根肿菌侵染对大白菜叶绿素荧光参数和光合特性的影响

以大白菜抗根肿病自交系265和感根肿病自交系139为试材,采用室内根肿菌人工接种技术,研究根肿菌侵染对不同抗性大白菜叶片叶绿素荧光参数及光合特性的影响。结果表明,接菌3 d, 139In和265In根毛均有根肿菌侵染,且随着时间延长侵染率呈现先增加后减少的趋势,265In早期根毛侵染率明显低于139In,后期显著高于139In;皮层侵染265In明显滞后于139In,且侵染数均明显低于139In。随着根肿菌侵染率的变化,大白菜叶片叶绿素荧光参数最大光化学效率（F_v/F_m）、非光化学淬灭（NPQ）和光化学淬灭（q_p）呈现规律性变化,265In和139In在多个时间点较其对照表现下降。受根肿菌侵染的影响,接菌后35、70 d, 265In和139In光合速率、气孔导度和蒸腾速率均较对照降低,胞间二氧化碳浓度较对照上升;除气孔导度外,其他参数变化在70 d时差异达到显著水平。该结果为进一步研究根肿菌致病机理和大白菜抗根肿病育种的早期诊断提供了理论依据。     

TYLCV侵染对番茄叶片解剖结构和保护酶系统的影响

［目的］ 研究上海地区番茄黄化曲叶病毒侵染对番茄叶片解剖结构和保护酶系统的影响。［方法］ 采用石蜡切片法观察番茄感病叶片和正常叶片的解剖结构并进行比较;测定病毒感染后番茄叶片内SOD、POD以及CAT的活性变化。［结果］ 感染病毒的番茄叶片与正常植株叶片的解剖结构有一定的差异,患病植株叶的部分细胞遭到破坏,导致皱缩、卷曲等现象产生,影响了组织器官的正常生理功能;受病毒侵染植株的酶活性在前期均有小幅度的增加且活性大于对照,在中后期酶活性开始下降,活性低于对照。［结论］ TYLCV感染番茄后,叶片的解剖结构发生较大变化,保护酶系统遭到严重破坏,严重影响了番茄组织器官正常的生理代谢功能。     

广西番茄烟粉虱传双生病毒的分布及遗传多样性分析

[目的]调查研究侵染广西番茄的双生病毒种类、分布及复合侵染情况,为广西番茄育种及抗病品种布局提供理论依据.[方法]自2011年起,对引起广西番茄曲叶病的双生病毒进行调查、鉴定,并采集疑似双生病毒侵染的番茄样品189份,提取样品总DNA,利用双生病毒简并引物对样品进行检测,挑选部分阳性样品的PCR产物,纯化后连接至克隆载体进行测序,并与GenBank已报道的序列进行比对分析.同时选取不同地区的各病毒分离物进行全序列扩增和测定,构建系统发育进化树,研究其进化关系及遗传多样性.[结果]通过PCR检测发现,189份番茄样品中139份为阳性样品,阳性检出率为73.54%.挑选具代表性的番茄样品进行测序比对分析,发现引起广西番茄曲叶病的双生病毒有4种:中国番茄曲叶病毒、中国番木瓜曲叶病毒、中国番茄黄化曲叶病毒和中国胜红蓟黄脉病毒,且样品存在复合侵染现象,存在7种以上不同类型的复合侵染现象;共获得47个各病毒分离物的病毒全长基因组序列.通过系统发育进化树分析发现,各病毒分离物按地域处于不同的分支,表现较丰富的遗传进化关系.[结论]侵染广西番茄的双生病毒有4种,广泛分布于广西主要的番茄种植区,且病毒的侵染多为复合侵染.侵染广西番茄的双生病毒具地域分布性.     

番茄SlN-like的克隆、表达与抗病毒功能

【目的】番茄（Solanum lycopersicum）作为重要的蔬菜作物,其生长受到包括害虫、真菌、细菌和病毒等各种生物因素的危害。明确番茄抗性基因SlN-like的抗病毒功能与机制,为番茄的抗病毒育种与抗病毒药剂的靶向开发提供理论依据。【方法】从茄科植物基因组数据库Solanaceae Genomics Network中获得SlN-like的全长,并将其分为4段,利用融合聚合酶链式反应（fusion PCR）扩增获得SlN-like的序列全长;通过生物信息学分析SlN-like的进化关系、蛋白特征、保守结构域、亚细胞定位以及互作关系;通过实时荧光定量PCR分析SlN-like在番茄根、茎、叶、花和果实中的表达情况及其在烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）侵染后的叶片表达量;借助烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus,TRV）介导的基因沉默技术（virus induced gene silencing,VIGS）沉默番茄内源SlN-like,摩擦接种TMV-GFP于沉默植株,明确SlN-like对病毒侵染的影响。实时荧光定量PCR分析沉默植株中脱落酸（abscisic acid）、茉莉酸（jasmonic acid）和乙烯（ethylene）激素相关基因的表达量及SlN-like在外施乙烯利（ethephon,ETH）3、6、12、24 h后的表达情况,最终明确SlN-like调控激素途径响应病毒侵染的机制。【结果】通过分子克隆与融合PCR技术,从番茄品种Micro-Tom中克隆获得全长3 444 bp 的SlN-like,上传至NCBI获得序列号MW792493。通过生物信息学分析发现SlN-like含有TIR、NB-ARC和NACHT结构域,并与马铃薯（Solanum tuberosum）N-like（AAP44394.1）亲缘关系最近。SlN-like在番茄各组织中均有表达,在茎中的表达量最高,其次是根、花,叶和果实中的表达量最低。TMV-GFP侵染番茄后第5、7天SlN-like的表达显著高于PBS处理,分别是PBS处理的1.6和2.2倍,并且TMV-GFP侵染会使SlN-like的表达持续升高。TRV载体介导沉默番茄的SlN-like,发现沉默78.3%的SlN-like不会影响番茄生长表型,但可促进TMV-GFP侵染;实时荧光定量PCR分析发现沉默植株中ERF1的表达显著降低,仅为对照组的12.5%;外施乙烯利处理番茄3 h后SlN-like表达量升高,并在12 h达到最高峰,是对照组的2.71倍,24 h后恢复正常。【结论】番茄SlN-like属NBS-LRR类抗病蛋白,其表达受TMV侵染诱导,沉默SlN-like促进TMV-GFP侵染,降低乙烯相关基因ERF1的表达,而外施乙烯利导致SlN-like的差异表达,揭示了SlN-like作为正调控因子可能影响乙烯途径介导的番茄抗病毒防御。     

TMV 和 PVX 胁迫下云烟和番茄实时荧光定量内参基因筛选

合适的内参基因是采用实时荧光定量PCR研究基因表达获得可信数据的基础.为了获得合适的内参基因,更好地研究烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)与烟草和番茄2种寄主的互作,本项研究根据已报道的云烟和番茄看家基因设计引物,使用geNormPlus软件分别对其在TMV和PVX侵染下的云烟97和番茄中表达量的稳定性进行了评估.结果表明:2种寄主植物中供试看家基因中各有4对引物满足qPCR的要求,分别是云烟tub,CYP,GAPDH,β-tub,番茄18S,UK,ACT,EFl-α.在2种病毒侵染后的云烟内参基因中表达最稳定的为CYP,番茄中内参基因为ACT.最终确定这2个看家基因分别作为实时荧光定量PCR研究烟草和番茄在TMV和PVX胁迫下寄主体内基因表达变化的内参基因.该结果为进一步探讨2种病毒共同侵染时,它们与烟草和番茄2种寄主互作生物学效应研究奠定了基础.     

番茄黄化曲叶病毒侵染对番茄叶片光合及荧光特性的影响

以感病番茄‘1479’和抗病番茄‘H24’为试验材料,研究番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)侵染对植株叶片光合及荧光特性的影响。结果表明:TYLCV侵染后,‘1479’叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)均显著降低,胞间CO2浓度(Ci)增加;‘H24’各个参数变化不显著;2个品种的PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)降低幅度较小,‘1479’的PSⅡ有效光化学量子产量(Fv’/Fm’)、PSⅡ实际光化学量子产量(ΦPSⅡ)、表观光合电子传递速率(ETR)和光化学猝灭系数(qP)均显著降低,而‘H24’则降幅较小;‘1479’非光化学猝灭系数(qN)显著升高,而‘H24’升高不明显。表明TYLCV侵染使番茄植株光合作用受到抑制,对感病材料影响显著,而对抗病材料无明显影响。     

弱光对日光温室番茄光合特性的影响

以日光温室春季正常光环境为对照,比较了弱光处理对不同生态型番茄品种功能叶片光合特性及叶绿素荧光参数的影响.结果表明,弱光处理后,番茄功能叶片叶绿素含量明显增加,净光合速率下降,PSⅡ光化学活性提高,碳同化活性降低,反映了品种对弱光的适应性,skala比毛粉802更耐弱光.     

薇甘菊萎蔫病毒感染对薇甘菊光合特性和4种酶活性的影响

为明确薇甘菊萎蔫病毒(Mikania micrantha wilt virus,MMWV)对薇甘菊(Mikania micrantha)叶片生理生化的影响,探讨了MMWV侵染对薇甘菊叶片超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)和苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)活性及叶绿素总含量和光合特性的影响.结果表明:MMWV感染薇甘菊16d内叶片的SOD活性均比对照组高,其中第16天达最大值,但接种后第24和32天SOD活性分别比对照低了13.28％和25.37％;POD活性在接种后16-32d均显著高于对照.PPO和PAL变化趋势相似,在接种后第8天这两个酶的活性分别比对照高了77.75％和23.58％,而在第32天分别比对照减少了14.27％和20.53％.随着侵染时间的增加,感病薇甘菊叶片中叶绿素含量减少,叶绿素a/b值逐步降低;同时最大净光合速率(Pmax)和光饱和点(LSP)分别比健康对照减少了32.34％和12.52％,而对暗呼吸速率(Rd),光补偿点(LCP)和表观量子效率(AQY)无显著影响.表明MMWV侵染可减低薇甘菊叶片光合作用的效率.     

如何防止番茄卷叶

一、番茄卷叶产生的原因 1.病毒侵染可引起番茄卷叶.如烟草卷叶病毒(TLCV)和烟草花叶病毒(TMV)侵染后,下部叶开始卷曲,逐渐向上发展,严重时致使植株矮化,叶片变黄、变脆.     

不同栽培基质对夏季温室番茄生长和光合特性的影响

以椰糠、国产岩棉、进口岩棉作为栽培基质,研究了不同栽培基质对夏季温室番茄生长量、叶绿素含量、光合和荧光特性以及果实品质、产量的影响。结果表明:椰糠基质栽培处理的番茄株高、茎粗、上部展开最大叶长、整株鲜重和干重、单个新叶鲜重和干重、老叶的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素以及类胡萝卜素含量均显著低于国产岩棉和进口岩棉处理;不同栽培基质处理的新叶气体交换参数和叶绿素荧光参数变化差异不明显,椰糠处理的老叶P_n、F_m'、F_v'、F_v'/F_m'、F_v、F_v/F_m显著低于国产岩棉和进口岩棉处理;不同栽培基质处理的番茄果实中VC、VE、可溶性固形物、番茄红素含量差异不显著,但椰糠处理的番茄可溶性糖含量较高,可滴定酸度较低;椰糠处理的番茄产量最低,这可能与其夏季根区温度较高有关。     

番茄对番茄晚疫病抗性遗传分析

试验利用04957(感),04968(感),L3708(抗)和Wva700(抗)4个抗感不同的番茄品种,按Griffing(Ⅰ)完全双列杂交方法配置组合,接种番茄晚疫病,调查发病情况进行分析。结果发现:①不同品种、不同组合间抗病性存在极显著差异;②供试品种间一般配合力和特殊配合力存在极显著差异,Wva700,L3708具有较高的一般配合力效应,二者在配制抗性组合时是较为优良的杂交亲本。Wva700×04957,Wva700×04968组合特殊配合力最高,有进一步研究利用的价值;③抗性遗传中加性效应是主要的,同时存在部分显性,存在细胞质效应;④广义遗传力为90.64%,狭义遗传力为81.48%,均较高,说明亲代对后代的影响作用较大,抗性基因可以通过基因累加的方式在后代中表现出来,宜早代选择。     

番茄专用催熟剂对番茄品质和产量的影响

利用番茄专用催熟剂对番茄果实进行催熟处理,通过营养分析得知：与自然成熟的果实相比,对Vc、茄红素、TSS、总糖、滴定酸含量影响不大;应用番茄专用催熟剂能使绿熟期番茄果实提早10～15d成熟,白熟期能提早5～10d成熟,有利于提早上市,提高前期产量,增加蔬菜种植户的经济效益。     

间作对番茄黄化卷叶病毒病发生的影响

番茄黄化卷叶病毒的流行危害引起番茄产量大幅度下降，番茄间作其它作物，可减轻媒介昆虫传毒，是综合防治番茄黄化卷叶病毒的有效方法之一。番茄间作黄瓜、玉米、菜用大豆、黄秋葵、红薯后对发病情况及白粉虱虫口密度的影响试验结果表明，定植58d后，病害发生达高峰期；白粉虱成虫迁飞高峰在1月份，1月中旬至2月中旬白粉虱幼虫虫口密度最大；定植后37、47、58、78d，不同间作作物上白粉虱幼虫虫口密度有显著或极显著差异；黄瓜、菜用大豆是白粉虱偏爱的寄主植物；番茄间作菜用大豆、玉米、红薯、黄瓜对番茄黄化卷叶病毒有一定防效。     

番茄茎秆浸提液对番茄生长和风味品质的影响

为探究番茄茎秆资源化应用技术及效果,本研究利用番茄茎杆有氧发酵浸提液(EX1)和番茄茎杆厌氧发酵浸提液(EX2)水培番茄,以山崎营养液处理为对照(CK),对番茄植株的生长形态、果实营养品质和挥发性物质等相关指标进行分析。结果表明:1)EX1和EX2处理的株高、茎粗、叶面积和生物量等指标低于CK处理,但番茄果实可溶性固形物、糖酸比、可溶性蛋白和维生素C等指标均优于CK处理,并以EX2处理表现最佳;2)EX1、EX2和CK处理检测到挥发性物质数量依次是39、34和27种;3)EX1、EX2和CK处理的挥发性物质总含量依次是1 403.35、1 931.10和1 368.40μg/kg;4)EX1、EX2和CK处理的番茄特征挥发性物质总量依次是953.82、1 256.60和1 055.06μg/kg。说明单纯使用番茄茎杆浸提液水培番茄,虽然在生长上稍显弱势,但可显著改善果实营养和风味品质。本研究一定程度上使番茄茎秆得到了有效利用,也为其他蔬菜茎秆资源化技术提供理论参考,具有较为广阔的前景。     

番茄耐热品种的筛选

利用夏季自然高温 ,对引进的国内外 13份番茄品种进行比较试验 ,调查不同品种在高温胁迫下的坐果率、产量、抗病性、品质等 ,筛选出太空 1号、中杂 9号、粉都女皇、朝研粉王 4个耐热番茄品种 ,可应用于番茄越夏栽培生产。并对番茄耐热品种的鉴定技术进行了初步探索。     

番茄品比试验初报

引进13个番茄品种,在浙江省平湖市进行秋季种植品比试验,初步试验结果认为,番茄4号和迪利奥在外观、产量和抗性等方面表现突出,可进一步试种。     

苯并噻二唑诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性

以番茄感病品种1479和2300为材料,研究了苯并噻二唑(BTH)诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,并测定BTH处理和番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)接种对番茄叶片几种防御酶活性的影响。结果表明,0.1～2.0mmol/L BTH能有效诱导番茄产生对番茄黄化曲叶病的抗性,其中0.5 mmol/L BTH处理效果明显,诱导效率可达42.7%。喷施BTH或接种TYLCV均可提高番茄叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,但诱导并接种处理的植株叶片上述酶活性比只诱导不接种处理高。说明BTH处理可以诱导番茄增强防御酶活性,降低病情指数,增强对番茄黄化曲叶病的抗性。     

日光温室秋冬茬番茄腐霉茎基腐病的发生与防治

日光温室秋冬茬番茄在烟台地区一般是7、8月份播种，8、9月份定植，11月开始收获，到翌年1、2月份结束。我市自1998年开始，秋冬茬番茄零星发生腐霉茎基腐病．并且呈逐年加重趋势。2005年，因立秋后持续高温严重，该病发生较为普遍，部分温室不得不换茬种植其他蔬菜作物。笔者经多年试验、研究．总结出该病发生特点及无公害综合防治措施。