抗氧化剂对梨基因组DNA提取的影响

以鸭梨和王子廿世纪梨的幼叶为试材,采用CTAB法提取基因组DNA,分析抗氧化剂种类和浓度对DNA提取效果的影响.结果表明,用β-巯基乙醇提取DNA能有效地抑制酚的氧化,所提的DNA呈白色,OD260/OD280为1.948～2.023,平均为1.990,纯度较高,DNA产率为52.8～175.8,电泳图谱主带清晰,能满足对DNA质量要求较高的试验,其提取效果优于VC和PVP两种抗氧化剂.从抗氧化剂浓度上看,2.0%的β-巯基乙醇效果优于1.5%和2.5%的β-巯基乙醇,OD260/OD280平均为1.994,产率平均为128.3μg·g-1.     

β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA质量的影响

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用CTAB法提取蚕豆DNA,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素,研究了β-巯基乙醇和PVP时蚕豆DNA质量的影响.结果表明,用CTAB法提取蚕豆DNA的质量较好、纯度高,λ=260nm/280nm的平均OD值为1.915,变幅在1.81～2.08之间,绝大多数集中在1.9左右,同时,两种抗氧化剂去除蚕豆DNA中酚类物质、防止褐变具有替代作用,但不会影响DNA扩增结果.其中,在CTAB提取液中添加1%的β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP的纯度较高,k=260nm/280nm的平均OD值分别为1.868、1.865,电泳谱带最清晰,无明显拖尾现象,DNA的质量和纯度满足于AFLP技术的要求.     

基于AFLP分析的蚕豆DNA提取方法

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量DNA,采用改良CTAB法,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素进行了试验。结果表明,用改良的CTAB法提取的蚕豆DNA质量较好,纯度高,OD260/OD280平均值为1.915,变幅在1.81~2.08之间,绝大多数集中在1.9左右。β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA纯化具有替代作用,其中在CTAB提取液中加入1%β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP后,提取的DNA纯度较高,OD260/OD280平均值分别为1.868、1.865,而且电泳谱带最清晰,最适于AFLP技术的要求。     

小麦条锈菌DNA提取方法的比较研究

以小麦条锈菌夏孢子为实验材料,分析比较了CTAB法、SDS法、尿素法和CTAB/SDS法4种方法对小麦条锈菌基因组DNA的提取效果。结果表明,利用4种方法提取的小麦条锈菌夏孢子DNA的纯度和得率存在一定差异,单位重量夏孢子分离的DNA量依次为:CTAB法>尿素法>CTAB/SDS法>SDS法,而所获得的DNA纯度依次为:CTAB/SDS法>CTAB法>SDS法>尿素法。以不同分离方法获得的小麦条锈菌DNA为模版,利用特异性微卫星引物RJ17进行PCR扩增和电泳分析,4种方法均能满足SSR反应,但CTAB法更适于SSR反应。     

5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究

[目的]研究蝴蝶干标本DNA的提取方法。[方法]采用5种不同的方法（SDS法、SDS-巯基乙醇-酚法、CTAB法、饱和NaCl法、SDS-巯基乙醇-氯仿法）对蝴蝶干标本DNA进行提取。[结果]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取,并且能成功地应用于蝴蝶线粒体基因COI、CytB和核基因EF-1α的PCR扩增。[结论]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法可以用于研究蝴蝶干标本DNA的抽提,为蝴蝶的分子系统进化研究奠定了基础。     

5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究(英文)

[目的]研究蝴蝶干标本DNA的提取方法。[方法]采用5种不同的方法(SDS法、SDS-巯基乙醇-酚法、CTAB法、饱和NaCl法、SDS-巯基乙醇-氯仿法)对蝴蝶干标本DNA进行提取。[结果]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取,并且能成功地应用于蝴蝶线粒体COI、EF-1α和CytB基因的PCR扩增。[结论]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法可以用于研究蝴蝶干标本DNA的抽提,为蝴蝶的分子系统进化研究奠定了基础。     

小麦条锈菌和叶锈菌的复合PCR检测

利用真菌β-微管蛋白基因的保守序列和小麦条锈菌(Puccinia striiformi f.sp.tritici)、叶锈菌(Puccinia tri-ticina)的SCAR标记引物,对锈菌孢子与感病小麦叶片总DNA进行复合PCR检测,扩增获得了小麦条锈菌171bp和叶锈菌226 bp的特异性DNA片段,其检测灵敏度可达到50 μg·L~(-1)模板DNA浓度水平.在此基础上,可进一步制备小麦锈菌不同种的分子诊断、检测试剂盒.     

改良SDS法提取棉花基因组DNA研究

通过在目前常用的SDS法的DNA提取液中加入抗氧化剂(PVP40和β-巯基乙醇)排除棉酚等次生物质干扰,进行了棉花基因组DNA的提取方法研究,结果表明,改良后的SDS法能够解决棉花DNA提取质量不高且容易褐变等问题。     

基于AFLP分析的蚕豆DNA提取方法

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用改良CTAB法,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素进行了试验,通过紫外分光光度计和0.8%琼脂糖凝胶电泳检测的结果表明,用改良的CTAT法提取蚕豆DNA的质量较好,纯度高λ=260nm/280nm的平均OD值为1.923,变幅为1.81～2.08.绝大多数集中在1.9左右,而且0.8%琼脂糖电泳检测的谱带比较清晰,其中1%的β-巯基乙醇和2%的PVP的λ=260nm/280nm平均OD值为1.86,电泳谱带最清晰,说明这个组合提取的DNA质量最好,最适于AFLP技术的要求.     

微量提取小麦叶片中条锈菌DNA的方法初探

小麦条锈菌DNA的提取对于研究条锈菌遗传群体结构,条锈菌遗传多样性以及揭示条锈菌群体类型和预测优势小种的流行,具有重要的意义。但是常规的病原菌DNA提取首先需要获得大量的病原物纯化体,再对病原物进行DNA提取,费时费力。本文直接对含有条锈菌的小麦叶片标样进行DNA提取,从中获得条锈菌的DNA,用于后续研究。既节省了大量的人力、物力和财力,又为快速检测和获得所需的DNA提供了参考方法,为快速了解病原菌的群体遗传结构变化和毒性演化的规律创造了可行性,为深入研究小麦条锈菌群体生物学和流行学奠定了基础。