西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。     

紫玉兰愈伤组织的诱导及胚状体获得试验研究

用正交统计方法,以MS为基本培养基,调节2,4-D、6-BA和NAA之间的配比,对紫玉兰的雌蕊、雄蕊、花被、花萼和带腋芽枝条等组织进行愈伤组织诱导,试验结果表明:雌蕊在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 4.00 mg/L能够产生浅黄绿色丝状愈伤组织;花萼在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 2.00 mg/L能够产生淡黄色块状愈伤组织;腋芽在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 2.00mg/L+NAA 4.00 mg/L能够诱导产生浅绿色团状愈伤组织,该组织经转接培养后产生胚状体。     

球根海棠"金正日"的离体培养研究

通过诱导胚状体建立组织培养再生系统,研究了球根海棠"金正日"的离体培养.结果表明,外植体经HgCl2溶液表面消毒后,接种到MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L培养基上诱导愈伤组织,15 d后转接到1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导胚状体,诱导率90%以上.胚状体在MS+6-BA 0.3 mg/L +NAA 0.03 mg/L培养基上以丛生芽形式增殖,增殖系数达4～8倍.试管苗生根可采用MS+IBA 0.1 mg/L、蔗糖2%培养基.生根率100%.     

芦笋花药培养胚状体诱导条件优化的初探

为建立一种效率较高的芦笋花药培养诱导胚状体的机制,实验以TH IELIM F1为试材,利用正交实验设计L16(45)探讨以MS为基本培养基附加NAA、6-BA、2,4-D、蔗糖、谷氨酰胺等五种因素对芦笋花药培养诱导胚状体的影响。结果表明:NAA是影响芦笋花药培养中诱导胚状体的主要因素,其次是6-BA、蔗糖,而2,4-D、谷氨酰胺的影响较弱。芦笋花药培养诱导胚状体的最优组合是0.01 mg/L NAA、2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L 2,4-D、50 g/L蔗糖、0 mg/L谷氨酰胺。     

日本结缕草离体培养及高频率植株的再生

以日本结缕草(Zoysia japonica)叶片作为外植体进行离体再生研究。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是MS 1.5mg.L-12,4-D 0.5mg.L-16-BA 26g.L-1蔗糖 5.0g.L-1琼脂,诱导率为65.36%,无性世代增殖倍数高达9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化的最佳培养基为MS 3.0mg.L-1BAP 0.5mg.L-1NAA 1.5mg.L-1AgNO3 35g.L-1蔗糖 6.5g.L-1琼脂,分化率为67.30%,增殖系数为8.67;生根培养基选用1/4MS 0.2mg.L-1IBA 0.3mg.L-1NAA 28g.L-1蔗糖 4.5g.L-1琼脂,生根率为89.60%。     

紫斑牡丹幼胚离体培养试验

以紫斑牡丹离体幼胚为试材,研究了胚龄分别为盛花后30 d、45 d6、0 d7、5 d的幼胚萌发率,选取萌发率高的盛花后75 d胚龄的种子于4℃下低温预处理,观察低温预处理对幼胚萌发的影响,并筛选较为适合的紫斑牡丹幼胚初代培养和增殖培养的培养基成分。结果表明:胚龄为盛花后75 d的种胚易萌发,萌发率为58.3%,经4℃低温预处理后萌发率可达到68.3%;诱导幼胚萌发与成苗的适宜培养基为MS(微量元素3/2)+1.0 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1IAA+20 g.L-1蔗糖+10 g.L-1葡萄糖+300 mg.L-1CH+0.1 g.L-1琼脂,萌发率和成苗率分别达到100%、98.3%;培养基MS+1.0 mg.L-16-BA+0.01 mg.L-1NAA+30 g.L-1蔗糖+0.1 g.L-1琼脂的增殖培养效果较好,增殖倍数可达5.7。     

无种质基因型限制结缕草组培快繁体系研究

结缕草从愈伤组织发育成胚性愈伤再进一步分化为完整植株一直是该领域的研究重点与难点。本研究通过试验建立起一套完善的无种质基因型限制的结缕草组培快繁体系。结果表明,愈伤组织诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,体胚细胞诱导培养基为改良MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,胚状体增殖与生长培养基为MS+0.1～0.2 mg/L 2,4-D+1 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,成苗快繁培养基为MS+0.02～0.05 mg/L NAA+1～2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,生根培养基MS最为合适。     

不同激素配比对花生种胚的离体培养与植株再生的影响

以花生种胚作为外植体,以6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1、6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1和2,4-D 2.0mg·L-1+KT 0.5mg·L-1、2,4-D 2.0mg·L-1+KT 1.0mg·L-1为激素对花生种胚进行诱导,研究了不同激素配比对花生种胚的离体培养与植株再生的影响。结果表明:不同种类的外源激素对外植体的诱导作用不同,花生种胚愈伤组织诱导的最佳培养基为MS中加入6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1。     

玫瑰叶片离体培养胚状体的发生

[目的]为玫瑰转基因提供基础物质。[方法]以玫瑰试管苗叶片为外植体，以MS为基本培养基，研究了不同浓度6-苄基腺嘌呤（6-BA），腺嘌呤硫酸盐（Ad），萘乙酸（NAA）及其组合对胚状体发生的影响，同时也进行了不同蔗糖浓度对胚状体形成的研究。[结果]6-BA对胚状体的诱导效果较Ad好，NAA与二者配合使用可提高胚状体的发生率，其最佳浓度组合为6-BA0．4mg／L＋Ad0．2mg／L＋N从0．2mg／L。蔗糖20-30g/L有利于胚状体的形成。其组织学观察表明，胚状体起源于叶片气孔附近的上表皮细胞或上表皮下方的叶肉组织细胞，为单细胞起源。[结论]玫瑰叶片诱导胚状体的最佳培养基为：1／2MS＋6-BA0．4mg／L＋Ad0．2mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖20～30∥L。     

南瓜未授粉子房和胚珠离体培养影响因素

以11个南瓜品种为材料,以未受精子房和胚珠为外植体,研究基因型、激素种类、外植体培养方式和高温预处理时间对胚状体诱导的影响。结果表明,西葫芦材料X2在MS+4.00 mg·L~(-1) 2,4-D+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) NAA的培养条件下诱导胚状体效率最高,出胚率达15%;子房横切片和胚珠培养对胚珠膨大转绿及胚状体诱导优于子房纵切片培养;外植体在35℃高温条件下预处理5 d有利于胚珠的膨大和转绿。     

离体条件下影响梨叶片再生苗生根的因素研究

利用正交设计研究了不同基本培养基、不同浓度的吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖以及暗培养时间等对砀山酥梨叶片再生苗生根的影响。结果表明,5个因子对叶片再生苗生根的影响程度依次为基本培养基、吲哚丁酸、蔗糖、萘乙酸和暗培养时间,其中不同的基本培养基、不同浓度的吲哚丁酸和蔗糖对梨叶片再生苗的生根有极显著影响。砀山酥梨叶片再生苗生根的适宜组合为1/4MS 0.5 mg.L-1IBA Sucrose 20 g.L-1,暗培养5 d。     

蒙古扁桃单芽茎段培养体系的建立

以蒙古扁桃幼龄实生苗单芽茎段为试材,以MS为基本培养基,研究了外植体消毒方法、生长调节剂对初代培养、增殖培养和生根培养效果的影响。结果表明,70%乙醇10s加0.1%HgCl21min消毒效果良好,外植体污染率18.75%,成活率81.25%;MS 6-BA 1.0 mg.L-1 NAA0.2 mg.L-1培养基初代培养,外植体萌芽率为72.2%;MS 6-BA 2.0 mg.L-1 NAA0.2 mg.L-1培养基增殖培养效果最佳,增殖率2.37;1/2MS IBA1.0 mg.L-1培养基上发根最好,14 d时生根率为40%,平均发根量3.5,平均根长2.09 cm。     

采用均匀设计法优化西选二号培养基配比

以西选二号为试材,运用均匀试验设计方法调整植物生长调节剂的浓度和种类,通过建立回归模型筛选出适宜于西选二号植株愈伤组织形成、不定芽诱导和植株生根的最佳配方.结果表明:以MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA作为愈伤组织的诱导培养基,可以获得92%的愈伤组织诱导率.MS+3.0 mg·L-16-BA +0.1 mg·L-1NAA可作为芽诱导培养基,其芽分化率为90%.使用芽诱导培养基,附加0.6 mg·L-1GA3作为增殖继代培养基为宜.在1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+0.2 mg·L-1NAA培养基中,芽苗诱导生根效果较佳.小植株炼苗移栽成活率达85%.     

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。     

香榧体细胞胚发生的初步研究

 以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚为外植体,研究了基本培养基、复合添加物、碳源以及植物生长调节物质对愈合组织形成的影响,筛选出胚性愈合组织诱导和增殖的适宜条件,并初步进行了体细胞胚的诱导与萌发试验。结果表明：Schenk and Hildebrandt （SH）是最佳基本培养基,碳源以蔗糖最好,在SH中添加谷氨酰胺,愈合组织诱导率显著高于其他处理,达50.8%;低浓度的萘乙酸（NAA）或2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）能够促进愈合组织的诱导,NAA的促进作用比2,4-D明显,当NAA的质量浓度为0.1 mg·L^－1时,愈合诱导率显著高于其他处理,达60.1%;SH+0.1 mg·L^－1 NAA+30 g·L^－1蔗糖是愈合组织形成的最佳条件,SH+0.05 mg·L^－1 NAA+30 g·L^－1蔗糖为胚性愈合组织形成和增殖的最适宜培养基;胚性愈合组织在添加有脱落酸（ABA）和聚乙二醇（PEG） 6000的SH培养基上,可形成体胚,以1/2SH作为萌发培养基,体胚在1 200 lx光照下的萌发效果比黑暗条件下好。图3表3参21     

绒毛狼尾草幼穗的愈伤组织诱导与植株再生

以绒毛狼尾草幼嫩花穗为材料,研究了培养基种类和2,4-D对愈伤组织诱导以及6-BA对分化的影响。结果表明,MS较N6培养基适合绒毛狼尾草的组织培养。在附加3 mg·L-1 2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100%。分化培养基以附加1.0 mg·L-1 6-BA的MS培养基为最佳,分化率为44.0%。在1/2MS培养基中附加0.5 mg·L-1 NAA和0.3 mg·L-1活性炭进行生根培养,根系生长健壮,生根率达100%。     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

黄山松成熟胚培养与植株再生技术研究

以黄山松(Pinus taiwanensis Hayata)成熟胚为试验材料,进行离体培养与植株再生条件的初步研究。结果表明,黄山松成熟胚外植体表面灭菌以75%的乙醇处理1 min,3%的次氯酸钠处理10 min为适宜;愈伤组织诱导培养基以MS + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 NAA为最佳;适宜的不定芽分化培养基为DCR + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA;不定芽伸长以DCR + 0.1 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜;生根培养基以1/2 DCR + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜。建立的植株再生体系为黄山松种质资源的保存、遗传改良及优质种苗繁殖等研究提供了参考。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。