青钱柳愈伤组织诱导

为获得优质的愈伤组织,以青钱柳嫩茎和叶片作为外植体诱导愈伤组织,研究了不同的消毒方法、基本培养基和植物生长调节剂对青钱柳叶片和茎段愈伤组织诱导的影响.结果表明,以青钱柳茎段为外植体诱导愈伤组织,最佳的消毒组合为70％酒精10 s+0.1％升汞4min,污染和死亡率最低(18.0％),诱导率最高(95.0％).以青钱柳叶...     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的研究(英文)

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0mg/L6-BA+2.0mg/LIBA和MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LIBA。200mg/LVc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

冬葵愈伤组织诱导技术研究

冬葵(Malva verticillata L.)是一种具有很高药用价值的蒙药,实验以冬葵叶片和茎段为外植体诱导愈伤组织,为冬葵的快繁和细胞培养奠定基础。实验结果如下:冬葵叶片和茎段最适消毒条件是0.1%升汞分别消毒50s、2.5min;叶片和茎段诱导愈伤组织阶段最适培养基相同,均为MS+蔗糖(30g/L)+琼脂(7g/L)+NAA(0.4mg/L)+6-BA(3mg/L)+抗坏血酸(600mg/L)。     

3种抗氧化剂对青钱柳愈伤组织褐化的影响

褐变是导致青钱柳组织培养失败的主要原因之一。研究维生素C(VC)、植酸(PA)和柠檬酸(CA)3种抗氧化剂对青钱柳愈伤组织生长、褐化及其生理生化特性的影响。结果表明,适当浓度的抗氧化剂处理能有效抑制愈伤组织褐化率,促进愈伤组织生长,抑制培养过程中细胞质膜透性的增加。其中VC的处理效果较为明显,PA其次;最适浓度分别为VC 100 mg·L-1、PA 250 mg·L-1和CA 50~100 mg·L-1。VC 100 mg·L-1处理的愈伤组织鲜重增长率比对照增加73.88%,褐化率和细胞膜透性分别比对照低56.52%和45.75%,均达到显著或极显著水平。适当浓度的抗氧化剂使苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性在一定程度上受到抑制,但对多酚氧化酶(PPO)活性的抑制作用总体上不明显。总之,适当浓度的3种抗氧化剂处理能有效降低青钱柳愈伤组织褐化及其产生的伤害,促进生长,对PPO活性的调控可能不是其控制褐化的主要方式,有关机制尚待进一步探讨。     

冬枣花药愈伤组织的诱导与增殖

[目的]获得冬枣花药胚性愈伤组织。[方法]以冬枣花药为试材,研究了碳源种类、基本培养基、植物生长调节剂对冬枣花药愈伤组织诱导及增殖的影响。[结果]麦芽糖为诱导冬枣花药愈伤组织的最适碳源,MS为最适基本培养基,1．0mg／LTDZ为最适诱导与增殖生长调节剂浓度。[结论]在MS＋麦芽糖20g／L＋TDZ1．0mg／L的培养基中,冬枣花药愈伤组织诱导率最高,达86．8％。获得的愈伤组织可进行增殖,愈伤组织呈黄绿色颗粒状,为胚性愈伤。     

培养基及培养条件对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响

在固体培养条件下,研究了不同外植体来源、培养基、植物激素、接种量、培养时间对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响.结果表明:①不同外植体来源的愈伤组织增长量茎段大于叶片,而黄酮含量叶片大于茎段;②8种基本培养基中,改良MS培养基上的愈伤组织增长量及黄酮含量均显著高于其它培养基;③促进青钱柳愈伤组织增长量和黄酮含量积累的最佳激素组合为:1.0 mg.L-1KT+0.5 mg.L-12,4-D+0.3 mg.L-1NAA;④愈伤组织增长量最大时的接种量为0.65 g;⑤愈伤组织培养至12 d增长量最大,培养16 d,黄酮含量达最高值.     

蒙药苘麻的愈伤组织诱导技术研究

苘麻(Abutilon theophrasti Medic.)是锦葵科一年生草本植物,在医药业和农业方面均有较高的应用价值。实验通过组织培养技术,以苘麻小苗的茎段和叶片为外植体诱导产生愈伤组织,为苘麻的细胞培养和快繁奠定基础。实验结果表明:苘麻种子的最适消毒处理为0.1%升汞8 min;种子萌发培养基为蔗糖30 g/L+琼脂5.7 g/L;由茎段和叶片诱导愈伤组织阶段的最佳培养基为MS培养基+琼脂7g/L+蔗糖30 g/L+NAA 0.8 mg/L+6-BA 3.0 mg/L。     

小茴香种子处理及愈伤组织诱导研究

探讨小茴香种子最佳处理技术;以小茴香的茎段和叶片为外植体,诱导愈伤组织,为小茴香的细胞培养和再生体系建立奠定基础。将小茴香种子进行温水处理、GA处理等,比较发芽率。加入含有0.1mg/L赤霉素(GA)的温水中浸泡,放在摇床上摇1～2 h后,栽在花盆中获得栽培苗;将栽培苗的茎段和叶片作为组培材料,茎段和叶片的升汞最适消毒时间分别为4min、3min。然后放到合适的培养基上进行愈伤组织诱导。GA处理后的种子发芽率最高。由茎段和叶片诱导愈伤组织时,最佳培养基分别为MS+蔗糖+琼脂+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L NAA、MS+蔗糖+琼脂+2.0mg/L6-BA+0.7 mg/L NAA。确定小茴香种子栽培时获得最高发芽率的条件,初步筛选出小茴香愈伤组织诱导最佳条件。     

桂花愈伤组织的诱导与增殖

[目的]探索影响桂花愈伤组织诱导及增殖的激素组合。[方法]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。[结果]叶片、茎尖和幼胚在不同培养基中均能产生愈伤组织。在诱导培养基中NAA浓度为0.3 mg/L的条件下,当幼胚、幼叶和茎尖培养基中6-BA浓度分别为3.0、5.0和5.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。在诱导培养基中NAA浓度为0.5 mg/L的条件下,当幼胚、茎尖和幼叶培养基中6-BA浓度为3.0、3.05、.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。从节省成本的因素考虑,最适合愈伤组织增殖的激素组合应为6-BA 2.0+NAA 0.5 mg/L。[结论]该研究为桂花愈伤组织的诱导和增殖的进一步研究奠定了基础。     

5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响

以MS为基本培养基,研究不同浓度的5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响.结果表明:MS培养基中NH4 NO3、KN03浓度分别降至1/2C时,有利于愈伤组织生长和黄酮积累;当KH2P04浓度为3/2C时,愈伤组织生长量与黄酮含量均达到最大值,分别为0.53g/瓶和4.67%;MgSO4浓度在3/2C时,愈伤组织生长良好,而1/2C有利于黄酮积累;CaCl2在一定范围内不会影响愈伤组织生长,适当提高Ca2+浓度有利于黄酮积累.     

中国青钱柳文献计量学分析

基于中国知网(CNKI)总库网络版、万方数据平台、维普中文期刊全文数据库,通过年代、作者和来源等分析了1979年—2012年9月中国关于青钱柳研究的文献。结果表明:1979年—2010年中国青钱柳研究发表文献329篇,以论文发表为主,有关其专题报告、学术会议等开展较少;而近期学位论文的出现,表明在其科研项目方面,已经形成了以学术带头人为主的青钱柳研究人才队伍;从文献来源看,青钱柳研究的地域性特征明显,主要集中在江西、江苏、福建等地的高校和相关科研单位;从研究主题来看,青钱柳叶片内含物保健及医药应用开发研究是近年来热点,苗木培育手段偏向组培等方式,林木的规模化要求使得研究人员对青钱柳的研究已从传统方法向分子生物学涉足。     

青钱柳叶片、愈伤组织及悬浮细胞中齐墩果酸和熊果酸测定

建立高效液相色谱(HPLC)法测定青钱柳叶片、愈伤组织及悬浮细胞中齐墩果酸和熊果酸含量。考察齐墩果酸和熊果酸在不同色谱柱及流动相下的分离效果,并进行比较分析,确定色谱条件为:色谱柱Waters Sym-mitry C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(87∶13,V/V),流速0.85 mL/min,检测波长210 nm,柱温40℃。结果表明,齐墩果酸和熊果酸标品进样量在0.1～20μg时线性关系良好,相关系数R2均大于0.999,平均加样回收率分别为97.87%、96.91%,RSD为1.90%、2.08%,青钱柳叶片、愈伤组织、悬浮细胞中齐墩果酸、熊果酸的含量差异较大。该方法简便快速,准确可靠,可用于青钱柳齐墩果酸和熊果酸含量的测定。     

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究.结果表明:低温侣(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发.基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用.     

青钱柳茎段离体培养研究

以青钱柳嫩枝茎段为外植体.研究了基本培养基、茎段部位、取样时间和植物生长调节剂对其分化的影响.当以青钱柳嫩枝茎段为外植体进行组织培养时,改良MS是适宜的基本培养基,5月份是最佳的取样时期,顶芽下1、2节的茎段分化效果较好;在培养基中添加0.5mg·L-1反式玉米素(ZT)能有效地促进分化,萌发率最高能达到90.9%,平均每茎段分化的芽数达到1.5个.所以,茎段离体培养是青钱柳快速繁殖的有效途径.     

青钱柳ISSR-PCR反应体系的优化

采用改进的SDS法提取青钱柳基因组DNA,测试青钱柳ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试了模板DNA、Mg2+、dNTP、BSA、引物\Taq酶6个因素对青钱柳ISSR扩增的影响。结果表明:合适的退火温度为56.3℃;适宜的扩增体系为:10μlPCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液浓度为(10 mmol/LTris.HCl,pH值9.0,浓度为50 mmol/LKCl,0.1%Triton X-100),12 ng模板DNA,浓度为1.5 mmol/LMgCl2,浓度为1.0 mmol/L4×dNTP,1mg/ml BSA,15 pmol引物,0.75 UTaq酶。     

青钱柳叶中黄酮类化合物的地理变异

以青钱柳Cyclocarya paliurus 11个种源1年生苗的叶片为材料。研究青钱柳叶片中黄酮类化合物的地理变异．初步筛选出黄酮类化合物质量分数高的优良药用种源。黄酮类化合物各成分用液相色谱测定．数据采用方差分析、多重比较和相关分析等进行统计分析。结果表明：青钱柳叶中3种黄酮类化合物质量分数紧密相关．其中山奈酚质量分数高于槲皮素和异槲皮苷。研究的各种源中,安徽歙县和广西资源种源的黄酮类化合物的质量分数较高．分别为6．770和6．494mg·g^-1,安徽舒城种源的黄酮类化合物质量分数最低,仅为1．230mg·g^-1;以经纬度为自变量。各成分的质量分数为因变量进行趋势面分析,青钱柳叶中山奈酚质量分数呈经纬度双向变异．但其变化幅度随经度变化幅度不如纬度变化大,其表现出以108°E和27°N交叉区域为中心向东西递增、向南北递减的趋势．而槲皮素和异槲皮苷质量分数的变化没有明显的规律性。青钱柳黄酮类化合物较高的优良药用种源为安徽歙县和广西资源种源。图4表3参15