小麦条点花叶病毒品种抗病性评估

利用ＥＬＩＳＡ技术、成株期病级和产量组成，评估了９个小麦品种——ＢＷ１５５，Ｔａｂｅｒ，Ｂｕｔｅ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｓｌｏ，Ｋｅｔｅｐｗａ，Ｇｒａｎｄｉｎ，Ｍｉｎｔｏ和Ｌａｕｒａ对小麦条点花叶病毒（ＷＳ－ＭＶ）的抗病性。结果表明，ＢＷ１５５、Ｔａｂｅｒ的抗病性最好，Ｌａｕｒａ为高感品种；在抗ＷＳＭＶ鉴定中，以病级、产量损失率或ＥＬＩＳＡ测定值为指标具有一致性，三者高度相关，但以ＥＬＩＳＡ测定方便快速；对一些耐病品种的鉴定，需结合产量组成分析     

小麦条点花叶病毒品种抗病性评估

利用ＥＳＩＳＡ技术，成株期病级和产量组成，评估了９个小麦品种－－ＢＷＱ１５５，Ｔａｂｅｒ，Ｂｕｔｔｅ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｓｌｏ，Ｋｅｔｅｐｗａ，Ｇｒａｎｄｉｎ，Ｍｉｎｔｏ和Ｌａｕｒａ对小麦条点花叶病毒（ＷＳ－ＭＶ）的抗病性，结果表明，ＢＷ１５５、Ｔａｂｅｒ的抗病性最好，Ｌａｕｒａ为高感品种，在抗ＷＳＭＶ鉴定中，以病级、产量损失率或ＥＬＩＳ测定值为指标具有一致性，三者高度相关，但以ＥＬＩＳＡ测定方     

大麦抗BYDV的蚜虫获毒酶联免疫吸附法

蚜虫获毒酶联免疫吸附法（ＡＡ－ＥＬＩＳＡ）是指用ＥＬＩＳＡ测定从染病植株上获毒蚜虫以反映品种抗ＢＹＤＶ的方法。经对带Ｙｄ２基因大麦品种８７７－１６与感病品种Ｍａｎｌｅｙ对比测定，按其方法接种３叶期第１叶片，传毒３ｄ后用无毒禾谷类蚜虫从第２叶片上取食获毒１ｄ，采集５头作ＥＬＩＳＡ测定。ＡＡ－ＥＬＩＳＡ法测定ＯＤ值，Ｍａｎｌｅｙ显著高于８７７－１６，用ＥＬＩＳＡ直接测定无显著差异。用ＡＡ－ＥＬＩＳＡ法具有不破坏植株，可对同一部位重复测定，且蚜虫体软，易研碎抽提病毒，测定抗感品种差异明显等优点，具有适用性。     

蝇蛆养殖技术研究 Ⅱ．影响幼虫生长的因子作用模型

蝇蛆养殖技术研究Ⅱ．影响幼虫生长的因子作用模型鲁汉平，钟昌珍（华中农业大学植保系，武汉４３００７０）关键词蝇蛆；幼虫生长；模型ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＨＯＵＳＥＦＬＹ（ＭＵＳＣＡＤＯＭＥＳＴＩＣＡＶＩＣＩＮＡＭＡＣＱ．）ＬＡＲＶＡＬＰ...     

实验感染OPPV绵羊血清中抗体水平动态检测

应用建立的ＥＬＩＳＡ方法和常规的ＡＧＩＤ方法对人工感染ＯＰＰＶ的试验羊进行抗体水平动态检测，结果表明，ＥＬＩＳＡ敏感性高，特异性好。通过颈静脉途径接种２个月后，可出现ＥＬＩＳＡ阳性反应（３／５），而通过气管接种为１个月（２／２）；相对来讲ＡＧＩＤ阳性出现的时间要迟２￣５个月，很难检出低水平的抗体。     

大麦抗BYDV的蚜虫获毒酶联免疫吸附法

蚜虫获毒酶联免疫吸附法是指用ＥＬＩＳＡ测定从染病植株上获毒蚜虫以反映品种抗ＢＹＤＶ的方法。经对带Ｙｄ２基因大麦品种８７７－１６与感病品种Ｍａｎｌｅｙ对比测定，按其方法接种３叶期第１叶片，传毒３ｄ后用无毒禾谷类蚜虫从第２叶片上取食获毒１ｄ，采集５头作ＥＬＩＳＡ测定。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体抗原结合位点分析

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定六株ＩＢＤＶ单克隆抗体抗结合位点，结果表明，六株ＭｃＡｂ的抗识别位点非常相似。     

渭北烟区黄瓜花叶病毒酶联免疫检测方法

将采自渭北烟田的黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离纯化后,制备抗血清并建立了双抗体夹心式酶联免疫检测方法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）,同时对其各项指标作了合理选择,结果发现最适包被和酶标抗体的质量浓度均为０．６２５ｍｇ·Ｌ－１．用此方法测定表明,在渭北烟区越冬油菜是ＣＭＶ的主要越冬寄主;ＣＭＶ侵染烟草所引起的花叶病约占６４．３％．     

土传小麦花叶病毒基因组结构和RNA2自发缺失的研究

描述了土传小麦花叶病毒（ｓｏｉｌ－ｂｏｒｎｅ ｗｈｅａｔ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ,ＳＢＷＭＶ）的基因组结构,并将之与一些植物病毒作比较。发现重复摩擦接种或在高温下（２５￣３０℃）培养引起的ＳＢＷＭＶ部分ＲＮＡ２序列迅速缺失。在最初几次重复摩擦接种后,小麦病株存在野生型ＳＢＷＭＶ ＲＮＡ２和几个不同大小的外壳蛋白通读（ＣＰ－ＲＴ）基因的缺失突变体。在以后的几次重复摩擦接种后,一个缺失突变体成为占优     

花生病毒病研究：I.花生矮花叶病的病原鉴定

１９８７－１９９３年期间，在河北、河南、山东、辽宁、北京４省１市先后采集花生矮花叶病及斑驳病标样２９０个，冷干保存，经用鉴别寄主测定、间接ＥＬＩＳＡ、电镜观察证明，引起北方花生产区花生矮花叶病的病原是花生条纹病毒（轻斑驳病毒）（ＰＳＴＶ原ＰＭＭＶ）、花矮化病毒（ＰＳＶ）、花生黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ－ＣＡ）、花生斑驳病毒（ＰＭＶ）其发生频率依次为４７％，４１．３５，３３．３％，３．３％。在我国除台湾外     

绵羊痘病毒的分离及双抗夹心法ELISA的建立

为了检查现有疫苗与山西北部舍饲羊群所患病是否匹配,以及更好地研究羊痘病毒和研制新型疫苗,对2009年山西北部绵羊群发生的疑似绵羊痘进行了病毒分离及ELISA检测研究。取疑似绵羊痘病羊的皮肤丘疹、水泡或脓泡组织的病毒悬液,接种2月龄绵羊睾丸细胞观察到明显的细胞病变。病毒悬液接种10日龄鸡胚绒毛尿囊膜,未出现痘斑。收获产生病变的细胞培养物,继而利用双抗夹心法ELISA检测羊痘病毒,并确定其病毒含量。结果表明,所分离的病毒为绵羊痘病毒,样品OD值平均为0.156,浓度为2.5 IU.L-1,接近于标准品(2号)。本研究为今后研制新型羊痘疫苗奠定了基础。     

不同测试条件对燕麦孢囊线虫在小麦上产生孢囊数量的影响

小麦对燕麦孢囊线虫的抗性评价基于根系产生的孢囊数量,为优化小麦抗燕麦孢囊线虫鉴定技术,分别测试了土质类型、接种次数、接种密度、接种苗龄对燕麦孢囊线虫在根系形成孢囊数量的影响。结果表明:燕麦孢囊线虫在砂质粘壤土中产生的孢囊数量最高;对于温麦4号品种,分4次接种处理在小麦根部形成的孢囊数量显著高于分1、2、3次接种处理,但依据传统评价标准,各接种次数处理对其抗性鉴定结果相同,均为高感;每株接1 000头二龄幼虫能较好区分不同抗性程度品种的敏感程度。小麦播后3～6d接种在小麦根部形成的孢囊数量显著高于播种时及播后9～15d接种处理。综合上述结果建议在小麦抗孢囊线虫的鉴定中以采用砂质粘壤土、播后3～6d每株1次性接种1 000二龄幼虫为宜。     

叶锈菌及信号分子诱导小麦TcLr35中β-1,3-葡聚糖酶基因的表达分析

【目的】β-1, 3-葡聚糖酶是一种病程相关（pathogenesis-related,PR）蛋白,了解小麦TcLr35中β-1, 3-葡聚糖酶基因在叶锈菌（Puccinia triticina）与TcLr35小麦互作体系中的表达模式,明确其与TcLr35小麦抗叶锈病相关性,进而探讨PR蛋白介导的小麦成株抗叶锈病的分子机理。【方法】在前期研究基础上,利用生物信息学方法分析已克隆β-1, 3-葡聚糖酶类病程相关蛋白基因TaLr35PR2结构特征,利用半定量RT-PCR方法结合genetools和SPSS软件检测叶锈菌及信号分子诱导后不同时间点该基因表达量,并明确其在小麦根、茎和叶各生长器官及小麦不同生长时期的基因表达模式。【结果】小麦TaLr35PR2含有信号肽,编码定位于液泡的碱性蛋白,蛋白序列与其他物种PR2类蛋白序列具有较高同源性,与普通小麦病程相关蛋白2亲缘关系最近,与水稻病程相关蛋白亲缘关系最远。小麦成株期接种叶锈菌后不同时间点,TaLr35PR2在亲和反应（Thatcher）中表达量变化不大,趋于平缓;而在非亲和反应（TcLr35）中的表达有显著差异,总体上,该基因在非亲和组合中表达量明显高于亲和组合中表达量。检测TaLr35PR2在成株小麦TcLr35各器官中基因表达,该基因在叶片中表达量随接菌时间点延长明显增加,并在接菌后48 h达到表达高峰;而在根中接菌后各时间点均未检测到基因表达;在茎中接菌后48 h开始有少量表达,但表达量变化不大,趋于平缓,总体表达丰度为叶＞茎＞根。在小麦生长发育的不同时期,除1叶期外,该基因在TcLr35和Thatcher中均有表达,Mock（未接菌处理）反应中,TaLr35PR2在小麦不同生长期的表达呈上升趋势;接种叶锈菌后,TaLr35PR2在亲和反应和非亲和反应小麦各生长时期的表达量均高于Mock反应,且在成株期表达稳定。信号分子水杨酸（salicylic acid,SA）、脱落酸（abscisic acid,ABA）均能诱导该基因的表达,信号分子预处理后接种叶锈菌,基因表达量显著上调。【结论】TaLr35PR2的表达受叶锈菌诱导,TaLr35PR2可能参与SA、ABA介导的信号通路,并参与小麦TcLr35成株抗叶锈病防御反应。     

小麦赤霉病生防菌DZSG23的抗病机制

课题组前期从健康杜仲叶片中分离得到1株内生细菌枯草芽孢杆菌DZSG23,此菌可以较好地防控小麦赤霉病。为明确芽孢杆菌DZSG23在小麦中的定殖与强化抗病机制研究,利用抗生素标记法分析了DZSG23菌体在小麦组织中的定殖情况,采用荧光定量PCR技术检测不同生育期小麦穗部PR-1、AOS、ACOI等基因的表达水平变化。结果表明,DZSG23可在苗期小麦植株和小麦穗表面稳定定殖;DZSG23浇灌接种苗期小麦后的第34天,DZSG23在苗期小麦植株的根、茎和叶中的定殖量分别达到1.437×10⁶ CFU·g^-1、3.285×10³ CFU·g^-1和2.377×10³ CFU·g^-1;DZSG23喷施小麦穗表面15 d后,穗表面菌群密度仍可达7.146×10³ CFU·g^-1。此外,诱导系统抗性(ISR)信号通路研究表明,拮抗菌DZSG23可以诱导PR-1和AOS基因的上调表达,表明拮抗菌DZSG23引入小麦后可诱导小麦的水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)信号通路,增强其抗病性。     

苗期喷施钾离子对小麦条锈病的影响

[目的]为钾离子在作物抗病中的应用提供参考。[方法]以小麦品种铭贤169为材料,对其1叶1心期的幼苗接种条锈病菌,分别在接菌前24 h、接菌后24 h和接菌后3、7 d对其喷洒1.75、3.50、5.25、7.00 mmol/L氯化钾,接菌12 d后调查发病情况。[结果]接菌前24 h喷氯化钾的处理小麦幼苗的病情指数极显著高于对照（P〈0.01）;接菌后24 h,3.50、5.25、7.00 mmol/L氯化钾处理的小麦幼苗病情指数比对照低18.73%-25.25%,对条锈病的防效为30.30%-40.69%;接菌后3 d,1.75、3.50 mmol/L氯化钾处理的小麦幼苗病情指数极显著低于对照（P〈0.01）,对条锈病的防效为17.14%-18.57%;接菌后7 d,1.75、3.50、5.25 mmol/L氯化钾处理的小麦幼苗病情指数显著低于对照（P〈0.05）,对条锈病的防效为20.25%-39.48%。[结论]钾离子抑制小麦条锈病的最佳浓度为1.75-5.25mmol/L。     

黑龙江省谷糜病毒病的鉴定

试验证明 ,谷糜病毒病毒原的传毒介体为灰飞虱 (L aodel phax striatella Fallen) ,不能经卵传毒 ,生物学测定及田间调查表明 ,该病毒病的症状在谷糜上略有不同 ,二者均表现为矮化、丛生、花叶、后期叶片变红 ,这与小麦丛矮病显著不同 ;谷子还表现硬穗症状。寄主范围与小麦丛矮病一致。EL ISA及免疫电镜测定结果表明 ,该病毒与小麦丛矮病的抗血清呈阳性反应 ,结果证实该病毒为小麦丛矮病毒 (WRSV) ,又称北方禾谷花叶病毒 (NCMV)。     

黄淮麦区小麦资源中高温抗条锈性品种的筛选(英文)

[Objective] The study aimed to screen wheat cultivars with high temperature resistance to stripe rust from the wheat resources in Huanghuai growth area. [Method] Seedlings of 165 wheat cultivars from Huanghuai growth area were identified by wheat stripe rust under high temperature; then the wheat cultivars showing stripe rust at seedling stage were further used to identify the same resistance in field. [Results] 13 cultivars were proved to be stripe rust resistant under high temperature, and the expression stages of stripe rust in the 13 cultivars were revealed. The field identification results confirmed the identification results at seedling stage via inoculation of mixed stripe rust of physiological races. The stripe resistances of wheat cultivars were also proved to be non-race-specific. [Conclusion] Wheat resources in Huanghuai growth area are abundant in wheat cultivars with high temperature resistance to stripe rust.     

小麦成株期对雪腐格氏霉抗性研究

在自然病田对42个小麦品种(系)的调查结果表明,小麦成株期叶部对雪腐格氏霉(Gerlachia nivalis)的抗性有明显差异,茎秆高,叶片窄而挺直的品种比较抗病.小区人工喷雾接种和单株小穗接种的试验证明,小麦穗部对雪腐格氏霉具有抗侵入和抗扩展性能,小穗排列紧密,颖壳内合的品种较抗侵入。     

主栽品种镇稻88对水稻条纹叶枯的抗性特征及其遗传研究

 【目的】明确镇稻88对水稻条纹叶枯病的抗性特征及其抗性遗传模式,寻找与抗条纹叶枯病基因连锁的分子标记。【方法】利用单分蘖鉴定、苗期接种鉴定、非嗜性测验和抗生性测验分析镇稻88对水稻条纹叶枯病和介体灰飞虱的抗性;分别采用单分蘖鉴定和苗期接种鉴定方法对武育粳3号与镇稻88构建的F2群体、F2:3家系进行水稻条纹叶枯病抗性遗传分析;以SSR标记连锁分析方法对抗病基因进行定位。【结果】镇稻88表现出较强的病毒抗性和较弱的抗虫性;其对水稻条纹叶枯病的抗性表现为显性单基因的遗传模式;SSR标记分析显示该抗病基因位于水稻第11染色体上,与标记RM229间的遗传距离为4.7 cM。【结论】镇稻88对水稻条纹叶枯病的抗性主要来自于对病毒的抗性,由一对主效核基因控制,以镇稻88为抗病亲本结合本研究结果,可望加快水稻条纹叶枯病抗性品种选育的速度。     

黄牛狂犬病病毒的分离和鉴定

应用鼠脑传代,从具有神经症状的病牛脑组织中分离获得5株病毒,经电子显微镜观察呈典型弹状病毒样粒子.用抗狂犬病毒CVS(狂犬病毒Ⅰ型代表株)免疫血清作ELISA检测及小鼠中和试验,证明分离株病毒为狂犬病毒.用狂犬病相关病毒Lagos bat(狂犬病毒2型)、Mokola(狂犬病毒3型)和Duvenhage(狂犬病毒4型)免疫血清对分离株病毒作交叉中和试验,结果发现分离株病毒与Duvenhage有较密切的抗原联系.而与Lagos bat及Mokola病毒没有抗原联系.用自制狂犬病毒“核蛋白”单克隆抗体作夹心间接ELISA检测分离株病毒的感染鼠脑均呈阳性反应,5株病毒与CVS及其互相之间没有明显差异.结论认为,由河南省黄牛分离的病毒为狂犬病毒.