波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究

1999～2000年,在成都波尔山羊种羊场进行了波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究.对12只供体用FSH减量法进行超排处理,回收胚胎257枚,平均21.4±11.1枚,其中可用胚206枚,平均17.2±8.33枚.将170枚可用胚移植给同期发情的78只雅安奶山羊受体,其中2只在妊娠2个月后流产,49只受体羊妊娠到期产下纯种波尔山羊羔88只,移植受体妊娠率65.4%(51/78),产羔受体比率62.8%(49/78),胚胎成羔率51.8%(88/170).平均每只波尔山羊供体通过胚胎移植增加纯种后代7.33只.其中RB52号波尔山羊获16枚胚胎,移植给8只奶山羊(双胚),全部妊娠,产下13只纯种波尔山羊,胚胎成羔率达81.3%.结果表明,波尔山羊胚胎移植奶山羊能获得较高的妊娠率和胚胎成羔率,已可从研究阶段发展到产业化应用.     

波尔山羊批量胚胎移植莎能奶山羊

采用阴道栓 FSH超数排卵,经产供体波尔山羊22只,在放栓后第9～11天,连续4d递减量肌肉注射FSH。22只供体羊发情与纯种波尔山羊种公羊配种后第7天,手术回收输卵管中早期发育胚胎再经手术移入同期发情的受体奶山羊输卵管内妊娠产仔。结果表明:1获得373枚早期胚胎,其中A级胚胎占31.1%(85/273),B级胚胎占49.5%(135/273),异常胚胎占19.4%(53/273)。2将167枚7日龄可用胚胎(A级和B级)移植147只受体羊输卵管内,移植后35d,妊娠98只,妊娠率为67%(98/147),83只羊足月产羔为89只,产羔率为85%(89/98),20只受体移植了两枚胚胎,只有6只产双羔。3羔羊出生重平均为3.7±0.54kg。每只供体羊平均产羔4.05只。胚胎移植所得羔羊的初生重与自然繁殖波尔羔羊无显著差异(P>0.05)。试验证明,山羊胚胎移植计划可使良种群体繁殖率提高3～5倍,优秀个体繁殖力提高6～8倍,从而加快纯种山羊的繁殖。     

山羊鲜胚及冻胚移植

经超排处理获黑山羊3日龄新鲜胚眙12枚,分别移植到同期发情的6只白色受体羊,其中2只妊娠,产羔3只,受体妊娠率为33.3‰(2/6),鲜胚移植成功率25.0%(3/12)。7日龄山羊冷冻胚胎35枚,分别移植到同期发情的18只浏阳黑山羊和白色马头山羊受体母羊,其中7只妊娠,受体妊娠率为38.89%(7/18)。产活羔10只,流产1只,冻胚移植成功率31.43%(11/35)。     

波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用

采用自己研制开发的波尔山羊胚胎手术回收和移植的关键器械，共进行122只供体的胚胎回收，回收供体卵巢上正常黄体总计2751枚，回收卵总数2504枚，回收率达到92．3％。采用这种自行研制的胚胎移植器械进行胚胎的子官移植，将2127枚波尔山羊胚胎移植给1182只受体，受体妊娠率达到63．0％（745／1182），证明该胚胎移植器械和制定的应用程序是可行的。     

胚胎移植中受体羊重复使用效果的研究

将140枚波尔山羊胚胎移植给63只奶山羊受体,第2年将49枚波尔山羊胚胎重复移植给其中的31只受体,重复2次使用,第3年再将26枚胚胎第3次重复移植于其中的13只受体,试验结果表明,在使用自制专用移植针,熟练、稳妥地进行手术操作的情况下,受体重复使用3次不显著影响移植效果,各次胚胎移植的受体妊娠率分别为61．9％(39／63)、64．5％(20／31)和61．5％(8／13),胚胎成羔率分别为51．4％(72／140)、53．1％(26／49)和46．2％(12／26)。     

波尔山羊胚胎移植技术研究

选择 1～ 2岁的波尔山羊为供体 ,在发情周期第 9～ 14天 (发情的当天为 0天 )的任何一天连续 3天每天上、下午肌肉注射FSH。在开始注射FSH的第二天上、下午 ,同时肌肉注射氯前列烯醇总量为 1 5ml,进行超排处理。经处理的母羊发情后配种 2～ 3次。在第一次配种后的第 6～ 6 5天手术冲胚、手术移植。 1999年 11～ 12月超排供体 15只 ,冲出胚胎 111枚 ,其中可用胚胎 10 4枚 ,变性胚 3枚 ,未受精卵 4枚。将 10 4枚胚胎移植给 10 3只受体羊 ,结果有 5 5只羊妊娠 (3个情期不返情 ) ,妊娠率为 5 3 4%。     

波尔山羊卵泡卵母细胞的体外培养和输卵管配子移植

从4头同期发情与超数排卵的因重复采胚不孕的供体波尔山羊卵巢采得24枚卵泡卵母细胞(18枚卵丘卵母细胞，6枚裸卵)，其中9枚卵丘卵母细胞直接与获能后的精子实施配子输卵管内移植，4头受体均未受孕；其余15枚进行26h成熟培养，经培养后其中9枚卵丘卵母细胞中有6枚卵丘扩散，3枚未扩散；6枚裸卵因均退化而弃去。9枚卵丘卵母细胞移植至4头受体后有两头妊娠并如期产羔各一头。     

波尔山羊活体采卵与卵母细胞体外受精技术

对10只不孕不育波尔母山羊采用超数排卵、活体采卵、卵母细胞体外成熟培养以及体外受精等技术方法,探讨其是否能正常繁育后代。试验中6只供体经超数排卵处理,在发情前利用特制的采卵装置进行活体采卵,共采集到30枚形态学正常的卵母细胞。经过体外成熟培养,有21枚成熟卵母细胞进行了体外受精处理和培养,获得16枚2 细胞胚胎,移植到4只同期发情的当地山羊受体输卵管内,经妊娠检验,有两只受体受孕,其中1只受体产出正常羔羊2只。该技术经进一步改进完善后可望作为不孕不育波尔山羊繁殖后代的辅助生育技术。     

波尔山羊批量胚胎移植技术体系在上海建立

上海市转基因研究中心从 1999年摸索波尔山羊批量胚胎移植条件 ,现已建立波尔山羊批量胚胎移植技术体系 ,一批次对 5 5只原种波尔山羊进行超数排卵 ,平均每只采集有效胚胎 2 0 2枚 ,共移植山羊5 5 6只 ,受体怀孕率 6 1.3% ,通过胚胎移植共产羊羔40 9只。波尔山羊批量胚胎移植技术体系在上海建立     

FSH剂量、受体品种及移植胚胎数对崇明白山羊胚胎移植效率的影响

为提高崇明白山羊的繁殖效率,用促卵泡素（Follicle-Stimulating Hormone,FSH）对崇明白山羊进行超数排卵,回收2～4细胞期胚胎移植至同期发情受体的输卵管,跟踪受体妊娠和产羔结果,比较不同FSH剂量时的超排结果,比较受体品种和移植胚胎数对妊娠率和产羔率的影响。试验结果为：（1）对于体重在20～30 kg的崇明白山羊,FSH的最佳超排剂量为240 U,每头次超排平均可获得可用胚胎10.06枚。（2）每只受体均移植2枚胚胎时,徐淮山羊的早期妊娠率为56.44%（57/101）,高于崇波杂交羊组（崇明羊与波尔羊的杂交后代）47.62%（10/21）和徐波杂交羊组（徐淮羊与波尔羊的杂交后代）46.93%（23/49）,但各组间早期妊娠率差异均不显著。（3）移植4枚胚胎时,妊娠率为60.00%（12/20）、产羔率为1.75,均高于移植2枚胚胎组的52.82%（75/142）和1.30。而移植4枚时胚胎的得羔率为26.25%（21/80）,低于移植2枚胚胎组的33.25%（141/424）。这表明,移植4枚胚胎可以提高受体妊娠率和产羔率,但降低了胚胎利用率。