锥栗叶样保存时间对DNA提取质量的影响

以野生锥栗幼叶为对照,采用硅胶干燥法,设置不同保存时间（10 d,2、4、6、8、10、11、12、13、14、15、16、17、18个月）,对保存不同时间的锥栗叶样抽提基因组总DNA,利用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检测提取DNA的浓度、纯度、得率及质量等指标,评价不同保存时间对基因组DNA的影响。结果表明：随着保存时间的延长,基因组DNA的浓度呈逐渐降低趋势,12个月后,降解加剧,纯度很低。叶样硅胶保存时间在10 d至10个月之间为最佳DNA抽提时间,所得DNA浓度、得率高,纯度较好,电泳谱带清晰。     

适于AFLP分析用的桃韧皮部DNA提取方法

[目的]研究适于AFLP分析用的桃韧皮部DNA提取方法,为冬季无法获得幼叶和其他幼嫩材料时从事桃基因组研究打下了基础。[方法]以8种野生桃冬季1年生休眠枝的韧皮部为试验材料,采用改进的CTAB法提取基因组总DNA,与其相应幼叶DNA的提取效果进行了比较分析,并进行了AFLP验证分析。[结果]从野生桃韧皮部提取的DNA除产量低于幼叶外,DNA纯度和完整性都较好,OD260/OD280均为1.8~2.0,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化,其AFLP分析条带清晰,多态性好。[结论]该法提取的野生桃韧皮部基因组总DNA完全适于AFLP分析。     

正交试验法优化芍药基因组DNA CTAB法提取工艺

[目的]为芍药的杂交育种提供试验依据。[方法]通过正交试验,对利用芍药基因组DNA的CATB法提取工艺进行优化。[结果]CTAB法提取DNA的OD260/OD280为1.8~1.9,不同处理间差异较明显。除泳道c7电泳结果较差外,其他泳道DNA的完整性都相对较好。除c1c、2泳道RNA拖尾现象较严重外,c3、c4、c5c、6泳道脱尾现象均较轻微,而c8和c9电泳条带较为整齐。CTAB法提取芍药基因组DNA的最佳配方为:CTAB 0.75 g、NaCl 3 g、EDTA 2.5 mlT、ris-HCl 5 ml,pH值8.0。[结论]利用该CATB方法,可获得高纯度芍药DNA。     

美味猕猴桃基因组DNA的高效提取

为了从富含多糖和多酚等次生代谢物质的猕猴桃叶片及野外采集保存的叶样中分离出高质量的基因组DNA,以美味猕猴桃幼叶为试材,对4种不同的DNA提取方法与3种不同的样品保存处理的DNA提取效果进行了试验研究,并首次采用CTAB区室法提取猕猴桃基因组DNA。结果表明,CTAB区室法与硅胶脱水干样保存处理所提取的DNA效果最佳,其OD260/OD280值为1.8以上,能完全被EcoRI酶切消化,1%琼脂糖凝胶电泳谱带明亮清晰,并能获得条带清晰、多态性好的PCR扩增图谱。     

桃树不同材料DNA提取的探讨

利用改良CTAB法,以桃树的冬芽、半木质化韧皮部、老枝韧皮部、嫩叶和成熟叶片为材料提取总DNA。结果表明:5种不同的材料都能提取出DNA,但纯度和产量不同,除成熟叶片和老枝韧皮部外,其他材料的A260/A280值都在1.8以上,DNA的产量在60~160μg/g之间。清晰明亮的PCR产物电泳结果也表明所提取的DNA完全满足ISSR分析的要求。     

梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响

中国梨属植物资源丰富,RAPD技术已广泛用于梨资源遗传多样性研究.通过对不同部位提取的DNA纯度进行测定,并进行RAPD扩增分析,为 RAPD技术在梨属种质资源中的应用提供参考.以鸭梨和杜梨为试验材料,利用CTAB法对其幼叶、老叶及韧皮部等不同组织或同一组织的不同时期进行了基因组DNA的提取,并对其进行了RAPD反应的比较.所提取的鸭梨的幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNA OD260/OD280的比值分别为2.0、1.8、1.7;杜梨幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNA OD260/OD280的比值分别为1.9、1.8、1.6.二者都能成功进行RAPD扩增,且扩增结果基本一致.利用CTAB法从鸭梨和杜梨的幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部提取的DNA均能成功进行RAPD扩增,且结果基本一致.     

不同方法从苦豆子中提取DNA的效果比较研究

分别以苦豆子种子和叶片为研究材料,采用改良的CTAB法和SDS法对苦豆子基因组DNA进行提取,对提取效果采用紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳进行综合比较分析。结果表明：采用两种提取方法所获得的DNA,其OD260/OD280多数都在1.80～2.00范围内,琼脂糖凝胶电泳结果也显示DNA的质量很好;方差分析表明,种子的DNA提取效率显著好于叶片。因此,用苦豆子种子为材料提取DNA是一条快速、简便的途径。     

桃树不同材料DNA提取的探讨

利用改良CTAB法,以桃树的冬芽、半木质化韧皮部、老枝韧皮部、嫩叶和成熟叶片为材料提取总DNA.结果表明:5种不同的材料都能提取出DNA,但纯度和产量不同,除成熟叶片和老枝韧皮部外,其他材料的A260/A280值都在1.8以上,DNA的产量在60～160μg/g之间.清晰明亮的PCR产物电泳结果也表明所提取的DNA完全满足ISSR分析的要求.     

菠萝果实不同部位总RNA提取方法比较

以不同发育时期和不同部位的菠萝果实为材料,比较了改良SDS法、改良CTAB法和Trizol试剂盒法提取RNA的效果。结果表明:3种方法提取的RNA差异明显,其中改良SDS法的效果最佳,其提取的RNA质量较好,无DNA污染,OD260/OD280和OD260/OD230接近2.0,产量达到464.3μg/g.FW以上,该方法提取的RNA能满足RT-PCR、Northern blot和cDNA文库建立等分子生物学研究的需要。     

大米基因组DNA不同提取方法的比较

以市售大米为材料,分别采用热解法、异丙醇沉淀法、CTAB法、SDS法、高盐低pH值法等以及它们的改良方法提取基因组DNA,并对提取的DNA进行光密度、琼脂糖凝胶电泳和PCR检测,比较这些方法的提取效果,优化对 大米材料进行分子标记检测的DNA提取方法.结果表明:除异丙醇沉淀法、SDS法和异硫氰酸胍法外,其他所有方法提取的基因组DNA均可满足PCR检测要求.同时,综合考虑基因组DNA的纯度和浓度,本研究认为大米基因组DNA提取方法的优劣顺序依次为改进CTAB法＞高盐低pH值法＞CTAB法＞改进SDS法和改进热解法.这几种大米基因组DNA提取方法都具有操作简单、耗时短、利于快速检测的优点.