细菌菌落计数培养基TTC浓度的筛选研究

以细菌菌落计数方法,研究大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌在不同2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度的平板计数琼脂上菌落形态和数量的变化情况。结果表明,3种菌在TTC终浓度≥0.0008%时,菌落颜色比较明显,逐渐加深;大肠埃希菌在TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,TTC终浓度≥0.02%菌落数量明显减少;金黄色葡萄球菌在TTC终浓度≤0.004%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在0.04%TTC平板计数琼脂上不能生长;鼠伤寒沙门氏菌TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在TTC终浓度≥0.02%的平板计数琼脂上菌落数量减少。不同浓度的TTC对鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌的生长影响较小,对金黄色葡萄球菌影响较大,故在食品(或饲料)细菌总数检测中,TTC的终浓度应选在0.0008%~0.004%之间。     

转VEGF和转Tβ4基因陕北白绒山羊粪便中菌群分析

以转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊为研究对象,采集其新鲜粪便样品,用灭菌生理盐水进行梯度稀释后,分别接种LB固体培养基、TPY琼脂、胆硫乳琼脂、肠球菌琼脂、伊红美蓝琼脂和甘露醇盐琼脂培养基,37℃恒温过夜培养,再分别对平板上生长的所有需氧菌、双歧杆菌、沙门氏菌、肠球菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌进行菌落计数,并做显著性检验分析。结果表明,转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊粪便中的需氧菌菌群结构之间不存在显著性差异。研究结果为转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊安全性评价研究提供了试验数据和研究基础。     

养殖场（户）天地：春季如何让鸡多产

春季是蛋鸡的产蛋旺季，当产蛋率达80％以上时即进入了产蛋高峰期．最高峰时可达到90％以上。通常春季蛋鸡产蛋高峰期只有3个月左右，若采取措施则可使产蛋高峰期延长到4-5个月。延长春季产蛋高峰期的时间，可直接提高蛋鸡全年的总产蛋水平，使蛋鸡的饲养效益得到有效提高。这里特介绍几种延长蛋鸡春季产蛋高峰期的特效方法：     

如何提高春季产蛋高峰期

春季是蛋鸡的产蛋旺季,当产蛋率达80％以上时即进入了产蛋高峰期,最高峰时可达到90％以上。通常春季蛋鸡产蛋高峰期只有3个月左右,若采取措施则可使产蛋高峰期延长到4—5个月。延长春季产蛋高峰期的时间,可直接提高蛋鸡全年的总产蛋水平,使蛋鸡的饲养效益得到有效提高。     

大豆糖蜜中高产乙醇菌株的筛选及其生长特性研究

采用TTC平板法、乙醇耐性测定以及产乙醇性能三级筛选等方法,从大豆糖蜜中分离的1380株野生菌中,筛选到一株可耐受20％（v/v）乙醇、初始发酵乙醇浓度达9．07％的菌株P14。研究了该菌在大豆糖蜜中的生长特性,确定了其最适生长条件为：在转速140r。min^-1下培养,其中糖浓度12％,接种量4％,生长温度26℃,pH6．0。在此条件下,摇瓶培养16h获得最佳的发酵种子培养液。     

科玛嘉弧菌显色培养基对创伤弧菌检测效果的研究

[目的]探讨科玛嘉弧菌显色培养基(CHROMagarTMVibrio)对创伤弧菌的检测效果。[方法]通过CHROMagarTMVibrio、梅里埃弧菌显色培养基(ChromID Vibro)与硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂培养基之间进行比对,采用阳性菌株直接平板计数和人工污染样品的方法,对CHROMagarTMVibrio的灵敏度、特异性和检测效果进行评价。[结果]CHROMagarTMVibrio平板上创伤弧菌为绿色圆形直径约2～3 mm的光滑菌落(培养24 h后)。CHROMagarTMVibrio平板在特异性上优于另2种平板,在灵敏度上跟ChromIDVibro相近,但大大优于TCBS平板。当样品中大约有3.0 cfu/ml浓度的目标菌时,经过选择性增菌培养,3种平板均可以检出。[结论]CHROMagarTMVibrio具有良好的灵敏度、特异性,能提高创伤弧菌的检出率。     

不同增氧方式对草鱼精养塘异养菌数量及区系组成的影响

在不同增氧方式下,草鱼(Ctenopharyn odonidellus)精养塘内水体和底泥中异养菌总活菌数的变化,及异养菌的区系组成进行了调查。试验分为4组,其中组1为表层连续增氧,组2为底层连续增氧,组3为表层间歇增氧,组4为底层间歇增氧,试验时间为30 d,每10 d采样1次。结果表明,试验塘水体中总活菌数呈现组1和组2较高,组1和组3较低的规律。水中气单胞菌数量与水体中总活菌数变化呈现出类似的趋势,底泥中活菌的数量随增氧方式不同有显著差异。随试验进行过程,组2和组4的底泥总活菌数呈现显著上升的趋势;组1和组3的各采样时间点底泥中总活菌数几乎没有变化。底泥中的气单胞菌数量变化趋势与总活菌数的变动趋势类似。从水体中分离出8个属,其中优势菌是假单胞菌(Pseudomonas)和气单胞菌(Aermonas);从底泥中分离出10个属,其中优势菌是芽孢杆菌(Bacillus),其次是肠杆菌(Enterobacter),其他的种类出现较少。组2水体中异养菌的多样性指数显著高于其它组,组3和组4显著低于其它组(P0.05),两者之间无显著差异(P0.05)。组3底泥中异养菌的多样性指数显著低于其它组(P0.05),组2的多样性指数显著高于其它组(P0.05),组1和组4的多样性指数无显著差异(P0.05)。     

基于大豆膳食纤维的高黏度样品细菌总数检测方法研究

[目的]研究基于大豆膳食纤维的高黏度样品的细菌总数检测方法。[方法]对大豆膳食纤维样品的前处理过程和培养基选择进行了研究。[结果]在大豆膳食纤维样品的前处理过程中,与普通方法相比,采用称重法和RAININ Pos-D外置活塞式微量移液器量取稀释液所测得的细菌总数较高。3种计数培养基中,采用3M PetriflimTM菌落总数测试片的菌落总数测定结果最好,其次是采用平板计数琼脂,最差是采用TTC营养琼脂;3M测试片和TTC营养琼脂的测定结果的精密度较好、人员计数偏差较小,而平板计数琼脂相对较差。[结论]为检测具有颗粒、高吸水性及高黏度等性质的样品提供了参考。     

天气渐凉如何养好蛋鸡

<正>淘汰老弱母鸡蛋鸡饲养1~2年为好,超过2年应淘汰。对体质差的、产蛋少的应及时挑出分圈饲养。淘汰出的蛋鸡应多喂高热量饲料,如玉米、糠麸等,促使母鸡增膘,养肥后及时上市。另外,新老蛋鸡应分开饲养,使新蛋鸡逐渐由产前饲养过渡到产蛋饲养。人工控制换羽实行人工控制饲养条件,促使蛋鸡同步换羽。为使蛋鸡同步换羽,可将光照时间由原来的16小时减为8     

空肠弯曲菌毒力特征及其畜禽腹泻致病机制的研究

<正>由动物医学院吴润教授主持完成的国家自然基金项目“肠弯曲菌毒力特征及其畜禽腹泻致病机制的研究”,该研究发现了空肠弯曲菌在生物学特性上的一些歧异,尤其是一些菌株对萘啶酮酸和噻孢霉素的抗性差异,在国内首次确定了空肠弯曲菌可引起畜禽腹泻和死亡,其产肠毒素性和粘附性与畜禽腹泻发生和该菌毒力相关,肠毒素主要为68 kD的蛋白质,不耐热,pH依赖和对胰酶有抗性,抗LT血清能完全抑制其活性．粘附菌能侵入到Hela细胞内,引起细胞病变,对细胞的粘附性可经加热而破坏,为抗血清所抑制．有些侵袭性细菌还具有血凝性．该菌的质粒检出率为10．96％,大小为1．9～108 Kb的8种CCC型质粒,构成7种质粒谱型,质粒种类及其酶谱与菌株来源、生物型、致病性、产肠毒素性和耐药性有关．该研究建立了菌肠毒素检测法、10％CO2微需氧培养法和分离菌株的保存法．     

大肠菌群快速检测纸片配方与工艺研究

将大肠菌液制成已知准确浓度的模拟菌液作为试验样品,通过对影响自制大肠菌群快速纸片效果的配方和工艺参数进行研究。筛选出纸片配方为：乳糖2.5g、蛋白胨1.5g、胆盐0.15g、TTC（4%）2mL、琼脂0.1g、NaCl0.3g、K2HPO34g、溴甲酚紫2mg、乳化剂S（1%）2mL、pH6.8～7.0;筛选出工艺参数为：灭菌温度110℃、灭菌时间15min、浸液时间1min、浸液温度60℃、烘干温度55℃。通过重复性和准确性试验,证明自制纸片和发酵法检测的结果总符合率为94%,经统计学处理P〉0.05,说明两法的检测结果无显著区别。     

金银花花粉生活力测定及贮藏研究

[目的]对不同贮藏条件下金银花花粉生活力进行测定,以期为金银花生产、科研提供参考。[方法]以金银花新鲜花粉为试材,通过I-KI染色法、TTC（氯化三苯基四氮唑）染色法、培养基萌发试验法对花粉生活力进行测定,并研究了不同贮藏条件对花粉萌发的影响。[结果]培养基中添加不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,其浓度分别为150、30mg/L时花粉的萌发率最大值为75.23%和52.78%;I-KI染色法不宜用于金银花花粉生活力测定;采用TTC染色法测定金银花花粉生活力达80.46%。[结论]TTC染色法测定金银花花粉生活力相对准确且简便易行。在金银花花粉贮藏过程中低温贮藏（-80℃）好于冷藏（4℃、-23℃）,不宜常温贮藏。     

南瓜疫病菌(Phytophthora capsici)的生物学特性初探

以南瓜疫病菌株ＰＣ－１为研究对象，分析其生物学特性。结果表明，不同培养基对菌丝生长影响不同，菌丝在葫萝卜琼脂（ＣＡ）培养基上生长要好于燕麦片琼脂（ＯＭＡ）培养基。孢子囊的产生需要有水分，同时也受温度、光照、培养基及菌龄的影响。在一定温度范围内，温度升高，孢子囊产生的速度加快且数量多，光照有利于孢子囊的产生，１０℃以下无论有无光照均不产生孢子囊。     

栀子种子生活力测定及其与发芽率的相关性研究

[目的]探讨四唑（TTC）染色法测定栀子种子生活力的最佳条件以及生活力与发芽率的相关性。[方法]以10个栀子品种为试验材料,采用正交试验方法研究了染色温度、染色时间和TTC浓度对栀子种子胚染色效果的影响,用种子发芽试验测定发芽率。[结果]染色温度、染色时间、TTC浓度对栀子种子生活力测定结果均有一定影响,三者之间关系密切,在适宜的TTC浓度范围内,染色温度和染色时间对测定结果表现出显著影响。四唑染色法测定的栀子种子生活力（X）与发芽率（Y）的回归方程为Y=-13.154＋1.077X。[结论]染色温度为35℃,TTC浓度为1.0%,染色时间为2.5h是测定栀子种子生活力的最佳条件,其测得的生活力与发芽率呈显著的正相关。     

猪胃肠道兼性厌氧菌种类与数量分布的调查

为调查育肥猪胃肠道中代表性兼性厌氧菌的种类与数量分布,采用3种培养基,用烛缸厌氧培养法,对6头猪胃肠道菌群中代表性兼性厌氧菌进行调查。结果显示:乳杆菌数量为4.6×103~3.5×106cfu/g,埃希菌数量为4.3×102~10.9×105cfu/g;在显色培养基中检出的埃希菌数量为7.7×104~3.9×107cfu/g,链球菌的数量为1.7×104~2.3×107cfu/g。在显色培养基中克雷伯菌检出量较少与CMAM上检出乳杆菌的数量相近。3种培养基检出菌数量在后肠段显著高于胃和小肠(P<0.01)。     

贵阳市市售鸡肉中五种食源性致病菌污染状况调查研究

对贵阳市市售鸡肉中5种食源性致病菌的污染情况进行调查,结果表明:50份样品中食源性致病菌总检出率为48%,其中空肠弯曲菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌和单核细胞增生李斯特菌的检出率分别为24.0%、22.0%、6.0%、2.0%、0,40份冻鸡肉样品的检出率为55%,10份鲜鸡肉样品的检出率为20%。对农贸市场市售冻鸡肉样品进行抽查,34份样品中5种致病菌的检出率为58.8%,其中空肠弯曲菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌和单核细胞增生李斯特菌的检出率分别为32.3%、17.6%、5.9%、2.9%、0;对6份超市冻鸡肉样品进行检测,食源性致病菌的检出率为33.3%,其中空肠弯曲菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌和单核细胞增生李斯特菌的检出率分别为0、16.7%、16.7%、0、0。     

不同虫生曲霉原生质体融合选育松墨天牛高毒力菌株

采用紫外或加热方法分别对虫生曲霉天牛生葡萄曲霉（Aspergillus vitis）和叶甲生烟曲霉（Aspergillus fumigatus var fumigatus）的原生质体分别进行灭活,然后对灭活双亲用PEG6000作融合剂进行原生质体融合。将融合子第2、第4、第6和第8代的菌落和分生孢子梗特征进行比较后,选出5株生长速度快、生产孢子多的融合株进行胞外蛋白酶的检测和松墨天牛幼虫毒力测试。结果发现,融合株U4-2对松墨天牛幼虫的死亡百分率为73.3%,和2个亲本相比较显著增强了毒力。     

土壤中棉秆纤维素降解菌的筛选

本研究应用纤维素刚果红培养基从棉田土壤中筛选纤维素降解菌株,通过CMC酶活、FPA和实际降解效率的测定,筛选出5株能分解纤维素的菌株,分别编号为T4、T3、T2、M4、M3。结果表明,通过对培养和培养温度的优化,发现在培养时间为72 h、培养温度为30℃时纤维素分解酶的活性最佳。在第5 d、10 d、15 d、20 d测定菌株对棉花秸秆中纤维素和木质素均有一定的降解能力,在培养20 d时,对纤维素和木质素的降解速率分别为T4 18.62%、14.2%;T3 18.27%、12.97%;T2 17.53%、13.54%;M4 19.69%、13.56%;M3 19.21%、14.25%。     

半开放卷帘式鸭舍冬季保温性及其对产蛋的影响研究

[目的]为科学养鸭、提高鸭群产蛋性能提供试验依据。[方法]以樱桃谷种鸭为试验鸭,通过在饲养试验中测定鸭舍温度和计算产蛋率评价鸭舍的保温性及其对鸭产蛋性能的影响。[结果]舍外温度降至-9℃时,舍内温度仍然在1℃以上。鸭舍内外同一时间点的温度呈高度正相关,除12：00外,其他时间点的鸭舍内外温度均有极显著差异。1栋与7栋鸭舍21：00的舍外温度有显著差异。1栋和7栋鸭舍种母鸭在1月20日～2月20日间的产蛋率分别为71．88％～87．25％和70．21％～88．63％,平均产蛋率分别为80．51％和80．10％。日平均气温及21：00的气温与产蛋率呈极显著正相关。21：00时的舍温越高,鸭产蛋率越高。[结论]半开放卷帘式鸭舍有一定的保温性,21：00时的舍内温度和日平均舍内温度与产蛋率呈显著正相关。