苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂研制及杀虫毒力测定

以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助 剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混 配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3:1,润 湿分散剂为1%Morwet EFW、3% SDS、9% Morwet D425、9% TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3% 黄原胶,以凹凸 棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%, 润湿时间1 min, 平均粒度为13.76 m。苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂中各指标符合商品制剂的标准,对黄褐天幕毛虫毒力分别 高于苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂单剂,是一种具有高杀虫活性、持效期长、环境友好型绿色农药。      

绿色木霉L24菌株分生孢子可湿性粉剂的研制

以绿色木霉L24菌株分生孢子(孢子数量为4.03×1011个/g)为有效成分,利用正交设计筛选木霉分生孢子可湿性粉剂配方,并对其生物活性进行田间验证。通过助剂种类和含量的筛选,得到30%木霉分生孢子可湿性粉剂,其组成成分及各自质量分数为:木霉分生孢子粉30%、萘磺酸钠甲醛缩合物7%、十二烷基硫酸钠3%、木质素磺酸钠5%、拉开粉2%、硅藻土53%。植物生长试验表明,该制剂800倍稀释液对2种白菜品种有很好的促生作用;田间药效试验表明,绿色木霉L24菌株制剂对玉米纹枯病和玉米褐斑病有较好的防治效果,300倍稀释液防治效果分别为52.88%和56.28%。     

棘孢木霉F_2菌株对三七灰霉病的生物防治作用

为考察生防菌棘孢木霉F_2菌株对三七灰霉病的防治效果,采用平板对峙法测定棘孢木霉F_2菌株对三七灰霉病病菌等6种药用植物病原菌的抑制作用;研究棘孢木霉F_2菌株无菌发酵液对三七灰霉病病菌菌丝生长及孢子萌发的影响;并通过盆栽试验测定棘孢木霉F_2菌株发酵液对三七灰霉病的防治效果。结果表明,棘孢木霉F_2菌株菌丝体可以通过空间竞争对病原菌进行抑制,对供试病原菌的抑制率均 90%,对三七灰霉病病菌的抑制率达100%;棘孢木霉F_2菌株发酵液稀释5倍对菌丝的生长抑制率为92. 6%、对孢子萌发的抑制率为82. 6%、对离体感病叶片的防治效果为74. 0%;病害发生前使用棘孢木霉F_2菌株发酵液进行预防,接种病原菌7、15 d后的相对防效分别为83. 4%、81. 7%;病害发生后使用F_2菌株发酵液进行防治,相对防效为52. 6%。试验结果表明,棘孢木霉F_2菌株及其发酵液对三七灰霉病病菌均有较强的抑制作用,具有开发为生物农药的潜力。     

10％粉红粘帚菌可湿性粉剂的研制

[目的]为获得符合国家化学农药标准的粉红粘帚菌分生孢子可湿性粉剂。[方法]选择常用助剂和粉红粘帚菌分生孢子进行生物相容性检测,初步筛选出影响较小或者没有影响的助剂,筛选出的助剂,进行粉红粘帚菌可湿性粉剂的研制。[结果]最终确定10％可湿性粉剂的配方为：粉红粘帚菌的分生孢子粉10％,润湿分散剂EFW1％、K122％、D4257％、NNO7％,紫外保护剂黄原胶0．3％,载体凹凸棒土补足100％。[结论]检测结果表明粉红粘帚菌分生孢子可湿性粉剂的润湿时间为18s,质量悬浮率75．87％,孢子悬浮率72．05％,pH5．9,含水量1．92％,98．34％可通过200目筛,符合国家化学农药可湿性粉剂的标准,为粉红粘帚菌可湿性粉剂的开发提供理论基础。     

球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂配方的筛选

[目的]确定球孢白僵菌分生孢子可湿性粉剂的最佳配方。[方法]以高效杀蚜球孢白僵菌Bb2860菌株纯孢粉(含孢量为1.20×1011个/g)为研究对象,通过逐一筛选法确定载体、润湿剂、分散剂和紫外保护剂的种类和用量,并按国家标准进行制剂质量指标测定。[结果]可湿性粉剂配方为球孢白僵菌分生孢子粉10.0%,分散剂MorwetD-425 1.0%,润湿剂MF-5 3.0%,紫外保护剂抗坏血酸0.3%,填料硅藻土85.7%。指标测定结果为活孢率94.44%,润湿时间89.2 s,有效成分悬浮率95.11%,含水量1.50%,98.50%通过200目标准筛,pH 6.8。[结论]该配方制剂各项指标均符合国家标准,为蚜虫生物防治产品的开发奠定了基础。     

2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制

[目的]探究绿色木霉(Trichoderma viride)和棘孢木霉(T.asperellum)对8种植物病原菌的抑制效果及其促植物生长机制,为木霉防治植物病害和促进植物生长等的田间应用提供理论参考.[方法]采用平板对峙法和固体稀释法,检测2株木霉及其活性代谢产物对8种植物病原菌(棉花枯萎病菌、茄子菌核病菌、番茄链格孢病菌、茄腐镰刀病菌、尖孢镰刀病菌、枸杞炭疽病菌、番茄灰霉病菌和番茄匍柄霉病菌)的抑制率;采用平板透明圈法、Salkowski比色法及钼锑抗比色法测定2株木霉的生防因子、生长素及溶磷效果;通过辣椒盆栽试验,测定2株木霉发酵液不同稀释倍数处理对辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶[过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)]活性的影响.[结果]平板对峙试验结果显示,2株木霉对8种植物病原菌的抑菌率均在60.00%以上;绿色木霉发酵11 d时其无菌滤液对茄子菌核病菌的抑制率达96.78%,但对其他病原菌的抑制率不高;棘孢木霉发酵11 d时无菌滤液对茄子菌核病菌、枸杞炭疽病菌和番茄链格孢病菌的抑制效果较好,抑菌率分别为99.08%、85.33%和68.65%,发酵9 d时无菌滤液对番茄灰霉病菌的抑制率为72.08%;2株木霉均可产生蛋白酶、几丁质酶、纤维素酶和铁载体4种生防因子;绿色木霉发酵9 d时分泌吲哚乙酸(IAA)量为3.389 mg/L,在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量为67.236μg/mL;棘孢木霉发酵11 d时分泌IAA量达11.638 mg/L,在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量达151.905μg/mL;盆栽试验结果表明,喷施不同稀释倍数的棘孢木霉发酵液较绿色木霉发酵液更能提高辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶活性.[结论]供试2株木霉对8种植物病原菌均具有抑制能力并存在多种生防因子和促植物生长能力,其中棘孢木霉较绿色木霉具有更好的抑菌和促进植物生长及提高植物叶片叶绿素含量和抗性酶活性的能力,具有较好的田间应用潜力.     

植物内生木霉的鉴定及其抑菌活性

对分离自健康植物的6种内生木霉菌进行活化,再观察菌落形态、颜色,测量生长速度,观察孢子形态,测量孢子直径范围,进而对供试菌株进行分类鉴定。结果初步鉴定,DBs0-13为多孢木霉(Trichoderma polysporum),DBs57为里氏木霉(T.reesei),DBs66为长孢木霉(T.longipile),40为绿色木霉(T.viride),171为康氏木霉(T.koningii),292为哈茨木霉(T.harizianum)。采用生长速率法测定供试真菌发酵液(相当于稀释10倍)对4种病原真菌的抑制效果。结果表明,6木霉菌对小麦赤霉菌、苹果轮纹菌、油菜菌核菌和可可球二孢菌都有不同程度的抑制作用,其中DBs0-13和171的抑菌率相对较高,并对4种病原真菌都具有抑制作用;6种木霉菌中抑菌率最高的是DBs0-13,其对油菜菌核病菌、可可球二孢的抑制率分别为62.89%、41.12%。     

生防菌芽孢杆菌可湿性粉剂的研制及其对油菜菌核病和黑胫病防效评价

将健康油菜植株中分离到的贝莱斯芽孢杆菌菌株CanL-30,分别在10 L发酵罐以及1 t和10 t发酵罐发酵,观察其发酵过程中菌体增长及芽孢发育动态,并制备成可湿性粉剂,研究该可湿性粉剂的抗真菌活性及防病增产效果。结果显示:菌株CanL-30在3种发酵罐中发酵时均可产生芽孢,在1 t和10 t发酵罐中发酵36 h后,芽孢形成率达到93%,活菌量分别达到1×10~(10)和3.3×10~9 cfu/mL。采用喷雾干燥的方法制备CanL-30菌粉,添加助剂后制备成可湿性粉剂(每克粉剂活菌数量达到1 000亿,54℃粉剂的热贮稳定性、悬浮性和湿润性等指标均符合农药可湿性粉剂国家标准)。在培养基上的活性测试结果显示:可湿性粉剂对油菜菌核病菌菌丝生长及菌核形成,以及对油菜黑胫病菌分生孢子萌发均有抑制作用。室内防病试验结果显示:可湿性粉剂能有效抑制油菜菌核病菌和黑胫病菌的侵染。田间防病试验结果显示:在蕾薹期和花期喷施可湿性粉剂防治油菜菌核病和黑胫病的效果分别为55%和42%,与杀菌剂咪鲜胺的防效(对菌核病和黑胫病的防效分别为51%和37%)没有显著差异,与自来水对照处理相比,在天门市和赤壁市试验点使用CanL-30可湿性粉剂导致油菜籽产量分别增加14%和12%。以上结果表明,芽孢杆菌CanL-30可湿性粉剂对油菜菌核病和黑胫病都有一定的防效,并可提高油菜籽产量。     

防治兰花根腐病的药剂筛选及复配研究

采用室内菌丝生长速率抑制法测定了7种杀菌剂对兰花根腐病菌的室内抑菌毒力,并在此基础上进行了药剂混配增效筛选实验。结果表明:250g/L吡唑醚菌酯乳油和50%嘧菌环胺可湿性粉剂对兰花根腐病菌的EC_(50)分别为9.87mg/L和14.28mg/L。二元混配增效药剂筛选结果显示:250g/L吡唑醚菌酯乳油和50%嘧菌环胺可湿性粉剂按照2∶1体积比混配,对供试病菌的室内抑菌增效作用明显,为最佳增效配比。     

5亿活孢子/克木霉菌可湿性粉剂的研制

通过木霉菌（Trichoderma spp．）可湿性粉剂配方研究,确定配方为：润湿剂B54％,分散剂C46％,保护剂UV-10．3％,稳定剂E 0．2％,载体A1补足100％。质量检测结果表明产品中孢子萌发率75％以上,悬浮率75％以上,润湿时间〈1min,产品各项指标符合可湿性粉剂的要求。田间药效试验结果表明,5亿活孢子／克木霉菌可湿性粉剂800—1000倍液防治田间番茄灰霉病（Botrytis cinerea Pets）的防治效果与50％腐霉利WP1200倍液和20％百·霉威WP1300倍液防效相当。     

Preparation of dry flowable formulations of Clonostachys rosea by spray drying and application for Sclerotinia sclerotiorum control

A dry flowable formulation of Clonostachys rosea with fungicidal activity against Sclerotinia sclerotiorum was prepared by spray drying. The formulation was optimized by a four-factor, three-level orthogonal experiment to screen inert ingredients and spray-drying conditions. The optimal dry flowable formulation of C. rosea included 30% C. rosea (ratio of conidia powder and its fermentation broth is 1:3), 3% Morwet EFW, 4% K12, 10% Morwet D425, 9% sodium salt of polynaphthalene sulphonic acid (NNO), 5% croscarmellose sodium, 5% (NH₄)₂SO₄, 0.5% carboxymethyl cellulose sodium (CMC-Na), 1% oxalic acid and palygorskite (carrier) up to 100%. The formulation exhibited good physical characteristics, such as high dispersibility, viability and a long shelf life. Plate antagonism tests and pot trials indicated that the dry flowable formulation was very effective against S. sclerotiorum, with control efficiency of up to 88.30%. This dry flowable formulation of C. rosea is a new potential commercial fungicide for spray drying to control S. sclerotiorum.     

内生枯草芽孢杆菌B215对香蕉弯孢霉叶斑病抑制作用初探

通过香蕉内生枯草芽孢杆菌菌株B215对峙培养及其菌体代谢物的活性测定结果表明,B215菌株对香蕉弯孢霉叶斑病原真菌具有很强的拈抗作用,其对峙培养能明显抑制靶标菌菌丝向四周均匀扩展,抑菌带宽度为0.4 cm;菌株滤液的EC50值达5.10%,主要是以代谢产物中的抗菌物质造成孢子和菌丝膨大成球状畸形,原生质外泄,孢子崩溃干瘪,致使病菌丧失侵染和繁殖能力.     

内生枯草芽孢杆菌B215对香蕉弯孢霉叶斑病抑制作用初探

采用对峙培养法和孢子悬滴法研究内生枯草芽孢杆菌菌株B215对香蕉弯孢霉叶斑病菌的控制作用,试验结果显示,菌株B215明显抑制香蕉弯孢霉叶斑病菌菌丝向四周均匀扩展,抑菌带宽度0.4cm,菌株滤液的EC50值为5.10%,表明内生枯草芽孢杆菌B215对香蕉弯孢霉叶斑病病原真菌具有很强的拮抗作用;而对菌株B215的抑菌谱测定结果显示,B215有广泛的抑菌谱,可产生广谱抗菌物质,生产中有望利用该菌株研制成生防制剂用于香蕉重要病害的防治。     

吡虫啉与三唑酮对小麦种子萌发的影响

探明吡虫啉及三唑酮作为小麦种衣剂的合适用量,为小麦安全生产提供参考。以70、11、06156、周麦18和11穗136小麦品种(系)为材料,采用室内培养皿发芽试验研究不同浓度50%吡虫啉可湿性粉剂和25%三唑酮可湿性粉剂对小麦种子萌发的影响。结果表明:不同浓度50%吡虫啉可湿性粉剂和25%三唑酮可湿性粉剂对5个小麦品种(系)的发芽率、发芽势和发芽指数均存在不同程度影响。当50%吡虫啉可湿性粉剂和25%三唑酮可湿性粉剂的浓度分别为125.0mg/L和75.0mg/L时,5个小麦品种(系)的发芽率、发芽势和发芽指数均达最高,并对其种子萌发有明显促进作用,还可有效隔离病虫害,保证种子正常安全发芽,超过此浓度则小麦种子的发芽率、发芽势和发芽指数降低。     

石斛象甲蜡蚧轮枝菌生物学特性·毒力及其可湿性粉剂的研究

[目的]探讨石斛象甲蜡蚧轮枝菌的生物学特性及其毒力。[方法]以从石斛象甲上分离出的蜡蚧轮枝菌为研究对象,研究温度对该菌菌落生长和菌落产孢量的影响以及该菌对烟蚜的毒力及其可湿性粉剂对烟蚜的毒力。[结果]该菌菌丝生长和产孢的最适温度为30℃。该菌株对烟蚜有较高的毒力,随着浓度升高,杀虫效果明显增强,120h菌株的致死中浓度降到最低,为3．27×10^5孢子／ml。用固体培养法制成的粉剂悬浮率为74．65％,润湿时间为3．08min,在28℃培养48h可湿性粉剂的萌发率可达到85．8％。室内毒力测定表明该制剂对烟蚜具有较高的毒力。[结论]该研究为进一步开发利用石斛象甲蜡蚧轮枝菌防治害虫提供了依据。     

棘孢木霉产厚垣孢子的液体发酵条件研究

对棘孢木霉Trichoderma asperellum ZJSX5003菌株产生厚垣孢子的液体发酵培养基和条件进行了研究。结果表明,适合此菌株产厚垣孢子的最佳培养基为：高温黄豆饼粉-玉米粉培养液,甘油0.005mL/mL最佳条件为：接种量0.8×10^5个/mL,装瓶量50mL/250mL,转速150r/min,温度：30℃2d,20℃2d,28℃4d;初始pH3.0。此单因子优化的配方及发酵条件可使厚垣孢子的发酵产量达到5.82×10^7个/mL。     

环境因子对荔蝽菌分生孢子萌发及菌落生长的影响

研究了营养、ｐＨ值、温度及湿度条件对荔蝽菌分生孢子萌发及菌落生长的影响．结果表明：１×１０－２（质量分数，下同）的蛋白胨最有利于孢子萌发和菌落生长．在１×１０－２的蛋白胨溶液中，孢子萌发率（Ｙ）与时间（Ｔ）的回归方程为Ｙ＝－４２．５１２＋７．０６６５Ｔ．在ＰＤＡ＋１×１０－２蛋白胨培养基２５℃条件下，菌落直径（Ｙ＇）和时间（Ｔ）的回归方程为Ｙ＇＝－０．０９８＋０．３４１３Ｔ，ｐＨ６．４７最有利于孢子萌发，ｐＨ６．０最适于菌落快速生长，其回归方程分别为Ｙ＝－２．７５＋５．１Ｔ（ｐＨ＝６．４７）和Ｙ＇＝０．１９４３＋０．３４９７Ｔ．温度在２０－３０℃时，较适合于孢子萌发和菌落生长，其中以２５℃为最好．只有在ＲＨ为１００％的条件下，孢子才能大量萌发．