冬小麦抗旱种质资源遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD技术对42份冬小麦抗旱种质资源进行了遗传多样性的研究.从100个引物中筛选出了22个有效引物,共扩增出221条DNA带.应用SPSS10.0分析软件对供试材料间RAPD标记欧氏遗传距离,并按Av-erage Linkage法进行了聚类分析.结果显示:42份材料可明显分为6类,第Ⅰ类有32份材料,其中国内材料21份、国外材料11份,分为A、B 2个亚类6个组;其余10份国外材料分属5个类,R2独立构成第Ⅲ类,并最后与其他各类合并,R2与各材料的遗传差异性最大.     

应用RAPD分析小豆种质资源遗传多样性及遗传演化趋势

 用RAPD标记方法对来自中国、日本、韩国、不丹、尼泊尔、越南6国163份小豆种质资源DNA的遗传多样性进行检测。从27个引物共检测到285条带，有261条具多态性（占92.98%），其中野生型多态性带谱占85.82%，栽培型次之为83.52%，半野生型为80.46%，三类型小豆都有其自身特征带；遗传离散度大小顺序是：野生型＞半野生型＞栽培型，其遗传分化系数大小顺序为：野生型＜半野生型＜栽培型；从分化系数差异看，半野生型小豆更接近野生型小豆；从相似系数平均值来看，半野生型小豆材料之间亲缘关系较近，而处在进化两极的野生型材料之间、栽培型材料之间亲缘关系都较远；来自我国西南以及日本南部两地区的小豆材料遗传离散度较大，遗传分化系数、相似系数平均值较低。聚类分析结果表明，163个小豆材料以遗传相似系数0.32为截值，可分为8大类，归类有较明显的地理相关性及遗传类型的趋同性。     

利用RAPD标记分析青麻种质资源的遗传多样性

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术对来自全国各地的48份青麻种质资源的遗传多样性进行了检测.结果表明,青麻具有丰富的遗传多样性,在48份青麻种质资源中.17条RAPD引物扩增出191条带,多态性条带比率(PPB)为87.43%,扩增产物片段大小在0.I-3.0kb之间.     

18份大蒜种质资源遗传多样性的RAPD分析

应用RAPD标记对大蒜18个品种的遗传多样性和亲缘关系进行分析。从38个随机引物中筛选出6个多态性明显、反应稳定的引物,共扩增出36条谱带,其中多态性谱带27条。根据36个标记位点的信息,利用POPGENE32软件计算相关参数。结果表明,在物种水平上,多态性位点百分率P=75%,平均每个位点有效等位基因数Ne=1.4964,Nei s基因多样性指数H=0.2819,Shannon s多样性信息指数I=0.4158。根据Nei s遗传距离进行各类型间的UPGMA聚类分析,聚类结果将18个品种分为2大类群,成都二水早与其它地区大蒜种质资源有较大差别。     

不结球白菜种质资源遗传多样性RAPD分析

为挖掘不结球白菜种质资源的遗传潜力以及为不结球白菜的起源和演化提供分子证据,用RAPD分子标记对国内外64份不结球白菜种质资源的DNA遗传多样性进行了分析。结果表明：23个引物共检测出147个位点,其中71个为多态性位点,多态性位点比例达48．30％,平均每个引物产生6．39个位点和3．09个多态性位点。不结球白菜各类型中以普通白菜的Nei’s基因多样性和Shannon信息指数为最高,分别为0．1269和0．1946;各生态区域中以江淮流域不结球白菜的Nei’s基因多样性和Shannon信息指数为最高,分别为0．1237和0．1888;中国不结球白菜的这2项指数高于国外材料。不结球白菜的遗传分化系数为59．05％,说明大部分变异主要存在于种群间;基因流为0．4995,说明群体间基因流动较少。     

云南特有茶树种质资源遗传多样性的RAPD研究

运用RAPD技术对云南主产茶区具有代表性的野生型古茶树、过渡型古茶树、栽培型品种、野生种、地方品种及其近缘植物———金花茶等48份材料进行遗传多样性分析,从核基因组DNA的角度深入探讨了云南特有茶树种质资源的分类及其亲缘关系。用已筛选出的12个引物对48份供试材料进行RAPD扩增反应后,共检测到112条扩增片段,所有片段均为多态,其多态性程度高达100%.材料间的遗传距离为0 116～0 527,平均为0 202.对48份供试材料间的亲缘关系进行UPGMA聚类分析,研究结果表明:当以欧氏距离为6 0来划分时,可分为5个组,其中3个复合组,2个独立组,基本上与传统分类水平相吻合。     

应用RAPD标记检测淮山种质资源的遗传多样性

采用RAPD标记对7份德化淮山种质进行遗传多态性和遗传距离分析,并构建聚类图。从63个RAPD引物中筛出31个多态性较好的组合,扩增得到了156个多态性标记。结果表明,7份淮山种质依据遗传距离可分为2类,组间的遗传距离为0.32,其中,大铭薯、泉淮1513和泉淮1547的亲缘关系较近,组内的平均遗传距离为0.21,另一类组内的平均遗传距离为0.44。对照田间表型可见,聚类结果相近于传统分类结果。利用RAPD标记能有效地分析淮山的遗传多样性,对杂交优势的利用具有较大的指导意义。     

贵州省玉米地方种质资源遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD分子标记技术对贵州省22份玉米地方种质资源材料进行遗传多样性分析。结果表明，从90个引物中共筛选出18个能够稳定扩增的多态性引物，共产生123条多态性带，平均每个引物6．83条，聚类分析表明，以相似系数0．670为标准，22份贵州省玉米地方种质可以划分为四大类群。其中以赫498-1为代表的第四大类群中的自交系，与其它3个类群中的自交系间遗传基础较远，可能会形成具有较大潜力的杂种优势模式。用RAPD分子标记揭示的贵州省玉米地方种质具有较为广泛的遗传基础。     

100份亚麻种质资源遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析

利用8个核心引物对100份亚麻种质资源的遗传多样性进行RAPD分析,共扩增出54条带,其中38条多态性带,多态率为70.4%。100个品种间的遗传相似性系数变异范围为0.62~0.96。用UPGMA法建立了100个亚麻品种的亲缘关系树状图。在聚类树状图中,当遗传相似性系数约为0.70时,这100份亚麻资源可分为7个类群。     

葡萄种质资源的RAPD分析

对15个葡萄品种进行RAPD分析。从60条随机引物中筛选出10个多态性引物用于DNA扩增,共扩出71条DNA带,其中多态性DNA带47条,占总数的66.2%。通过聚类分析,分成4大类,美洲葡萄类群康可、奇妙无核自成一类,与欧亚种、欧美杂种分开;其中森田尼无核、无核白遗传关系近,最先聚在一起。该结果显示,欧亚类群遗传差异较大,具有丰富的遗传多样性,证明RAPD技术能在DNA分子水平上揭示葡萄遗传背景及亲缘关系。     

利用 RAPD 分析辐射所得水蜡幼苗的遗传多样性

[目的]探讨辐射所得到的水蜡幼苗的遗传多样性。[方法]采用RAPD分子标记技术对不同梯度辐射所得的水蜡突变体的亲缘关系进行分析以确定所得到的水蜡突变体之间的遗传差异。[结果]18条RAPD引物能在5种水蜡间扩增出126条带,其中108条是多态条带,多态率高达85.7%,表现出了较高的多态性。从聚类树状图中可以看出,5种植株间的相似系数在0.500～0.800,平均相似系数为0.65,对照植株和辐射植株有一定的差异性。随着辐射剂量的增大,辐照样品与对照样品的遗传距离增大,相似系数减小,相应的变异系数增大。[结论]该研究为水蜡育种研究提供了分子生物学依据。     

大叶女贞不同家系及单株冻害分析

[目的]为了筛选出大叶女贞优良抗寒品系.[方法]利用石家庄地区选出的优树繁殖成22个半同胞家系,对不同家系及家系内不同单株二年生苗木自然条件下越冬后抽梢率进行了观测.[结果]不同家系间抗寒性的差异达到显著水平,最优良家系的平均抽梢率为31.9％;家系内不同个体间抗寒性的差异亦达到显著水平;在二年生实生苗群体内,植株的抗寒性与其树高、米径生长量不存在相关性.[结论]该研究为进一步选育出大叶女贞优良抗寒单株及品系奠定了基础.     

石家庄市大叶女贞冬季冻害分析

对石家庄市不同树龄、不同栽植环境及栽植方式的大叶女贞冬季受冻情况进行了调查.结果表明：不同树龄之间的大叶女贞冬季受冻程度存在显著差异,随着树龄的增加,其抗寒性显著增强.市内建筑物形成的小环境对大叶女贞的受冻情况存在显著影响,庭院栽植、市内行道树栽植、近郊栽植及郊外栽植的大叶女贞受冻情况逐渐加重,其差异达到显著水平.同是市内栽植,路北的行道树由于北面有建筑物的遮挡,受冻程度较轻;路南的行道树,由于其北面为空旷的道路,受冻程度较重;路东及路西的行道树,受冻程度介于路南及路北之间.单排栽植及多排块状栽植的行道树,平均叶片受冻率的差异达到显著水平,平均叶片宿存率及平均枝条抽梢率差异不显著.     

女贞不同种质材料基因组 DNA 的提取及 RAPD 引物筛选

[目的]提取女贞不同种质材料的基因组DNA,并筛选RAPD引物。[方法]采用改良CTAB法提取女贞基因组DNA,并以此种方法提取的女贞基因组DNA为模板,对RAPD引物进行PCR扩增,筛选有效引物。[结果]筛选出21个多态性丰富、条带清晰且重复性好的有效引物,经检测所获得的基因组DNA条带清晰,且OD260／DD280在1．8左右。用筛选出的21个有效引物对126份女贞种质材料进行RAPD—PCR扩增,均可获得带型丰富且清晰可辨的DNA指纹图谱。[结论]该方法为快速和准确地应用RAPD方法分析女贞种质材料的遗传多样性提供了依据。     

女贞果实过氧化物酶的纯化及热稳定性研究

为探讨过氧化物酶在女贞果实发育中的作用,经过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100、DEAE-纤维素离子交换层析分离,从女贞果实中分离提纯过氧化物酶(POD),纯化倍数为48倍,回收率为13.3%。该酶的比活力为1 167.15 U/mg蛋白,最适pH为6.5,对H2O2的Km值为3.85 mmol/L,对愈创木酚的Km值为6.2 mmol/L,最适温度为40℃,热稳定性较好,55℃以下不易失活。其活性受到MnSO4明显抑制。     

女贞子总黄酮的测定及其提取工艺

采用正交试验,研究了水提醇沉法和醇提法提取女贞子总黄酮的提取工艺。结果表明,女贞子总黄酮提取以水提醇沉法为宜,最佳提取工艺条件为:料液比1∶40,提取1次,100℃下提取3 h。     

女贞子中齐墩果酸的提取与鉴定

研究女贞子所含主要化学成分的类型及结构。用φ=95%乙醇回流提取2次,每次1 h,减压回收乙醇后以水洗涤得沉降物。用"YCXY-2号"除杂剂处理后,加活性炭脱色30 min,经凝析分离、纯化精制得产品。采用理化常数测定和薄层色谱、红外光谱、质谱及核磁共振光谱鉴定其化学结构。实验所得产品确证为齐墩果酸,其纯度达99.63%。齐墩果酸为女贞子的主要化学成分。本实验方法简单易行,合理实用,产品纯度高,安全性好,为工业生产提供了技术参考。     

外源ABA对女贞光合及蒸腾速率的影响

对女贞叶片喷施脱落酸(ABA)后的几项生理指标变化的研究结果表明,质量浓度为0 05g·L-1的处理效果最佳,叶片气孔导度和蒸腾速率分别比对照降低了49 5%和35 1%;对光合作用和叶片温度的影响不明显;对女贞的叶水势的提高幅度达到18 3%;具有明显抑制女贞苗木叶水势下降的作用.     

女贞RAPD-PCR实验条件的优化

采用单因素梯度试验对影响女贞(Ligustrum lucidum Ait.)RAPD扩增的若干重要影响因素(包括Mg Cl2、d NTPs、随机引物、Taq DNA聚合酶浓度、模板DNA用量,以及退火温度与循环次数等)进行了优化。优化后的女贞RAPD-PCR反应体系为:每25μL体积中含10×反应buffer 2.5μL,2.5 mmol·L-1Mg Cl23.0μL,0.2 mmol·L-1d NTPs 0.5μL,2.0 U Taq酶0.4μL,0.4μmol·L-1引物1.0μL,DNA模板60 ng。PCR扩增程序:在94℃条件下预变性4 min,然后依次在94℃条件下变性30 s,38℃条件下退火45 s,72℃条件下延伸2 min;进行40个循环,最后在72℃条件下延伸10 min,并于16℃条件下保存。以该优化的RAPD反应体系对木犀科女贞属植物不同居群间的女贞种质材料的扩增,均能获得丰富而清晰的条带,且重现性好。     

女贞ISSR-PCR反应体系的建立与优化

利用单因子试验,测试了女贞ISSR-PCR反应体系中的主要影响因子。经过优化实验,建立了一套适合于女贞的稳定的ISSR-PCR反应体系:10×buffer2.5μL,2.0mmol·L-1的MgCl2,200μmol·L-1的dNTPs,1.5U的Taq酶,0.4的μmol·L-1的引物,10ng的DNA模板。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性40s,52～62℃退火45s,72℃延伸120s,进行35个循环,72℃延伸8min,4℃保存。应用该优化的ISSR-PCR实验体系对12份女贞种质材料进行了扩增,均能扩增出丰富稳定的条带。