玉米花药培养影响因素的研究

[目的]研究玉米花药培养的影响因素。[方法]以5种基因型玉米为例,研究了基因型、培养基种类以及激素配比对花药诱导过程中形态变化及出愈率的影响。[结果]与YP、MS和玉培相比,N6培养基在花药培养中褐化率、膨大率和死亡率较低;先玉335花药诱导出愈率最高,为23.15%;2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT激素配比的效果最佳。[结论]该试验为玉米花药单倍体育种奠定了理论基础。     

‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

越橘花药愈伤组织诱导的影响因子

以越橘品种"北卫"为试验材料,研究了激素、材料采集时间、花冠状态、光照、培养基pH对愈伤组织诱导的影响.结果表明:花药愈伤组织诱导适宜用WPM+BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L固体培养基;盛花期取花冠长宽比为2:1花蕾的花药为最佳培养材料;黑暗条件有助于越橘花药愈伤组织的产生,其花药愈伤组织诱导率可达56.67%;pH 4.98～5.50花药愈伤组织诱导率无显著差异.     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

高羊茅愈伤组织再生系统的建立

为建立高羊茅愈伤组织再生系统，以猎狗5号、沸浪和交战二号为试材，通过选用不同基本培养基、不同2，4-D的诱导浓度、去除胚乳等方法对高羊茅成熟种子进行了愈伤组织诱导培养，结果表明，愈伤组织诱导以CC培养基为最适基本培养基，2，4-D的最佳诱导质量浓度为8mg／L。去除胚乳可使愈伤组织诱导率大大提高，愈伤组织质量也有很大程度改善，在愈伤组织的分化及生根培养中，6-BA的最佳质量浓度为2mg／L，对于猎狗五号愈伤组织，其分化和生根的最适基本培养基为MS培养基，而沸浪和交战二号的最适基本培养基为NB培养基。     

当归愈伤组织培养研究

以当年产当归种子为材料,分别对种子进行去翅和不去翅处理,观察其无菌苗培养条件及愈伤组织诱导、继代培养情况。结果表明,当归种子去翅后,在1/2 MS培养基上有利于获得无菌苗,发芽率达55.4%,污染率仅为6.5%。叶柄为当归愈伤组织诱导的最佳外植体,H培养基为当归诱导愈伤组织的适宜基本培养基。诱导愈伤组织培养基为H＋0.5 mg/L 2,4-D时,出愈率达90%以上;继代增殖培养基为H＋0.5 mg/L 2,4-D＋1.0mg/L IAA时,增殖效果较好。     

2～3年生三七花药愈伤组织诱导的比较研究

以盆栽2、3年生三七花药为外植体,在附加不同激素、浓度的MS培养基上进行愈伤组织的诱导试验。结果显示:在MS基本培养基中附加2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L+蔗糖6%+琼脂0.8%的条件下,2年生三七花药愈伤组织的诱导率可达43.0%,三年生三七花药愈伤组织的诱导率可达55.0%。2、3年生三七花药愈伤组织继代培养差别不大。     

珍稀濒危植物领春木愈伤组织的培养

以领春木茎段为外植体 ,成功地诱导出了愈伤组织 ,将获得的愈伤组织用于适宜增殖培养条件的研究。结果表明 :MS和 1/ 2MS作为愈伤组织诱导基本培养基较为适宜 ;愈伤组织增殖培养以MS培养基 +NAA 2mg/L + 6 BA 0 .1mg/L ,pH值 5～ 6较为合适。     

日本结缕草成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的影响因子分析

 【目的】优化日本结缕草的组织培养体系，提高其植株再生率，建立高频植株再生体系。【方法】以日本结缕草的成熟种子为外植体，分析激素、基本培养基、培养条件、脯氨酸、Cu2+等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。【结果】（1）培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率，而BA降低愈伤组织的诱导率，低浓度的NAA(0.1～0.2 mg·L-1)能促进愈伤组织的形成，愈伤组织诱导的最佳培养基为ND＋2,4-D 3.0 mg·L-1＋NAA 0.2 mg·L-1+L-Pro 500 mg·L-1，愈伤组织诱导率达57.3%；（2）愈伤组织继代的最佳培养基为MSD+ 2,4-D 1.0 mg·L-1；（3）愈伤组织分化的最佳培养基为MSD＋NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+BA 0.05 mg·L-1 + L-Pro 500 mg·L-1，分化率达36.7%。【结论】优化了日本结缕草的组织培养体系，初步找到了影响其成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的主要因子。     

苹果叶片愈伤组织的诱导培养

为获得优质的愈伤组织,以国光和富士苹果的幼嫩叶片为外植体,研究了不同的消毒方法、植物生长调节剂种类及其浓度、光照条件、叶片放置方式等因素对叶片愈伤组织诱导的影响。结果表明:(1)直接进行光培养,愈伤诱导率只有50%～55%,先暗培养14 d再光培养与先暗培养21 d再光培养叶片的愈伤组织诱导率都达100%,但前者产生的愈伤组织结构紧密呈淡黄色,后者出现白化疏松的愈伤细胞。暗培养14d为诱导叶片愈伤组织形成的有利条件。(2)未添加激素的MS基本培养基比添加激素的MS培养基有利于降低叶片的褐变率。(3)采用叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基的愈伤诱导率高约25%～30%,且诱导愈伤组织形成的时间较早。(4)国光叶片在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中,富士叶片在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳。