不同激素配比对旱稻愈伤组织诱导率的影响

以2个不同旱稻品种为材料,利用不同的培养基和激素相结合,对影响旱稻成熟种子愈伤组织诱导率的因素进行了研究.结果表明,NB培养基可提高旱稻愈伤组织出愈率,且2,4-D与6 - BA不同质量浓度配比对愈伤组织的培养效果不同.2,4-D为4.0mg/L,6- BA为1.0mg/L时品种旱1愈伤组织的诱导率最高(76.8％),...     

籼稻材料特性和激素配比对花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合F。的花药为材料，探讨诱导培养基和分化培养基中不同植物激素配比等因素对花药培养效果的影响。结果表明，诱导培养基中，激素浓度处理对籼稻花药的愈伤诱导率的影响有显著差异，最佳的诱导培养基激素组合为：2，4-D2．0＋KT1．0＋NAA3．0；愈伤诱导率达21．21％；分化培养基中，激素6-BA浓度为0．5mg·L^-1KT浓度为2．0mg·L^-1时，籼稻花药的愈伤平均绿苗分化率达到最大，为28．80％；不同的材料其愈伤诱导率和绿苗分化率存在显著差异。     

不同培养基及激素配比对小麦成熟胚离体培养的影响

[目的]建立适于优良小麦品种遗传转化的高效组织培养再生体系。[方法]以小麦品种豫麦18和豫麦70成熟胚为外植体,探讨了2种培养基和4种激素配比对小麦成熟胚离体培养的影响。[结果]L3培养基的平均愈伤组织诱导率和分化率都明显高于MS培养基,供试2个品种平均出愈率达91.0%以上,平均分化率达46.4%。不同激素及其配比均可诱导小麦成熟胚愈伤组织分化,但不同处理分化率差别很大(10.5%~50.0%);以L3为分化培养基,同时添加2,4-D 0.1mg/L,6-BA 1.5 mg/L的激素配比更有利于愈伤组织的分化,平均分化率达到50.0%。[结论]MS、L3两种基本培养基对小麦成熟胚愈伤组织诱导率均比较高,且差别不大。不同激素配比对小麦成熟胚愈伤组织分化率影响很大。     

蓝浆果离体叶片愈伤组织分化研究

以南方高丛蓝浆果品种"南月"优选系离体叶片诱导出的愈伤组织为材料,开展了激素、培养基及光照强度对愈伤组织分化影响的研究.结果表明:不同激素处理对蓝浆果叶片愈伤组织分化的效果不同,其中以4mg/L的ZT诱导分化效果最好;经MWPM培养基培养的愈伤组织转绿率最高;光照强度对蓝浆果叶片愈伤组织分化具有一定的影响,强光下诱导出的愈伤组织分化率较高.     

影响羊草愈伤组织分化因素的研究

[目的]探索影响羊草愈伤组织分化及再生的因素,为羊草组织培养及转基因受体系统建立提供理论依据。[方法]选取5种类型羊草种子进行组织培养,研究在愈伤组织继代、分化培养过程中培养基类型、激素种类和浓度、低温处理等因素对分化率的影响。[结果]不同种群的羊草愈伤组织分化率差异极大;在愈伤组织诱导和继代过程中添加2.0mg/L2,4-D有利于羊草胚性愈伤组织再生能力的保持;继代培养时,不同种类培养基对分化率影响不大,低温处理不能提高长时间继代培养愈伤组织的分化率;分化培养时,外源激素对提高羊草分化率作用不大。[结论]影响羊草愈伤组织分化率的因素主要包括种质资源以及诱导和继代过程中的激素浓度。     

春小麦愈伤组织诱导和植株再生的研究

本研究以５个春麦品种的幼穗为外植体，接种在ＭＳ为基本培养基不同浓度的激素的诱导培养基上，结果发现，铁春２号是最好的基因型，诱导率、分化率最高，不同品种间诱导率存在极显著差异，６－ＢＡ不利于愈伤组织诱导，最佳生长素配比是２０ｍｇＬ－１２，４－Ｄ＋０５ｍｇＬ－１ＮＡＡ。在分化培养中，最好的激素配比为０２ｍｇＬ－１ＮＡＡ＋０１ｍｇＬ－１Ｋｔ。经长期继代的愈伤组织５℃低温处理１０ｄ，显著提高愈伤组织的分化率。     

紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立

【目的】以北极星、阿尔刚金、皇后2000及国产紫花苜蓿4个苜蓿品种下胚轴为外植体,建立其稳定、高效的离体培养再生体系,为基因转化改良苜蓿性状奠定基础。【方法】研究了种子预处理方法、培养基、基因型以及蔗糖质量浓度对苜蓿下胚轴分化特性的影响。【结果】低温4℃预处理有利于提高苜蓿下胚轴愈伤组织的出愈率和绿苗分化率;其最佳诱导激素组合为"MS+1.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+5.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖"和"MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+5.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖";愈伤组织分化的最佳培养基为"MS+0.3 mg/L6-BA+3.0 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+5.5 g/L琼脂+50 g/L蔗糖";最佳蔗糖质量浓度为50 g/L;4个紫花苜蓿品种愈伤组织诱导率的差异不大,但分化特性有较大差异,分化率由高到低依次为北极星、阿尔刚金、皇后2000和国产紫花。【结论】不同的种子预处理方法对4种紫花苜蓿品种的分化率均有一定影响,3种处理中以4℃下浸泡2 h处理的分化率最高,与其他处理间的差异达显著水平(P<0.05)。不同激素组合是影响紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱导率和分化率的主要原因,不同激素组合处理间的差异均达到显著水平(P<0.05),2,4-D与6-BA配合对紫花苜蓿下胚轴愈伤组织的诱导效果较好,分化培养基中高质量浓度的NAA,不利于愈伤组织的分化;不同基因型对分化率有显著影响(P<0.05),而不同蔗糖质量浓度对分化率的影响不显著(P>0.05)。说明其对离体培养再生体系的影响作用与处理方法、培养基、基因型相比是次要的。     

影响水稻花药培养效率的几个因素

本试验通过对不同的基本培养基、激素配比及基因型材料进行试验。结果表明,不同的基本培养基对花药培养效率有明显差异。M8培养基的愈伤组织诱导率略高于N6培养基,绿苗分化率则明显高于N6培养基。不同的激素配比,其效率各异,M8培养基中添加了2,4－Dmg/L,KT4mg/L和NAA3mg/L的培养基,较适合于水稻花药培养。不同遗传差异的材料是影响愈伤组织诱导、分化的重要因素。不同组合的愈伤组织诱导率的绿苗分化率差异较大。其中零轮／温266、48－2／T984和48－2／零轮等组合的愈伤组织诱导率、绿苗分化率较高,10-35/pecos最低。     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

啤酒大麦幼胚愈伤组织诱导和植株高效再生

[目的]筛选出组织培养特性优良的大麦遗传转化受体。[方法]以7个大麦优良品种为实验材料,幼胚为外植体,研究基因型、培养基、激素等对大麦幼胚愈伤组织的诱导及植株再生的影响。[结果]在愈伤组织诱导过程中,甘啤4号等4个品种在三种诱导培养基上出愈率均较高,达100%;2,4-D与dicamba联用的MS2培养基上形成的愈伤组织质量优于MS1和MS3;品种间愈伤组织分化率差异显著,秀81-47分化率为88.9%,略低于模式品种Golden Prom ise;不同分化培养基的分化效率不同,在RN1培养基上的平均分化率较高。[结论]该试验筛选出愈伤组织诱导频率和绿苗分化率均较高,适合于遗传转化的受体材料,如秀81-47,甘啤4号。     

Dicamba and Sugar Effects on Callus Induction and Plant Regeneration from Mature Embryo Culture of Wheat

To establish a highly efficient plant regeneration system for wheat genetic transformation, the effects of three different concentrations of dicamba and two different sugar types on callus induction and plant regeneration from mature embryo cultures were evaluated. Callus induction and plant regeneration were obtained from mature embryos of two commercial cultivars Zhoumai 18 and Yumai 34 （Triticum aestivum L.） cultured on L3 basal medium. The results showed that the efficiency of mature embryo culture was significantly influenced by the genotypes, sugar types and dicamba concentrations. 4 mg L^-1 dicamba proved the best effective for inducing embryogenic callus and also gave the highest proportion of plants regenerated across the two cultivars. Substitution of maltose by sucrose significantly improved the plant regeneration efficiency in both cultivars. There was a significant interaction between genotype-by-sugar types, and sugar types-bydicamba concentrations. Overall, Zhoumai 18 gave the highest frequency of plant regeneration （82.65%） when dicamba concentration was 4.0 mg L^-1 and with sucrose in initial callus induction. These results will facilitate genetic transformation work with elite wheat.     

优良小麦转基因受体品种的筛选及成熟胚半胚培养的研究

为了筛选具有良好组织培养特性的优良小麦品种作为转基因受体,使转基因小麦能尽快得到应用,对4个小麦品种的幼胚和成熟胚以及7个小麦品系的成熟胚进行离体培养,考察其组织培养特性.结果表明,11个品种(系)的成熟胚成愈率都达90%以上,但不同成熟胚来源的愈伤组织的植株再生率存在很大差异:7个小麦品系的植株再生率都低于20%,而4个小麦品种的植株再生率都达35%以上,幼胚成愈率及植株再生率都分别达90%和62%以上.该研究为小麦的遗传转化提供了几个新的优良受体品种.该研究进行成熟胚培养时,采用半胚培养的方式,一方面有效地克服了成熟胚在诱导培养基上直接萌发的现象,另一方面提高了成熟胚来源的愈伤组织分化为多苗的能力.该再生体系可作为小麦胚培养的参考.     

EFFICIENT CALLUS INDUCTION AND PLANT REGENERATION FROM IMMATURE EMBRYO CULTURE OF TRITICUM AESTIVUM L. - THINOPYRUM INTERMEDIUM ALLEN DISOMIC ADDITION LINES

An efficient plant regeneration system was developed from the immature embryos of Triticum aestivum L. Thinopyrum intermedium alien disomic addition lines, which resistant to powdery mildew. The protocol was based on a series of experiments involving the callus induction and differentiation. The experiment studied the effects ofmature embryos. We found that the embryembryo size on callus induction and differentiation of the immature embryos. We found that the embryo size is critical for the establishment of embryogenic callus. Immature embryos (0.8 ~ 1.5 ram) showed high ability to produce embryogenie callus capable of regenerating green plants. The medium Murashige and Skoog‘ s (MS) added with 2mg/L 2, 4-diehlo-rophenoxyacetic acid (2, 4-D) gave the best embryogenic callus induction, maintenance and regeneration. The embryogenic callus maintained high regeneration during six subcultures in the callus induction medium. Suitable time ofpartialdesiccation could effectively improve the regeneration capacity of the callus cultured for 3-4 month. Bud green spot and root green spot were observed during the differentiation of callus and the difference between them was described. Regenerated shoots were rooted on half-strength MS medium containing 0.2 mg/L Naphthalene acetic acid (NAA). Plants were successfully transferred to soil and grew well. This efficient plant regeneration system provides a foundation for the study of somaclonal variation of Triticum aestivum L.- Thinopyrum intermedium alien disomic addition lines.     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生体系的研究

以小麦的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生.研究结果表明,在MS+2,4-D(3.0 mg/L)+VB1(1.0 mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为72.3%,但愈伤组织质量较差;在低浓度2,4-D和添加了ABA的继代培养基中,愈伤组织质量明显改善,胚性愈伤组织增加.筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(4.0 mg/L)+NAA(0.3 mg/L)中,分化率达73.18%.该研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体的小麦组织培养再生体系.     

Establishment and Optimization of the Regeneration System of Mature Embryos of Maize (Zea mays L.)

A reliable system was developed for regeneration from mature embryos derived from callus of four maize inbred lines (Liao 7980,Dan 9818,Dan 340,and Dan 5026).The protocol was mainly based on a series of experiments involving the composition of culture medium.We found that 9 μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in MS medium was optimum for the induction of callus.The induction frequency of primary calli was over 85% for four inbred lines tested.The addition of L-proline (12 mM) in subculture medium significantly promoted the formation of embryogenic callus but it did not significantly enhance growth rate of callus.Efficient shoot regeneration was obtained on regeneration medium containing 2.22 μM 6-benzylaminopurine in combinations with 4.64 μM Kinetin.Regenerated shoots were rooted on half-strength MS medium containing 2.85 μM indole-3-butyric acid.This plant regeneration system provides a foundation for genetic transformation of maize.     

甜玉米和糯玉米幼胚离体培养试验

以N1、N28、T5、1＇6等4个玉米（Zea mays L．）自交系为材料，进行幼胚离体培养．通过愈伤组织的诱导、继代、分化和植株再生等试验，对影响玉米幼胚愈伤组织诱导率和胚性率的因素进行了分析．结果表明，甜、糯玉米幼胚诱导出愈伤组织的能力较为普遍，但诱导率及胚性率因基因型不同、所选用培养基不同而不同，基因型是影响玉米幼胚愈伤组织诱导和幼苗再生的一个重要因素；选择大小为1～2mm的幼胚作为外植体有利于诱导出理想的胚性愈伤组织；2，4-D是愈伤组织诱导和继代不可缺少的植物激素，在愈伤组织诱导及继代过程中2，4-D含量以2．0mg／L为宜；AgNO3有利于胚性愈伤组织的诱导和生长，最佳含量为10mg／L，比对照高27．15％．     

不同小麦品种成熟胚愈伤组织的培养研究

[目的]通过对河北省小麦品种的种子进行组织培养,探索适合河北省栽培小麦品种的培养条件,为河北省小麦的遗传改良工作奠定基础。[方法]对4种不同小麦品种的成熟胚进行离体培养,研究影响小麦愈伤组织诱导的因素。[结果]结果表明:将成熟胚盾片向上放置可明显提高愈伤组织的诱导率;利用2 mg/L 2,4-D并添加水解酪蛋白,可使不同品种小麦愈伤组织得出愈率均高达80%;此外,不同品种的出愈率随着2,4-D浓度的升高存在较大差别。[结论]该研究探索影响小麦成熟胚愈伤组织诱导的因素,建立一套合适的植株再生体系,为加强我国小麦的遗传转化奠定了基础。     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体，在1/4 MS基本培养基上，对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导，探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中，暗培养20 d后，愈伤组织的诱导率达到90.10%；暗培养30 d后，胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%；将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上，光培养20 d，平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株，将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上，分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。      

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

[目的]对日本落叶松体细胞胚胎发生进行系统研究。[方法]以日本落叶松5个品种的未成熟合子胚为外植体,研究基本培养基、品种基因型、杂交系和纯系品种对日本落叶松愈伤组织诱导的影响,以及ABA对体细胞胚成熟及植株再生的影响。[结果]通过对日本落叶松胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的成熟培养获得再生植株。2种基本培养基中,DCR对胚性愈伤组织的诱导频率最高,达54.0%;落叶松品种之间的愈伤组织诱导率有差异,以杂交品种愈伤组织的诱导率最高,达71.4%,优于纯系的落叶松品种（27.3%～50.0%）;在体细胞胚的成熟培养过程中,ABA可严重影响体细胞胚的发育,并影响到其以后的萌发能力和植株再生。[结论]杂交品系更有利于胚性愈伤组织诱导,ABA对日本落叶松体细胞胚胎发育起重要作用。     

小麦成熟胚高频再生体系的建立

以甘春24成熟胚为外植体,研究消毒方式、浸种时间、接种方式、2,4-D质量浓度等处理对愈伤组织诱导与分化的影响,旨在建立一套有效的小麦高频再生体系。结果表明,不同消毒处理、2,4-D质量浓度和接种方法对成熟胚愈伤组织分化有极显著影响,不同浸种时间对成熟胚愈伤组织分化的影响差异不显著。采用25%NaClO初次消毒25min,浸种后用25%NaClO消毒10min,对愈伤组织的诱导较好,对成熟胚伤害小,且污染率低;浸种15～21h,对成熟胚愈伤组织的诱导无明显差异,但浸种18或21h有利于胚性愈伤组织的分化;成熟胚刮碎处理,有利于愈伤组织的诱导与分化,其诱导率与绿点率分别为98.33%,62.04%;当2,4-D质量浓度为2.5mg/L时,甘春24胚性愈伤组织品质较好。