群划分与其寄主和地理来源没有明显相关性。[结论]供试尖镰孢菌遗传分化明显,但亲缘关系相对较近。     

57株镰孢菌ISSR分子标记及其遗传多样性分析

为明确美丽组尖孢镰孢菌和李瑟组镰孢菌种间和种内的差异与亲缘关系,以采自不同寄主的57株镰孢菌(Fusarium)为研究对象,采用ISSR-PCR标记技术对其进行遗传多样性分析,结果表明:利用11条引物对供试的3种菌株进行ISSR-PCR扩增,共扩增出121条条带,其中多态性位点为117个,多态性比例为96.7%,平均每条引物产生条带为11条。说明镰孢菌基因组DNA的SSR区域具有明显的多态性,镰孢菌的遗传多样性采用ISSR技术是可行的分析。聚类分析结果表明:57个菌株间的遗传相似系数为0.568～0.992,当相似系数为0.568时,供试菌株可明显分为两大类群,第一类群IG-I为1～35,全部为美丽组尖孢镰孢菌,第二类群IG-II为36～57,全部为李瑟组镰孢菌;第二类群又可以分为两大亚类群,第一亚类为轮枝镰孢菌,第二亚类为层生镰孢菌。ISSR类群划分与镰孢菌菌种分类之间具有一定的相关性,而与其地理来源无相关性。本研究镰孢菌种间与种内均表现出明显的遗传差异。     

我国芒果主栽品种遗传多样性分析及指纹图谱构建

[目的]研究芒果主栽品种遗传多样性,构建指纹图谱,为芒果品种创新及选育提供理论依据.[方法]利用115对SSR引物对30个芒果品种进行遗传多样性分析和聚类分析,分析其亲缘关系.[结果]从115对SSR引物中筛选出64对多态性引物,扩增条带总数为343条,多态性比例为73.2％.每对引物可检测到等位位点3.9个,基因多样性为0.54,Shannon's信息指数为1.00,多样性信息平均指数为0.49,具有较高的遗传多样性.聚类分析结果表明,可将30份主栽品种分为四大类,第Ⅰ类包括14份材料;第Ⅱ类包括11份材料,主要为国外引种而获得的品种;第Ⅲ类包括4份材料,为缅三、帕拉英达、白玉和红象牙;第Ⅳ类仅有一份材料,为马切苏.选用7对SSR标记M42、M49、M54、M55、M96、M99和M103构建了30份芒果种质的数字化指纹图谱,可完全区分30份芒果主栽品种.[结论]30份芒果材料的基因组遗传较复杂,遗传信息较丰富,具有较高的遗传多样性.     

玉米顶腐镰孢菌rDNA-ITS和EF-1a基因序列及UP-PCR遗传多样性分析

对采自辽宁省部分地区的45份玉米顶腐病病株进行分离培养,共获得89株镰孢菌,采用传统形态学分类和现代分子生物学方法,共鉴定出4个种,分别为:亚粘团镰孢菌(Fusarium subglutinans)、轮枝镰孢菌(F.verticillioides)、层生镰孢菌(F.proliferatum)和尖孢镰孢菌(F.oxysporum).经EF-1a基因序列建立系统发育树,将顶腐镰孢菌分为4个组.用5条通用引物经UP-PCR扩增后,扩增出57条谱带,其中多态性条带53条,占总条带数的93.0%.遗传多样性分析表明,当相似系数0.626时,可将24个菌株划分为4个组,EF-1a基因序列与UP-PCR和ITS序列相比.更能体现镰孢菌种间和种内的亲缘关系及遗传差异性.     

甘肃省半干旱灌区苜蓿地土壤镰刀菌群落结构研究

[目的]研究甘肃省半干旱灌区苜蓿地土壤镰刀菌群落结构。[方法]将采自甘肃农业大学苜蓿试验地的土样进行分离、鉴定。[结果]共得到10个属的81株镰刀菌，分别为：茄病镰孢（F.solani）、串殊镰（F.monilifrorme）、尖孢镰孢（F.oxysporium）、燕麦镰孢（F.avernaceum）、接骨木镰（F.sambucium）、半裸镰孢（F.semitectium）、潮湿镰孢（F.udum）、三线镰孢（F.tricinctum）、雪腐镰孢（F.nivale）、木贼镰孢（F.equiseti）。[结论]为进一步开发利用镰刀菌资源提供科学依据。     

21株尖镰孢菌SSR遗传多样性分析

采用SSR分子标记技术对21株尖镰孢菌进行遗传多样性分析。结果表明,60对SSR引物中有11对引物多态性较好;11对引物共扩增出39条多态性条带,平均每对引物扩增3.6条多态性条带,多态性位点比例高达100%;各个菌株间的遗传相似系数在0.436～0.949,平均为0.662,当相似系数为0.95时,21株供试菌株全部分开。结果说明基于全基因组的尖镰孢菌SSR标记具有丰富的多态性,可用于尖镰孢菌的遗传多样性分析。     

基于环介导等温扩增技术检测黄淮地区大豆主栽品种种子携带的病原菌

[目的]通过对黄淮地区大豆种子带菌的快速检测,了解该地区大豆种子携带病原菌的情况。[方法]采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测黄淮地区29个大豆主栽品种种子上平头炭疽菌、胶孢炭疽菌、尖镰孢菌、木贼镰孢菌、层出镰孢菌、黄色镰孢菌、禾谷镰孢菌、茄腐镰孢菌、大豆拟茎点种腐病菌、立枯丝核菌、大豆炭腐病菌、冬青丽赤壳菌、大豆疫霉病菌等大豆主要病原菌的携带情况。[结果]供试的29个品种中有20个品种的种子样本检出携带上述病原菌,分别携带所检测的13种病原菌中的7种,检出率由高到低依次为平头炭疽菌、大豆拟茎点种腐病菌、木贼镰孢菌、黄色镰孢菌、尖镰孢菌、胶孢炭疽菌和层出镰孢菌,但不同大豆品种种子携带病原菌的种类及数量有较大差异,其中品种‘漯39001’检出的病原菌多达6种。[结论]本研究为大豆种子带菌检测提供了新的方法,并揭示了黄淮地区大豆种子携带病原菌的状况,在生产上有较大的应用价值。     

由镰孢菌引起的苹果心腐病病原鉴定

[目的]鉴定由镰孢菌引起的苹果心腐病病原。[方法]切开受害苹果果实,观察其受害状况;分离培养病果,并对镰孢菌进行形态学与分子生物学鉴定。[结果]受害苹果果实表面光滑,无任何症状表现,内部空腔,有大量淡粉色菌丝,被菌丝浸染过的地方呈褐色坏死。分离培养后,共得到1株镰孢菌和1株节丛孢菌。[结论]经鉴定,确定苹果心腐病的病原为茄腐镰孢菌。     

东北地区玉米穗腐镰孢菌种类鉴定及拟轮枝镰孢菌遗传多样性

为明确东北地区玉米穗腐病致病镰孢菌的种类及拟轮枝镰孢菌的多样性,于2015~2016年在东北4个省30个区县进行玉米穗腐病样品的采集,通过形态学及分子生物学方法对分离获得的镰孢菌的种类进行鉴定,并用ISSR分子标记技术对40株拟轮枝镰孢菌进行遗传多样性分析。结果表明:在获得的122株镰孢菌分离物中鉴定出包括禾谷镰孢菌、层出镰孢菌、亚粘团镰孢菌和拟轮枝镰孢菌共4个种,其分离频率分别为4.92%、7.38%、10.66%和77.05%。从区域分布来看,拟轮枝镰孢菌的分布最广,在所有采样县区均有分布。在30个县区采集的玉米穗腐病样品中,有7个县区分离到亚粘团镰孢菌,有5个县区分离到层出镰孢菌,有2个县区分离到禾谷镰孢菌,分别占采集县区样本的23.33%、16.67%和6.67%,说明拟轮枝镰孢菌是东北地区玉米穗腐病的优势致病菌。ISSR-PCR结果表明,筛选出的8条ISSR引物共扩增出45条清晰条带,其中27条为多态性条带,不同引物对供试菌株扩增的条带数不同,引物842扩增的条带最多,引物873扩增的条带最少,多态性条带的比例分别是66.7%和50%。聚类分析结果表明,供试菌株间的遗传相似系数为0.75~1.00,当遗传相似系数为0.97时,供试菌株被全部分开。拟轮枝镰孢菌ISSR类群的划分与其地理来源没有明显的相关性。     

柱花草和芒果胶孢炭疽菌的交互致病性研究

[目的]明确芒果和柱花草胶孢炭疽菌是否存在交互致病性。[方法]选用芒果和柱花草胶孢炭疽菌菌株各20株,通过人工接种方法对这些菌株在芒果和柱花草上的交互致病力进行研究。[结果]不同寄主来源的胶孢炭疽菌对不同寄主存在交互致病性,但致病力存在较大差别,对原寄主的致病性表现最强,而对原寄主以外寄主则表现出不同程度的致病力分化现象。[结论]该研究为预防芒果果园生草中交互感染提供理论依据。     

不同配方施肥对四季蜜芒反季节开花结果的综合效应

不同施肥配方对四季蜜芒反季节开花结果有重要影响,试验表明:施肥对成花率的影响与其抽梢率的高低有关;而抽梢率的高低与单位树冠体积的基枝密度有关(密度较小则抽梢率较高);0.25kg生物有机肥 0.25kg尿素的处理的树体第一次梢的抽发率为24.16%,8月份成花率达到40.2%,花序座果率为144.7%,单株果数为61个/株,综合衡量为最佳处理配方.     

芒果涂膜保鲜研究

[目的]研究芒果涂膜保鲜效果。[方法]以壳聚糖、山梨酸钾、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠为主要原料制备了4种保鲜剂，选取小台农芒果作为试验对象，研究其在常温下（温度30℃，湿度为85％～90％）对芒果的初步保鲜效果。[结果]以壳聚糖添加山梨酸钾复合而成的保鲜剂对芒果保鲜效果最佳，贮藏第8天时的失重率为14．78％，好果率为100．0％，维生素c含量为22．84mg／100g，总糖含量的最高值出现在第5天。[结论]壳聚糖与山梨酸钾对芒果保鲜效果最佳。     

芒果叶焦病病原研究(Ⅰ)

芒果叶焦病的发生主要减少了幼龄树的光合面积,严重影响幼龄芒果树的营养生长,推迟芒果的投产。叶焦病的分布情况、发病时期、发病部位、症状及病原菌检查和分离培养等一系列鉴定工作基本上否定“侵染性病害”的可能性,初步确定为生理病害。生理性病原分析结果初步认为该病与植株体内钾离子的代谢密切相关。     

不同成熟期芒果品种抗氧化酶指标的相关·通径及隶属函数分析

[目的]研究12个芒果品种的4个抗氧化酶活性,分析其相关性并做出综合评价。[方法]测定12个不同成熟期芒果品种的抗氧化酶活性,采用相关、通径及隶属函数分析方法,研究不同成熟期芒果品种抗氧化酶活性差异。[结果]超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)与果实成熟天数间存在极显著差异,CAT对果实成熟期起到直接作用,直接通径系数为0.619,而SOD、POD可能通过CAT对果实成熟期起到间接作用,间接通径系数分别为-0.599 8、-0.588 7。12个芒果品种的隶属函数评价结果为桂热芒780-17、印度芒901号、桂热芒10号、桂热芒282号、桂热芒78-1号、桂热芒264号、斯里兰卡芒811号、桂热芒30号、桂热芒10-2号、泰国芒14号、桂热芒23号、红花本地芒。[结论]该研究可为探讨酶活与果实发育的相关性奠定基础。     

硼元素对芒果花、胚发育及产量的影响

对云南栽培的“三年芒”（Ｓａｎｎｉａｎｍａｎｇ）,“马切苏”（Ｍａｃｈｅｓｏ）,３个芒果品种叶片硼含量及硼对花粉萌发,授粉受精,胚发育状况,产量的影响进行了观察研究。结果表明：１植株叶片硼含量在４ｍｇ／ｋｇ以上时产量受到严重影响;在４～１４ｍｇ／ｋｇ时各品种反应敏感程度不一,“三年芒”反应敏感。高含量植株产量显著高于低含量植株：“马切苏”、“秋芒”高含量与低含量量差异不如“三年芒”反应敏感。高含量     

芒果不同喷药期多菌灵残留量的测定

[目的]建立一种测定芒果果实中多菌灵残留量的高效液相色谱法。[方法]利用高效液相色谱法测定芒果不同喷药时间多菌灵的残留量,外标法定量。[结果]多菌灵农药残留较高,且基本上呈施药后间隔期越短,农药残留越高的趋势。采前7 d多菌灵农药残留达到1.20 mg/kg,间隔期7~30 d多菌灵残留介于0.09~1.20 mg/kg,采前35 d多菌灵残留量为未检出。多菌灵的检出限为0.02mg/kg,平均回收率在85%~105%,相对标准偏差小于4%。[结论]该方法准确、操作简便、灵敏度高,能满足农药残留分析要求。     

芒果双棘长蠹的初步研究

芒果双棘长蠹经室内饲养，在福州一年二代，以幼虫在被害干板材的坑道中越冬，３月化蛹，５月上、中旬羽化高峰期，成虫羽化飞出后，在板材附近活动１～２天后重新蛀咬进入板材为害．４月中旬开始产卵，卵期５～１０天，５月下旬到６月上旬为孵化盛期．８月上、中旬为第１代成虫羽化高峰期．第２代幼虫孵化为害一段时期后进入冬眠．受害板块平均害虫坑道穿材数高达５条／ｃｍ３，板面虫孔平均有１个／ｃｍ２，板块完全失去使用价值．采用硫酰氟３５ｇ／ｍ３、１８～２５℃熏蒸２４小时或２５ｇ／ｍ３熏蒸３６小时，害虫死亡率达１００％；在越冬代及第１代成虫羽化前，用５０％ＤＤＶＰ溶液注射蛀孔灭虫（１．５ｍｌ／孔），可取得同样效果．     

基于转录组测序芒果抗细菌性角斑病SNP/In Del分析

旨在挖掘与芒果抗细菌性角斑病紧密联系的SNP/In Del位点，以进一步揭示芒果抗细菌性角斑病的遗传多样性和分子机理。试验材料为细菌性角斑病高抗品种‘热农1号’和高感品种‘凯特’，分别对两个品种接病菌后0 d、2 d、6 d的果皮进行转录组分析，以基因组‘红象牙’作为参考，鉴定并分析芒果中SNP/In Del位点的特征。结果表明，‘凯特’和‘热农1号’分别获得32.77 Gb和36.83 Gb的数据量，每个样本过滤后的Q30均高于90%。将reads比对到芒果参考基因组上，两个品种共检测到1 213 112个SNP位点，62 888个In Del位点，主要分布在内含子区、外显子区、基因间区和基因上下游区域。SNP中转换位点和颠换位点分别为751 006个（61.91%）和462 106个（38.09%），其中转换型中A->G略多，而A->T在颠换型中占多数；In Del位点插入和缺失分别每个样本平均有18 769和25 015个。生物信息学分析表明，全部的SNP和In Del位点所在的差异基因，主要参与分子功能有代谢途径、应答刺激和生物学调控等过程。     

不同品种芒果叶中芒果苷含量的测定

[目的]建立芒果叶药材中芒果苷含量的测定方法,测定8个不同品种芒果叶中芒果苷的含量。[方法]采用RP-HPLC测定芒果叶中芒果苷含量。[结果]芒果苷标准曲线回归方程为：y=1 925 446.835x＋225 756.857（r=0.999 4）,在850～6 800μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.5%,RSD=1.42%。[结论]该方法简便、准确,可用于芒果叶药材的质量控制。     

药剂干扰对芒果炭疽病时间和空间生态位的影响

[目的]探讨药剂干扰对芒果炭疽病时间和空间生态位的影响。[方法]运用生态位的原理与方法，研究不同药剂处理对芒果炭疽病生态位的影响。[结果]对照区芒果炭疽病时间和空间生态位宽度指数分别为0．1785、0．9656；常规区芒果炭疽病的时间和空间生态位宽度指数为0．1754和0．7966；预测区芒果炭疽痛的时间和空间生态位宽度指数为0．1762和0．8267。药剂干扰压缩了芒果炭疽病的时间和空间生态位宽度，对空间生态位宽度的影响更为显著。常规喷药和预测预报喷药对芒果炭疽病生态位的影响差别不大，预测预报喷药在试验期减少了2次喷药次数，可节约成本，减少对环境的污染。[结论]该研究为制定抗药性治理策略提供了理论指导。