不同药剂及其混配剂对油菜菌核病菌的毒力

采用菌丝生长速率法测定了8种药剂及其混配剂对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)的室内毒力,旨在筛选有效防治核盘菌的药剂及其混配剂,为油菜菌核病的防治提供重要参考。结果表明,咪鲜胺锰盐对核盘菌的毒力最高,其EC50值为0.067 6μg/m L;丙环唑次之,EC50值为0.098 9μg/m L;菌核净、腐霉利、甲基硫菌灵、多菌灵、异菌脲EC50值在0.1~0.5μg/m L之间;百菌清的EC50值为0.706 1μg/m L。咪鲜胺锰盐和百菌清以配比2∶1时增效系数为2.179 5,咪鲜胺锰盐与甲基硫菌灵以配比1∶3时增效系数为2.952 7,咪鲜胺锰盐与菌核净以配比1∶1时增效系数为1.537 2。在防治油菜菌核病时,建议轮换使用咪鲜胺锰盐、丙环唑单剂及上述筛选出的混配剂。     

啶酰菌胺对向日葵核盘菌生物活性的影响

旨在明确新型杀菌剂啶酰菌胺对向日葵核盘菌生物活性的影响,为其推广应用提供科学依据。以向日葵核盘菌菌丝、孢子和菌核为试材,采用生物测定方法测定啶酰菌胺对向日葵核盘菌菌丝生长、孢子萌发及菌核形成的影响。研究结果表明,啶酰菌胺处理后的核盘菌菌丝生长速率受到抑制,其抑制菌丝生长的EC₅₀为0.2152 μg/mL。随杀菌剂浓度的升高,核盘菌菌丝生长量明显下降,浓度为16.667 μg/mL时,对核盘菌形成菌核数量的抑制率达到84.62%,对核盘菌形成菌核总干重的抑制率达到61.07%。孢子萌发试验结果表明,啶酰菌胺处理后子囊孢子萌发受到抑制,其抑制子囊孢子萌发的EC₅₀为0.056 μg/mL。在浓度为0.267 μg/mL时,孢子芽管伸长抑制率达到78.15%。啶酰菌胺不仅对核盘菌菌丝生长有抑制作用,还可以降低子囊孢子的侵入、阻止子囊孢子萌发形成的芽管在植物组织的继续侵染,有效降低田间土壤中菌核残留量。对向日葵菌核病的防治前景十分广阔,可以作为田间防治向日葵菌核病的轮换药剂。     

防治柑橘黑点病药剂的离体和田间筛选

为探明防治柑橘黑点病(Diaporthe citri,无性态为Phomopsis citri)的最佳药剂,在实验室条件下比较了戊唑醇、苯醚甲环唑、咪鲜胺锰盐3种麦角甾醇合成抑制剂类杀菌剂和代森锰锌对黑点病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制效果.结果表明:4种药剂抑制黑点病菌菌丝生长的有效中浓度(EC50)依次为0.250,0.497,0.113和1.800μg?mL-1;抑制该病原菌孢子萌发的EC50依次为72.893,42.746,20.701和0.970μg?mL-1.药剂田间防效试验表明:代森锰锌可湿性粉剂600倍稀释液使用5次和3次对黑点病的防治效果分别达79.1%和63.6%,明显优于同样次数和推荐剂量的杀菌剂戊唑醇、苯醚甲环唑和咪鲜胺锰盐.因此,可以认为在这4种药剂中代森锰锌是防治柑橘黑点病的最佳药剂.     

蔬菜菌核病菌对氟吡菌酰胺的敏感性及防病应用潜力评估

【目的】评价蔬菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）对新型琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂氟吡菌酰胺的敏感性,明确药剂对不同发育阶段菌核病菌的毒力效应以及氟吡菌酰胺防治蔬菜菌核病的作用方式和田间应用效果,以指导氟吡菌酰胺的科学使用。【方法】从山东省昌乐、寿光、青州、临朐和泰安等地的蔬菜产区采集173株来自黄瓜、番茄、茄子、西葫芦、芸豆、辣椒等6种作物上的田间菌核病发病组织,室内分离纯化后采用菌丝生长速率法测定其对氟吡菌酰胺的敏感性;测定氟吡菌酰胺对病菌菌核产量、菌核形态和菌核菌丝型萌发的影响;采用离体茄子叶片接种试验确定氟吡菌酰胺防治菌核病的作用方式;最后通过两年田间药效试验进一步验证其实际应用效果。【结果】氟吡菌酰胺对菌核病菌的菌丝生长具有较强的抑制活性,且对来自不同作物的173株菌核病菌的抑制中浓度（EC₅₀）差异不大,分布在0.02-0.30 μg·mL^-1,表明这些菌株可被用来分析蔬菜菌核病菌对氟吡菌酰胺的敏感性水平。EC₅₀频率分布图呈单峰偏正态曲线分布,变异系数较小,表明该地区的蔬菜菌核病菌对氟吡菌酰胺均表现敏感。氟吡菌酰胺对菌核病菌的菌核产量、菌核形态以及菌核菌丝型萌发具有较高的抑制活性。在氟吡菌酰胺1.6 μg·mL^-1处理浓度下,该药剂对3株来自不同作物的菌核病菌表现出相同的抑制趋势,其菌核的数量和干重均明显降低,形态明显变小,表明该药剂能够有效地减少菌核病菌的初侵染源数量,并降低其侵染活性;而经过连续3 d的观察,5 μg·mL^-1氟吡菌酰胺对3株病菌的菌核菌丝型萌发的抑制率均在95%以上,表明该药剂有能力抑制菌核病菌的这一侵染方式,从而保护作物茎基部免受菌丝侵染。离体叶片接种防治试验表明,氟吡菌酰胺具有保护作用与治疗作用,40 μg·mL^-1的保护效果为100.00%,治疗效果为88.81%,显著高于对照药剂多菌灵和菌核净的防治效果,但该药剂对菌核病的保护作用明显优于治疗作用,表明该药剂在田间使用时应在病害发病前或发病初期使用,从而获得较好的防治效果。2016和2017两年的田间药效试验中,氟吡菌酰胺200 g a.i./hm²处理对茄子菌核病的防治效果分别为90.30%和87.60%,显著高于氟吡菌酰胺其他施用剂量以及对照药剂菌核净600 g a.i./hm²、多菌灵1 150 g a.i./hm²的防治效果。【结论】新型琥珀酸脱氢酶抑制剂氟吡菌酰胺对菌核病菌的菌丝生长、菌核形成及萌发均具有较高的抑制活性,且在田间能够有效地控制菌核病发生,因此该药剂是防治菌核病的高效药剂,可作为现有防治药剂的补充。     

有机硅助剂对咪鲜胺防治油菜菌核病的增效作用

采用喷壶对田间油菜进行模拟降雨,测定咪鲜胺的耐雨水冲刷力及有机硅助剂对咪鲜胺防治油菜菌核病的影响。结果表明,模拟降雨(喷水)显著降低咪鲜胺对核盘菌的抑制作用,但添加有机硅可有效防止喷水处理对咪鲜胺防效的降低作用,提高咪鲜胺的耐水冲刷力,同时还将咪鲜胺防治核盘菌的持效期从12 d延长到14 d。在田间条件下,以中双9号和中双10号为材料,咪鲜胺和含有机硅的咪鲜胺对油菜菌核病的平均病情指数防效分别为74.0%和80.0%,在2个油菜品种上有机硅对咪鲜胺防治油菜菌核病均有一定的增效作用。油菜喷施咪鲜胺、有机硅和含有机硅的咪鲜胺后,株高、单株有效角果数、每角粒数和千粒重等产量因子与清水喷雾过的油菜之间没有显著差异,表明咪鲜胺和有机硅对油菜生长发育没有抑制作用。     

防治肿节风黑线炭疽病菌的药剂筛选

采用菌丝生长速率测定法测定14种杀菌剂的抑制活性,对抑制率达90%以上的杀菌剂进行毒力测定,根据室内测试结果将抑制效果较好的杀菌剂进行田间防治试验。结果表明:戊唑醇、苯醚·咪鲜胺、咪鲜胺、苯醚甲环唑4种药剂对黑线炭疽病菌具有较好抑菌活性,抑制率90%,EC50分别为0.079 9,3.567,55.470,370.340 mg·L-1;戊唑醇稀释3 000~4 000倍,苯醚·咪鲜胺稀释1 000~2 000倍,田间防效均达70%以上。这表明戊唑醇、苯醚·咪鲜胺对肿节风炭疽病有较好的防治作用,可以在生产上推广应用。     

50％咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜菌核病试验

菌核病是目前油菜上最重要的病害,50％咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜茵核病试验示范结果表明：该药剂防病效果好。病株、病指防效均在80％以上,可增产油菜籽591．7kg／hm2,且对油菜安全,无任何不良影响。     

油菜菌核病菌对啶酰菌胺的敏感性及对不同杀菌剂敏感性的相关分析

为了明确油菜菌核病菌对新型杀菌剂啶酰菌胺的敏感性和该药剂与其它杀菌剂的交互抗性,采用菌丝生长速率法测定江苏省不同地区的110个油菜菌核病菌菌株对啶酰菌胺的敏感性,并测定对啶酰菌胺不同敏感性的10个菌株对菌核净、异菌脲、腐霉利、多菌灵、咪鲜胺和戊唑醇等不同杀菌剂的敏感性。结果表明,油菜菌核病菌菌株间对啶酰菌胺的敏感性差异显著,EC50值在0.0021～0.2113μg·mL-1之间,平均为0.0882±0.0548μg·mL-1;根据EC50值相关性分析,油菜菌核病菌对啶酰菌胺与上述杀菌剂之间不存在交互抗性。     

50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜菌核病试验示范

菌核病是目前油菜上最重要的病害.50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜菌核病试验示范结果表明:该药剂防病效果好,病株、病指防效均在90%以上,可增产油菜籽928.5kg/hm2,且对油菜安全,无任何不良影响.     

50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜菌核病试验示范

菌核病是目前油菜上最重要的病害。50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂防治油菜菌核病试验示范结果表明:该药剂防病效果好,病株、病指防效均在90%以上,可增产油菜籽928.5kg/hm2,且对油菜安全,无任何不良影响。     

黑龙江省向日葵菌核病菌生物学特性及抗药性初步测定

选择了5株具有代表性的向日葵菌核病菌,初步测定了其生物学特性及其抗药性。结果表明,向日葵菌核病菌菌丝生长的最适温度在15～20℃之间;菌丝生长最适环境为中性和偏酸性;越冬条件下不同菌核及病残体埋入土壤中,病残体上菌丝不能越冬,而菌核能够越冬,且埋入土层越深菌丝生长速度越慢,产生菌核的重量也降低;向日葵菌核病菌对茄子、向日葵、油菜、向日葵的致病力存在差异;多菌灵对不同地理区域菌株的EC50为0.4977～0.2456μg.mL-1,其中最不敏感菌株与最敏感菌株EC50的比值为2.03,都为敏感菌株;腐霉利对不同地理区域菌株的EC50为1.2715～0.3333μg.mL-1,其中最不敏感菌株与最敏感菌株EC50的比值为3.81,都为敏感菌株,目前所采集的地点尚未出现抗药性菌株。研究为深入研究黑龙江省寒地向日葵菌核病菌的生物学特性及科学防控奠定了良好的基础。     

甘蓝型油菜BnEIN3基因克隆及菌核病诱导表达

[目的]探讨甘蓝型油菜EIN3（BnEIN3）基因与菌核病抗性的关系。[方法]根据GenBank中已公布的拟南芥EIN-3基因的保守区及甘蓝型油菜EST序列,设计特异性引物,分别进行基因组PCR和RT-PCR扩增,克隆BnEIN3基因。对菌核病不同抗性的3个油菜品种中BnEIN3的表达进行荧光定量PCR检测分析。[结果]克隆得到1947bp的基因片段,与拟南芥EIN3一致性高达82%,有完整的开放阅码框,编码614个氨基酸,其中包含1个EIN3结构域,初步认定该片段为油菜BnEIN3基因。在高抗品种（D083）中,菌核病在侵染后期快速诱导BnEIN3上调表达,且显著高于中抗（中双9号）及高感品种（84039）中该基因的表达水平。在中抗及高感品种中,菌核病均抑制BnEIN3的表达,且中抗品种BnEIN3表达量一直大于高感品种。[结论]BnEIN3可能与油菜对菌核病抗性相关。     

甘蓝型油菜BnEIN3基因的克隆及菌核病诱导表达研究

乙烯不敏感转录调节基因（EIN3）是定位于细胞核上的乙烯信号转导下游元件,其作为转录因子启动一系列转录级联反应,从而激活乙烯诱导的防御相关基因的表达。拟南芥EIN3功能缺失突变体表现出对死体营养型病原菌高度敏感,表明该基因在抗死体营养型病原菌中发挥一定作用。为克隆甘蓝型油菜EIN3（BnEIN3）基因,该研究采用荧光定量PCR研究菌核病不同抗性的油菜品种接种核盘菌后,BnEIN3的表达变化及差异,初步探讨了BnEIN3在油菜菌核病防卫反应中的作用。     

油菜蕾薹期和花期菌核病接种方法比较

核盘菌引起的菌核病是油菜重要病害。为建立快速有效的油菜菌核病抗性鉴定方法,在油菜花期采用4种人工接种方法测定了5种油菜资源对菌核病的抗病性,并分析采用不用接种方法测定的病斑大小之间的相关性。这4种方法分别为:离体叶片接种、离体茎段接种(牙签法)、活体茎秆接种(牙签法)、活体叶柄接种(吸头法)。这4种接种方法中,离体叶片接种法与其余3种方法的鉴定结果均没有显著相关性;采用叶柄接种法,接种后11 d和19 d的病斑长度与离体茎段接种3 d和7 d的病斑长度之间的相关性显著(P0.05),相关系数分别为0.866和0.821,与活体茎秆接种7 d和15 d的病斑长度极显著相关(P0.01),相关系数分别为0.952和0.987。结果表明移液管介导的叶柄接种是一种便捷、可靠的油菜菌核病抗性鉴定方法。     

甘蓝型油菜MAPK1在损伤和病原菌胁迫下的表达模式分析

【目的】分析BnMAPK1组织特异性表达特征,探究其在损伤和病原菌胁迫下的特征及参加的信号途径。【方法】在电子克隆的基础上,克隆BnMAPK1的启动子序列。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测BnMAPK1的诱导表达特征。【结果】从甘蓝型油菜中克隆了MAPK1的启动子序列,发现它含有多个激素响应元件和逆境胁迫响应元件。还发现植物激素茉莉酸甲酯（MeJA）、水杨酸（SA）、脱落酸（ABA）和过氧化氢（H2O2）,及损伤（wound）和核盘菌（sclerotinia sclerotiorum）均能在转录水平上激活BnMAPK1。甘蓝型油菜在损伤和接种核菌盘后,JA信号途径标志基因PDF1.2的表达量被诱导上升,而SA信号途径标志基因PR-1被抑制,推测甘蓝型油菜可能是通过茉莉酸（jasmonic acid,JA）信号途径响应损伤和病原菌入侵。【结论】甘蓝型油菜MAPK1受多种植物激素和胁迫的诱导,并且其启动子中含有多个激素响应元件和逆境胁迫响应元件,可能MAPK1在植物体抵抗外界多种胁迫中起重要作用,并且甘蓝型油菜可能是通过JA信号途径对损伤和病原菌入侵做出响应。     

油菜开花进程与菌核病防治适期的关系

４月上、中旬油菜开花率达１０％～３０％，即一次分枝开花株率５０％～１００％时，花瓣保湿培养带菌率最高，是菌核病病菌侵染花瓣的主要时期，也是药剂防治的关键时期。试验表明：油菜菌核病防治最佳适期为主茎开花株率８０％～１００％至一次分枝开花株率９５％～１００％，用克菌灵２２５０ｇ／ｈｍ２防治一次，防病效果达７０％以上，保产效果达５０％左右，第一次适期用药后，隔５～７ｄ再用药一次，能将菌核病的危害损失控制在最低限度。     

利用油菜花瓣实验检测油菜菌核病

摘要：油菜菌核病是由Sclerotinia sclerotiorum (Lib) de Bary引起的,是世界范围内造成损失最严重的病害之一。该病害主要通过感染了核盘菌子囊孢子的花瓣落在植株茎、叶上来侵染植株。本实验采用添加了两种不同PH指示剂的改良型Steadman’s培养基检测被子囊孢子感染的花瓣,样品采自合肥的两块不同试验田,在油菜花期（3月下旬～4月中旬）每天采摘新鲜花瓣在室温下培养,结果表明整个花期,除1块田1天没有检测出外,其余每天都有被子囊孢子感染的花瓣出现（感染子囊孢子的花瓣接种后培养基变色）。油菜初花期被子囊孢子感染的花瓣较少,而盛花期和终花期被感染的花瓣较多,第一块田被感染的花瓣数在两种培养基上出现的百分率分别为32.0％和40.2％,第二块田分别为27.3％和35.7％。第一块田油菜菌核病的发病率和病指分别为2.7％和1.8,第二块田分别为1.5％和0.4。子囊孢子感染的花瓣数与后期油菜菌核病的发病率呈显著正相关（r=0.829,r0.05=0.811）。研究被感染的花瓣数可以帮助决定最适宜的病害防治时期。     

不同杀菌剂对油菜菌核病菌的室内毒力测定

[目的]为防治油菜菌核病的有效药剂及复配剂的筛选、研发和应用提供试验依据。[方法]采用菌丝生长速率法,测定了速克灵、百菌清、世高、施灰乐、多菌灵和安泰森6种杀菌剂对油菜菌核病菌的室内毒力和EC50值。[结果]结果表明,速克灵、百菌清、世高、施灰乐、多菌灵和安泰森6种药剂的EC50值分别为0.472 6、1.799 4、1.867 4、6.935 3、88.191 8和119.579 9 mg/L。[结论]速克灵、百菌清、世高和施灰乐4种药剂对油菜菌核病菌均有显著的抑制作用,多菌灵和安泰森毒力的抑菌效果不佳,速克灵的室内毒力最强,可在生产中试验应用。