6-BA诱导大豆子叶节和茎尖出芽的研究

以大豆品种“合丰35”的成熟种子为材料,研究6-BA诱导子叶节和茎尖出芽的结果表明,大豆萌发和不定芽诱导时分别加入0.4mg·L-1和1.1mg·L-16-BA,每个外植体分化出的芽数最多为3.56;茎尖再生系统中,6-BA诱导茎尖不定芽形成的最佳浓度是3.5mg·L-1,最佳诱导时间是24～28h左右,平均每个外植体分化出的不定芽数为2.78。     

大豆子叶节再生体系的建立

以大豆子叶节作为外植体,研究不同基因型对丛生芽诱导的影响,筛选出丛生芽诱导率较高的大豆基因型小粒豆(东农50)。在此基础上,以小粒豆的子叶节为外植体,研究种子消毒方法、种子萌发及芽诱导阶段6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对丛生芽诱导的影响以及生根阶段吲哚丁酸(IBA)对生根的影响。在确定氯气消毒法作为适宜大豆种子消毒的方法的基础上,最终确定萌发培养阶段添加1.0mg.L-1 6-BA、芽诱导阶段添加1.67mg.L-1 6-BA、生根培养阶段添加1.0mg.L-1 IBA较宜。     

TDZ与6-BA对魔芋不定芽诱导的效应研究

为了建立魔芋离体培养高效再生体系,研究了TDZ与6-BA对魔芋不定芽分化的效应。结果表明:(1)单独使用TDZ和6-BA或6-BA与TDZ、6-BA与NAA组合均能诱导魔芋愈伤组织分化形成不定芽,且TDZ与NAA组合有利于魔芋不定芽的分化,当培养基中激素配比为TDZ 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1时,不定芽分化率可高达96.15%;(2)TDZ或TDZ与NAA组合对魔芋不定芽数量的增加非常有效,增殖系数显著高于单独使用6-BA或6-BA与NAA组合,培养基中TDZ为1.0mg·L-1时增殖系数最高,可达15.78。(3)相比于激素6-BA,TDZ更易于导致不定芽的白化现象,最高白化率可达28.37%,而培养基中NAA的适当添加,可在很大程度上降低魔芋不定芽的白化。TDZ 1.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比,不定芽白化率降至7.56%,6-BA 2.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比不定芽白化率为0。(4)TDZ对魔芋不定芽的伸长生长表现出较强的抑制作用,而6-BA对不定芽的伸长生长则表现出较好的促进作用,可见在继代培养中使用6-BA更有利于魔芋不定芽的伸长生长。     

改良大豆胚尖再生体系的研究

为了研究利用Thidiazuron(TDZ)建立大豆胚尖高效再生体系的可行性。跃进10号的成熟种子浸泡16 h后,收集胚尖转入添加了不同浓度的TDZ芽诱导培养基中,4周后计算出芽率,并对拔高培养基和生根培养基进行优化。TDZ浓度为0.08 mg/L时,出芽率最高,达92.6%,平均每个外植体产生的丛生芽的数目也最多。适宜大豆胚尖的芽诱导分化培养基为MS+0.08 mg/L TDZ,拔高培养基为MS+2.0 mg/L KT+0.2 mg/L NNN,生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA。利用TDZ建立大豆胚尖高效再生体系是可行的,提高了丛生芽的分化率,为快繁和提高遗传转化效率奠定了坚实的基础。     

欧美杨POR组培再生系统研究

以欧美杨POR(Populus×euramericana)幼嫩茎段、叶片2种外植体为材料,研究诱导不定芽、茎伸长和生根的合适培养条件。结果表明,TDZ在芽诱导过程中有显著的促进作用,不定芽诱导最适培养基为MS+TDZ 0.05mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1,茎段和叶片分化率分别为97.3%和88.6%;丛生芽的茎伸长诱导最适培养基为MS+KT 0.5 mg·L-1+GA31 mg·L-1+果糖30 g·L-1,茎段和叶片来源的丛生芽的茎伸长率分别为95.5%和90%,茎伸长培养20 d,每个外植体超过3 cm的芽有3个以上。抽茎芽可直接转入生根培养基,在培养基1/2 MS+IBA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1中生根率可达92.2%,生根数量多,苗体健康。     

正交设计在大白菜愈伤组织诱导中的应用

通过L25(56)正交试验,优化及筛选最适合大白菜鲁白六号子叶及下胚轴愈伤组织诱导的4种植物生长调节剂和AgNO3的浓度组合.结果表明,在α-NAA、6-BA、TDZ、ABA和AgNO3中,α-NAA 对子叶愈伤组织诱导率的影响达极显著差异,ABA对子叶愈伤组织诱导率的影响达显著差异,确定以MS 1mg·L-1 α-NAA 1mg·L-1 6-BA 3mg·L-1 TDZ 0.5mg·L-1 ABA 10mg·L-1 AgNO3组合为最佳子叶愈伤组织诱导培养基,MS 0.8mg·L-1 α-NAA 2mg·L-1 6-BA组合为最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基.试验中还发现,愈伤组织发生的同时还伴随着不定芽的发生,不定芽发生率较高的外植体,其产生的愈伤组织较少,且多为致密型愈伤组织.     

芍药种胚启动培养及丛生芽诱导研究

为探究芍药种胚启动培养、丛生芽诱导及增殖过程中的主要影响因素,以芍药种胚为外植体,研究不同发育阶段的种胚(授粉后65,75,85,95d)、暗培养时间(0,4,8d)以及3种激素(1.0mg·L~(-1)6-BA、0.5mg·L~(-1)GA_3、0.2mg·L~(-1)NAA)对芍药种胚启动培养的影响;同时研究6-BA(0.5mg·L~(-1)和1.0mg·L~(-1))与GA_3(0.5mg·L~(-1)和1.0mg·L~(-1))的激素组合对种胚丛生芽初步诱导的影响;也探究不同浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg·L~(-1))与1.0mg·L~(-1)GA_3组合对种胚丛生芽二次诱导以及不同浓度的CH(0,0.3,0.5g·L~(-1))对种胚丛生芽增殖成苗的影响;本试验还以子叶节为外植体,接种在种胚丛生芽最适的诱导及增殖的培养基中,对种胚丛生芽及子叶节丛生芽形态特征的差异进行初步探究。结果表明:芍药种胚启动培养的最佳胚龄为授粉后的75d;胚苗最佳的培养方式为暗培养4d后置于正常光照条件下培养;启动培养最适激素组合为0.5mg·L~(-1)GA_3+1.0mg·L~(-1)6-BA;丛生芽初步诱导及二次诱导最适培养基分别为MS+1.0mg·L~(-1)GA_3+1.0mg·L~(-1)6-BA及MS+1.0mg·L~(-1)GA_3+2.0mg·L~(-1)6-BA;丛生芽增殖的最适培养基为1.0mg·L~(-1)MS+GA_3+3.0mg·L~(-1)6-BA+0.3g·L~(-1)CH+0.1mg·L~(-1)NAA+1.0g·L~(-1)PVP,适宜浓度的CH可显著提高丛生芽的增殖系数,也可以使丛生芽苗更健壮。丛生芽初步诱导过程中,子叶节的诱导效果及生长状态优于种胚直接诱导,但种胚具有更高的萌发潜质。种胚丛生芽的增殖效果优于子叶节丛生芽。     

灵宝大枣无菌外植体的建立及茎段不定芽的诱导

为建立灵宝大枣的快速繁殖体系,以灵宝大枣枣头一次枝上萌发的嫩枝为外植体,对外植体的消毒、茎尖的生长和茎段不定芽的诱导进行了研究。结果表明:灵宝大枣外植体采用乙醇和升汞结合的常规消毒方法较好,污染率较低;适宜茎尖生长的培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+AC0.3%+蔗糖3%+琼脂粉7.0g·L-1,培养基MS+TDZ0.5 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1和MS+6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+AC0.3%适宜枣茎段不定芽诱导,活性炭可以明显减轻褐变,TDZ诱导茎段不定芽的能力明显高于6-BA。     

大豆子叶节高效再生系统的研究

为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株.实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素.结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90％,丛生芽数基本都在4～6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型.最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+ 6-BA 1.6 mg/L+ IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5 +6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.2 mg/L;4个大豆品种的适宜丛生芽伸长培养基为1/2 MS+B5有机+GA3 0.5 mg/L;生根培养基为B5 +NAA0.5 mg/L+ 2.0 g/L活性炭.     

太子参子叶愈伤组织的诱导及分化

为提高太子参的扩繁效率,以太子参子叶为外植体,研究不同激素配比对愈伤组织形成的影响。结果表明:太子参子叶诱导的最佳培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,诱导率为96.0%,可获得淡黄色、疏松的愈伤组织;丛生芽诱导培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA+0.5mg·L~(-1) TDZ+3.0μg·mL~(-1) AgNO3;生根培养基为MS+2.0mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA。     

海棠花离体繁殖技术研究

以海棠花组培苗和叶片为材料,应用正交试验法,以MS培养基为基础,分别加入不同浓度配比的6-BA/IBA组合和TDZ/IBA组合作为增殖培养基和叶盘不定芽再生培养基,研究了不同植物激素及其配比对组培苗增殖、叶片不定芽再生的影响。结果表明:在添加6-BA 1.0mg.L-1+IBA 0.1mg.L-1的MS培养基上最适宜海棠花组培苗的增殖及生长,增殖倍数高达8.11,海棠花组培苗平均高度达2.14cm;在添加TDZ 1.0mg.L-1+IBA 0.5mg.L-1的MS培养基上叶再生效率最高,再生效率为100%,每叶平均再生芽数为6.73。     

TDZ和6-BA对芜菁离体再生过程中内源激素水平的不同影响(英文)

为研究外源TDZ和6-BA对芜菁离体再生过程中内源激素的影响来阐明TDZ在促进芜菁离体再生方面比6-BA更为有效的原因,采用不同浓度的TDZ和6-BA分别配合不同浓度NAA诱导芜菁带柄子叶离体再生.结果表明:适合芜菁带柄子叶离体再生的外源激素浓度组合分别是TDZ 4·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1和6-BA5·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1;在这2种组合诱导下的不定芽再生率分别是80·4 %和30·2 %.分别测定在这2种外源激素组合诱导下带柄子叶外植体内源生长素(IAA)、玉米素(Z)、赤霉素(GAs)和脱落酸( ABA)的绝对含量,并计算IAA/ABA和IAA/Z之间的相对含量.结果表明:TDZ 4·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1的激素组合诱导带柄子叶外植体产生内源IAA和Z的水平峰值显著高于6-BA5·0 mg·L-1+ NAA1·0 mg·L-1的激素组合;而在2种外源激素组合诱导条件下,内源GAs和ABA的含量差异不显著;IAA的绝对含量左右了IAA/ABA和IAA/Z的变化趋势.综合内源激素的绝对含量和相对含量,TDZ比6-BA更好地诱导芜菁分化效果的关键因素是由于TDZ诱导外植体产生了更高水平的IAA含量和IAA/ABA比值.TDZ和6-BA诱导产生不同水平的内源Z和IAA/Z的作用还不明确.     

Effect of 6-BA and 2, 4-D on Soybean Transformation

Regeneration from cotyledonary nodes and embryonic tips of soybean "Peking" was studied. The disinfectant ways of the mercuric chloride and chlorine gas were used and the concentrations of 6-BA and 2, 4-D were studied in the culture medium. The results showed that the sterilization effect of chlorine gas was better than that of mercuric chloride. The best concentration of 6-BA was 1.0 mg · L-1 and the best concentration of 2, 4-D was 2.0 mg · L-1 in the germinating medium. The number of buds of each explant was 3.56 and 2.98, respectively. The best concentrations of 6-BA and 2, 4-D were 3.0 mg·L-1 and 3.5 mg·L-1 in regeneration of embryonic tips. The best inducing time was 16-20 h and the mean shoots per explant was 2.69 and 2.78, respectively.     

梨矮化砧优系'青砧D1'叶片离体培养再生体系的建立

"青砧D1"是青岛农业大学选育的一个梨矮化砧优系.本试验研究了不同浓度的TDZ、6-BA、IBA及IAA配比对"青砧D1"叶片离体再生培养的影响,从而为该砧木的快速繁殖和应用推广奠定基础.结果表明:MS培养基中附加适宜浓度和配比的6-BA与IBA能提高初代培养外植体的成活率,以6-BA 1.0 mg·L-1与IBA 0.1 mg·L-1浓度配比的外植体成活率最高,达86.3%.NN69培养基中附加不同浓度的TDZ与IBA或IAA能有效地诱导叶片外植体不定芽再生,以TDZ和IBA配合诱导产生不定芽的外植体比例高,在TDZ 4.0 mg·L-1与IBA 0.3 mg·L-1配比组合下可达到100%,但平均外植体再生芽数为3个,低于TDZ与IAA配比组合(3.9个/外植体).在所试的不同浓度TDZ与IAA配比组合中,外植体不定芽诱导率最高仅为68%.MS培养基中附加6-BA 1.0 mg·L-1和IBA 0.2 mg·L-1时芽增殖系数最高,达4.42.在1/2 MS培养基中附加IBA 0.3 mg·L-1时生根率最高,达87.3%,移栽成活率达95%.     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

Experiment on Tissue Culture Technique of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk

The study aimed to optimize the induction and differentiation medium by exploreing different tissue culture of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk. In tissue culture with the root, stem segments, young leaf, cotyledonary node and axillary bud of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk as explants, a lot of plantleles were obtained and the corresponding plant regeneration-system was established. The results showed that when use MS＋1.0 mg·L^-1 6-BA＋0.2 mg·L^-1 NAA as callus induction medium, the cotyledonary node had the highest bourgeon rate, and its callus was better than any others; MS＋2 mg·L^-1 6-BA＋0.4 mg·L^-1 NAA was the best adventitious buds induction medium, and the best adventitious buds induced condition was 3% sucrose as carbon source, illumination for 12-14 h·d^-1 and pH 5.8, The best rootage medium was 1/2 MS＋0.5 mg·L^-1 NAA.     

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）,萘乙酸（NAA）,激动素（KT）和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲（TDZ）对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基（WPM培养基）。在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-1 TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

Somatic Embryogenesis in Lily Bulb Scale Cultures

Abstract： Somatic embryogenesis from lily bulb scales has not been studied in details, although tissue culture methods have been applied to the propagation for decades. The effects of different kinds and concentration of auxins for oriental lily somatic embryogenesis were investigated （Lilium hybrida var. Sorbonne）. 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid （2, 4-D）, thidiazuron （TDZ） and α-naphthaleneacetic acid （NAA） media with benzyladenine（6-BA） and lactalbumin hydrolysate （LH） were used for embryogenic callus in the darkness. The best response on embryogenic callus formation was obtained on MS media supplemented 2, 4-D 2.0 mg·L^-1, 6-BA 0.5 mg·L^-1 and LH 300 mg·L^-1. Transfer embryogenic callus to the media with TDZ, 6-BA, kinetin （KT） supplemented 2, 4-D. The highest number of somatic embryos has been produced on medium with 0.5 mg·L^-1 2, 4-D and 0.3 mg·L^-1 KT. Germinated embryos with shoot axes were changed to MS media with 6-BA 0.5 mg·L^-1. The results suggest that in vitro culture of somatic embryogenesis from lily bulb scales can be used for plant regeneration.