培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

本试验较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰“红翡翠”原球茎的诱导、增殖效果的影响。明确了最佳原球茎诱导培养基配方；筛选出较理想的原球茎继代增殖的培养基、6-BA浓度、添加物的配比参数值：1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋100/L椰乳＋3％蔗糖、0．3％活性炭、1．0％琼脂。     

培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰"红翡翠"原球茎的诱导、增殖效果的影响.明确了最佳原球茎诱导培养基配方,较理想的原球茎继代增殖培养基、6-BA浓度、添加物配比参数值分别为1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAa0.1 mg/L 100g/L椰乳 3%蔗糖、0.3%活性炭、1.0%琼脂.     

蝴蝶兰V31品种原球茎诱导增殖培养研究

以蝴蝶兰红花品系V31品种的原球茎(PLB)为材料,比较不同培养基(MS、1/2 MS、改良VW、White)、不同添加物(椰子汁、香蕉汁、马铃薯汁、胰蛋白胨)和不同浓度的6-BA(0、0.5、1.0、1.5、2.0mg.L-1)对蝴蝶兰PLB增殖的影响,结果表明:试验中蝴蝶兰V31品种原球茎诱导最佳培养基组合为MS+0.5 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1NAA+4%蔗糖+0.2%活性炭(AC)+1.0%琼脂;原球茎继代增殖培养以1/2 MS+1.0 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1NAA+3%蔗糖+100 mg.L-1椰乳+0.2%活性炭(AC)+1.0%琼脂最佳。     

大花蕙兰组织培养及快速繁殖研究

以8个大花蕙兰品种茎尖为材料,采用不同培养基对茎尖原球茎进行诱导、增殖和分化培养,探讨不同浓度6-BA和椰乳对原球茎诱导、增殖和分化的影响效果。结果表明,低激素水平培养基1/2MS 0.5mg/L 6-BA 10%椰乳 2%白糖 适量活性炭对诱导产生原球茎的效果很好,大部分品种的原球茎诱导率达80%以上;在增殖培养基中添加0.5~1.0 mg/L6-BA和15%椰乳,可明显提高5个品种的原球茎诱导率和增殖率。将多次增殖的原球茎转入1/2MS 1.0mg/L 6-BA 0.5mg/L NAA 20%椰乳 1%白糖的分化培养基,原球茎可继续增殖并分化形成许多类胚性的单极丛生芽,再经分化培养后可获得大量根苗完整的再生植株。因此,试验结果可为大花蕙兰的高效低成本组培快繁途径提供依据。     

春兰与大花蕙兰杂交后代根状茎增殖与分化条件

为了筛选适合根状茎增殖分化的条件,以春兰Cymbidium goeringii与大花蕙兰Cymbidium hybridum杂交后代的根状茎为材料进行培养,比较了不同基本培养基、植物生长调节物质和有机添加物等对根状茎增殖与分化的影响。结果表明:1/2MS(Murashige and Skoog)培养基对杂交根状茎增殖与分化效果最适宜;2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和激动素(KT)对杂交组合春兰与大花蕙兰‘梦境’‘Wanderland’的根状茎分化作用不显著,1/2MS培养基添加1.0mg·L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+1.0 mg·L-1萘乙酸(NAA)对春兰与大花蕙兰‘梦境’的杂交后代增殖分化效果最佳;使用有机添加物对根状茎增殖有显著影响,其中以椰汁增殖效果最好,其次为香蕉泥、土豆汁;添加100 g·L-1香蕉泥+50 mL·L-1椰汁最利于根状茎的增殖与分化。图1表4参16     

不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导与增殖影响的研究

[目的]大花蕙兰快速繁殖体系的建立。[方法]以茎尖和带有侧芽的茎段作为外植体，研究不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导和增殖的影响。[结果]结果表明，大花蕙兰茎尖的原球茎诱导率高于侧芽，原球茎诱导的培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．0％芦荟汁；原球茎增殖培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋150g／L香蕉泥＋1．0％芦荟汁；“井”字形切割（底部不分开）是原球茎增殖较为理想的切割方式。[结论]该研究结果可为建立大花蕙兰大规模工厂化育苗体系提供依据。     

垂花蕙兰种子无菌播种和快速繁殖

以垂花蕙兰种子为试验材料,采用种子→原球茎→完整植株的途径,研究基本培养基、植物生长调节剂、有机添加物和活性炭等关键因素对垂花蕙兰种子萌发、原球茎增殖、分化和生根等各培养阶段的影响,探讨垂花蕙兰无菌播种和快速繁殖的关键技术。结果表明,种子在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋蔗糖20 g·L-1 培养中培养60 d可形成原球茎,种子萌发数可达90粒;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 0.5 mg·L-1 ＋ KT 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 培养基上增殖效果好,增殖系数为6.8;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 0.5 mg·L-1 ＋ NAA 0.1 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 上培养分化效果好,分化率高达89.2%;幼苗在1/2MS ＋ IBA 1.0 mg·L-1 ＋50 g·L-1 土豆泥＋蔗糖20 g·L-1 上培养30 d可生根,生根率为94.5%,苗高可达5.6 cm。     

大花蕙兰高频再生体系的建立

以大花蕙兰的不同部位作外植体,对其启动诱导;采用正交试验设计等方法筛选大花蕙兰类原球茎诱导、增殖与生根壮苗的最佳培养基。结果表明:在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,在1/2MS NAA 1.0 mg/L GA31.0 mg/L 香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。     

大花蕙兰原球茎增殖分化影响因素研究

大花蕙兰在供试的MS、1/2MS、KC和VW4种培养基中.其原球茎增殖倍率没有明显差异,在3.51～3.89倍之间,发芽率在MS培养基中最佳,达16.1%.Ad、KT、6-BA等细胞分裂素处理中,以6-BA最有利于原球茎增殖倍数的提高,6-BA浓度在0.1～1.0mg/1范围内对大花蕙兰原球茎增殖没有明显的影响,对幼苗的分化则有一定的影响.原球茎增殖培养基中加入0.5～1mg/1 NAA有利于原球茎增殖倍数与生根率的提高.继代周期以4～6周为宜,培养基中宜加入20～30g/1的蔗糖、10%的椰乳、0.5g/1的活性碳.     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。     

利用丛生芽增殖途径对大花蕙兰进行离体快繁

以大花蕙兰的侧芽为外植体,研究了利用丛生芽途径快速繁殖大花蕙兰的技术。结果表明：通过丛生芽增殖途径也能达到快速繁殖大花蕙兰的目的,在1／2MS＋6-BA3．5mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1＋卡拉胶8g·L-1＋蔗糖30g·L-1＋φ=10％的椰子水（CW）或w=10％的香蕉匀浆的培养基上,丛生芽增殖较快,以40d为1个继代周期,1年最少可增殖9次,以每个培养周期增殖3．6倍计,1个芽1年可繁殖出3．69≈10万株苗;在丛生芽增殖培养过程中,会出现褐化现象,但并未对大花蕙兰丛生芽的增殖产生不良影响;添加妒=10％的CW或W=10％的香蕉匀浆有利于提高丛生芽的增值率及其生长势;试管苗在1／2MS＋NAA1．0mg·L-1＋AC1g·L-1＋卡拉胶8g·L-1＋蔗糖30g·L-1＋φ=10％的CW的培养基上生根良好,生根率为86．1％;试管苗移栽在水苔上的成活率达92．5％。     

组培苗繁殖系数的影响

研究了6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）和α-萘乙酸（NAA）2种植物生长调节物质，以及MS（Murashige and Skoog），B5（Gamborg），N6和WPM（woody plant medium）等4种培养基对浙江雪胆Hemsleya zhejiangensis组培幼苗繁殖系数的影响。结果表明：不同6-BA和NAA质量浓度对浙江雪胆组培苗繁殖系数有较大影响，其最佳质量浓度分别为0.50 mg·L^－1和0.20 mg·L^－1，其繁殖系数分别为10.80和5.60，且6-BA的效果显著高于NAA；而不同质量浓度的NAA和6?鄄BA配比的最佳配方为MS＋6-BA 1.00 mg·L^－1 ＋ NAA 0.02 mg·L^－1和MS ＋ 6-BA 1.00 mg·L^－1 ＋ NAA 0.05 mg·L^－1，2种配比下浙江雪胆组培苗繁殖系数分别为19.30和18.10，与单一植物生长调节物质最佳质量浓度相比，其差异也均达到了显著水平。研究还发现：浙江雪胆的组培苗在初代培养中不经生根阶段就可形成微型块茎，且该微型块茎可直接发育成新个体。图1表4参7     

红花檵木组培快繁技术的研究

为满足生产上对红檵木的需求,深入研究了红花檵木的组培快繁技术。结果表明:红花檵木组培快繁中,初代培养基MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1;继代增殖培养基MS+6-BA 0.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1;生根培养基1/2MS+IAA 2.5mg·L-1+0.1%活性炭;继代培养和生根培养时用有透气孔的培养瓶有利于组培苗以及组培苗根系的生长。     

秋石斛原球茎液体增殖培养研究

以秋石斛‘三亚阳光’幼芽茎尖诱导形成的原球茎为增殖培养材料,采用液体培养方式及正交设计法研究基本培养基、噻重氮苯基脲(TDZ)、椰汁和白糖4种因素对秋石斛原球茎增殖的影响,以期筛选出各因子的最佳水平,建立秋石斛‘三亚阳光’原球茎液体增殖培养技术。结果表明:各试验因素对秋石斛原球茎增殖影响的主次关系为基本培养基TDZ白糖椰汁;筛选出秋石斛PLB适宜增殖培养基配方为改良HM2+TDZ 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+椰子汁20.0mL·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1),增殖培养35d平均增殖系数达6.65。     

建兰变种组培快繁试验研究

本试验利用正交实验确定基本培养基、激素6-BA、NAA的量以及附加物的不同对瓶苗诱导根分化生长的影响,并优化生根培养基;利用无菌播种培育的原球茎,确定激素6-BA、NAA和附加物对根状茎分化的影响,以水苔作为基质,对诱导生根的建兰变种进行炼苗;经分析得出1/4MS NAA2.0mg/L 6-BA 0.1mg/L 10%香蕉泥培养基为建兰变种的最优生根诱导培养基;MS NAA 2.0mg/L 6-BA 1.0mg/L 10%椰子汁培养基为诱导建兰变种根状茎分化最优培养基,炼苗存活率达到93.8%。     

三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体，采用种子→原球茎→完整植株途径，探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果，筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎，萌发率超过80％以上；诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好，增殖率为4．5；原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后，再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d，可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥，原球茎生根率均达100．0％，但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系，为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

蝴蝶兰类原球茎的诱导

以蝴蝶兰优良杂交组合NoⅡ(♀)×No2(♂)和优良品种EA2003无菌苗的叶片为试材,对影响类原球茎(PLB)的发生、增殖等因子进行系统研究。结果表明:1/4MS+6-BA10 mg·L-1+椰子汁100 g·L-1是蝴蝶兰PLB诱导最适宜的培养基;100 g·L-1椰子汁对PLB诱导有明显的促进作用;适宜PLB增殖的培养基是1/4MS+2,4-D1.0 mg·L-1+6-BA2.0 mg·L-1;活性炭可以有效防止NoⅡ(♀)×No2(♂)叶片的褐化死亡,但活性炭对蝴蝶兰优良品种EA2003 PLB的诱导有阻碍作用;叶片基部PLB的发生优于叶片的其他部位。     

激素和添加物对大花蕙兰组培快繁的影响

为了实现大花蕙兰优良个体的快速繁殖，本文采用外源激素配合肌醇与椰汁的方法研究了大花蕙兰茎段的不定芽分化、增殖及试管苗的生根。结果表明：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L＋肌醇100mg／L＋活性炭1g／L＋蔗糖3％有利于大花蕙兰不定芽的分化，并可实现一步成苗；在1／2MS＋6-BA0.3mg／L＋NAA...