黔产金钗石斛生物碱组成的HPLC指纹图谱建立

[目的]建立黔产金钗石斛生物碱组分的HPLC指纹图谱。[方法]流动相组成（水-乙腈）,梯度洗脱条件0～50min（5％-80％B）、50～60min（80％B）,流速1．0ml／min,检测波长240nm,测定贵州4个产地金钗石斛色谱图。[结果]建立了贵州4个产地金钗石斛生物碱组分指纹图谱,所建立的指纹图谱可用于贵州金钗石斛产地和质量的鉴别。[结论]该方法稳定,重现性好,可为贵州金钗石斛质量控制提供参考。     

氮磷钾配施对金钗石斛幼苗生长的影响

为探明金钗石斛高产栽培的氮磷钾最佳配方,以金钗石斛幼苗为材料,采用田间试验研究不同氮磷钾配比施肥对金钗石斛幼苗生长的影响。结果表明：不同处理对金钗石斛幼苗生长效果不同,其中,以施用尿素10．87 kg/667m2＋过磷酸钙31．25 kg/667m2＋硫酸钾10．00 kg/667m2效果最好,其药用部位（茎）的生长量为1．74 g/株,较 CK 增加5．45％,微量元素铜、锌、铁和锰含量分别较 CK 增加46．24％、50．80％、69．35％和25．70％,药用成分茎多糖和石斛碱分别较 CK 增加42．36％和46．67％。合适的氮磷钾配比能够明显促进金钗石斛幼苗产量和品质的提高。     

不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分含量的影响

为明确不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分的影响,在金钗石斛幼苗栽培基质上设置不同小区,喷施不同种类的叶面肥后,测定金钗石斛幼苗形态指标、多糖和石斛碱的含量.结果表明：不同叶面肥对石斛幼苗生长效果不同,喷施沼液肥效果最好,与不施肥相比,茎粗增加33％、根长增加67％、株高增加29％、分蘖数增加75％、叶片数增加79％、茎节数增加54％、产量增加67％,根多糖含量增加93％、茎多糖含量增加110％、叶多糖含量增加68％、茎部石斛碱含量增加156％.无机性叶面肥1、叶面肥2和多元素复合肥的施用效果差于沼液肥.所以喷施沼液肥能够显著促进金钗石斛幼苗的生长和药用成分含量的提高.     

不同附生树种对金钗石斛石斛碱含量的影响

[目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:初始温度80℃,10℃/min升温至250℃,保持5 min;进样口温度250℃;FID检测器温度250℃。[结果]不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量有明显差异,其中,杉木附生金钗石斛的石斛碱含量最高,为0.932%,枇杷、杨梅、龙眼附生金钗石斛石斛碱含量分别为0.825%、0.790%和0.601%。[结论]不同附生树种的金钗石斛石斛碱含量均符合2015版《中国药典》限量要求,该研究为确定适宜的附生树种提供参考依据。     

3种石斛兰种子非共生萌发和离体保存

以金钗石斛（Dendrobium nobile）、流苏石斛（D.fimbriatum）和报春石斛（D.primulinum）为研究对象,研究了其在激素浓度配比下种子萌发情况,并对流苏石斛幼苗进行离体保存。结果表明：25℃时,Knudson C（KC）＋BA2mg／L＋N从0．2mg／L最利于金钗和流苏石斛原球茎诱导和幼苗分化;KC＋NAA0．5mg／L时最适报春石斛原球茎诱导和幼苗分化。幼苗保存在15℃,每天12h光照（20001x）,添加3％甘露醇（mannitol）的KC培养基中,10个月后存活率为96％。     

种质与环境对金钗石斛药材品质的影响

将7个不同种质的金钗石斛苗分别在3个栽培基地进行多点栽培试验，测定多点栽培金钗石斛的外观性状、产量及活性成分含量，并结合各栽培基地的气象资料，采用数理统计软件分析种质与环境对金钗石斛药材品质的影响。结果表明，在同一栽培基地中，不同种质金钗石斛外观性状、产量、活性成分含量均存在差异，根据联合方差分析可知金钗石斛茎长、茎直径、产量及石斛碱含量主要受种质因素影响，叶长、叶宽、多糖含量主要受种质与环境因素交互作用影响。影响金钗石斛的主要气候因子是相对湿度、1月均温、平均最低气温、年平均温度；直径短边与年平均温度呈显著负相关，生长在年平均温度较低的地区金钗石斛直径短边较粗壮；叶长与1月均温呈显著负相关，1月均温较低的地区适宜金钗石斛叶片长度的生长；叶宽与年平均温度呈显著正相关，年平均温度较高的地区适宜金钗石斛叶片宽度的生长；多糖含量与年平均温度呈显著负相关，年平均温度较低的地区适宜金钗石斛多糖含量的积累。     

春石斛杂交种与药用金钗石斛3 种活性 成分的比较研究

比较分析了春石斛杂交种Dendrobium Second Love‘Tokimeki’与传统药用石斛金钗石斛活性成分,结果显示,D.Second Love‘Tokimeki’9月至翌年1月的茎多糖含量均值高于金钗石斛;多糖DHPP-Ⅰ数均分子量和重均分子量均低于金钗石斛多糖DNPP-Ⅰ;两种石斛茎都含有所检测的19种氨基酸,金钗石斛所测的氨基酸总量高于D.Second Love ‘Tokimeki’,但D.Second Love ‘Tokimeki’的8种必需氨基酸总量高于金钗石斛;金钗石斛的Fe和B元素含量显著高于D.Second Love ‘Tokimeki’,而D.Second Love ‘Tokimeki’的Mn、Zn、Cu元素含量显著高于金钗石斛。通过两种石斛3种活性成分比较可知,D.Second Love ‘Tokimeki’多糖含量较高,但多糖DHPP-Ⅰ数均分子量和重均分子量均低于金钗石斛多糖DNPP-Ⅰ;D.Second Love ‘Tokimeki’的氨基酸、矿质元素与金钗石斛组成相同,但含量有所差异。     

正交试验优选醋炙金钗石斛的炮制工艺

为金钗石斛精加工提供技术参考,在研究不同辅料及其用量对金钗石斛水溶性成分及石斛碱溶出影响的基础上,采用正交试验探讨增加金钗石斛水溶性成分及石斛碱溶出度的最佳炮制工艺。结果表明:金钗石斛的最佳炮制工艺为100kg金钗石斛中加入30kg白醋(乙酸含量为4%),切片厚度2～4mm,干燥温度55℃。此条件下制备的金钗石斛饮片中石斛碱含量为0.583%～0.597%,可溶性糖含量为7.33%～7.41%;与金钗石斛直接干燥品相比,石斛碱溶出率增加21%～24%;可溶性糖溶出率增加7%～9%。乙酸含量为4%的白醋可提高金钗石斛石斛碱的溶出,同时饮片外观品相好,方法简单易行。     

石斛抗氧化和滋阴作用的试验研究

[目的]研究金钗石斛、鼓槌石斛和铁皮石斛的抗氧化和滋阴药效异同,为其临床用药提供一定的科学依据。[方法]采用DPPH.清除率检测法评价其体外抗氧化活性;并采用氢化可的松建立阴虚大鼠模型,用试剂盒法测定血清中的超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力,并计算大鼠体重、进食量以及死亡率,评价石斛滋阴效果。[结果]体外抗氧化试验表明,3种石斛的抗氧化作用强弱为:铁皮石斛鼓槌石斛金钗石斛,铁皮石斛与鼓槌石斛抗氧化活性和Vc接近,金钗石斛次之;浙江产铁皮石斛和云南产鼓槌石斛抗氧化效果相当,均优于其他产地的。滋阴试验结果表明,铁皮石斛和鼓槌石斛滋阴作用等同,金钗石斛次之。[结论]铁皮石斛、金钗石斛和鼓槌石斛抗氧化和滋阴有差异,在临床使用时可有选择的使用。     

石斛的采收与加工

石斛,又名川石斛、铁皮石斛、霍石斛、枫石斛、金钗石斛、扁草、黄草。其中铁皮石斛（干品加工成铁皮枫斗）最为珍贵,是石斛中之极品。石斛为兰科植物石斛及同属多种植物的茎。具有养阴益胃,生津止渴的功效。适用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热等。现代医学和中医药理研究表明,铁皮石斛富含石斛多糖、石斛碱和总氨基酸等,对提高人体免疫能力、     

金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

不同干燥工艺对铁皮石斛多糖及石斛碱的影响

【目的】研究不同干燥工艺对铁皮石斛主要有效成分多糖和石斛碱的影响,为铁皮石斛产后初加工及规模化生产提供理论依据。【方法】以铁皮石斛为原材料,采用自然晾干、热风干燥、真空干燥和真空冷冻干燥4种不同干燥方式对铁皮石斛进行干燥,探讨4种方式对铁皮石斛多糖和石斛碱含量等的影响。【结果】真空冷冻干燥产品L值最大,颜色较为鲜亮,色泽保持得较好,明显优于自然晾干、热风干燥、真空干燥产品。铁皮石斛干燥后多糖含量大小排列为：热风干燥〉真空干燥〉真空冷冻干燥〉自然晾干。在热风干燥条件下,铁皮石斛多糖含量最高,达31．13％;自然晾干条件下,铁皮石斛多糖含量最低,为20．72％。不同干燥工艺对石斛碱含量几无影响。【结论】热风干燥方式下的铁皮石斛有效成分含量高、能耗低,且所需设备简单,在铁皮石斛加工企业中值得推广应用。     

栽培模式对霍山石斛生长和主要内含物的影响

通过测定大棚栽培、林隙地栽培和活树附生等3种栽培模式下,霍山石斛的生长量、石斛多糖、石斛碱、氨基酸和含水率等含量,对比其生长和内含物的差异性来明确适宜的栽培模式。结果表明：活树附生栽培的霍山石斛多糖、石斛碱和氨基酸含量最高,大棚栽培模式最低（P < 0.05）,活树附生栽培下的霍山石斛单糖和钾元素含量高于林隙地栽培和大棚栽培（P < 0.05）,不同栽培模式下霍山石斛内含物含量之间均为正相关;林隙地栽培和大棚栽培的霍山石斛茎长显著高于活树附生栽培（P < 0.05）,但3种栽培模式的萌蘖数、茎粗与茎节差异不显著;大棚栽培的霍山石斛含水量达92.13%,显著高于林隙地栽培的90.37%和活树附生的85.72%,鲜重差异表现与含水量相同,但干重差异不显著。综上,活树附生栽培下霍山石斛活性成分积累较多,品质更好,是一种适宜大别山区推广的种植方式。     

电刺激对铁皮石斛原球茎中石斛碱含量的影响

[目的]探讨电刺激对铁皮石斛原球茎中石斛碱含量的影响。[方法]采用铁皮石斛原球茎培养基扩增培养铁皮石斛原球茎,并将扩增所得原球茎随机分为试验组和对照组,其中试验组给予不同时间电刺激(25 V),对照组不做处理,正常培养15 d后,以氯仿热回流法提取原球茎中的石斛碱,紫外分光光度法测定石斛碱含量。[结果]与对照组相比,经电刺激(25 V)1和2 h的试验组铁皮石斛原球茎石斛碱含量显著增加(P0.05),而经电刺激(25 V)3 h的试验组铁皮石斛原球茎石斛碱含量下降(P0.05)。[结论]25 V电刺激1、2 h能够促进铁皮石斛原球茎中的石斛碱积累,这可能与电刺激能改变原球茎中细胞的渗透性、增强对培养基中各种成分的吸收,导致内源次生代谢物增加有关。     

不同产地的石斛中总生物碱和多糖含量与其价格关系的探讨

[目的]探讨不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖含量与其价格之间的关系。[方法]用溴甲酚绿酸性染料比色法和苯酚-浓硫酸比色法分别测定了不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖的含量,并结合其价格进行分析比较。[结果]不同产地的几种石斛中总生物碱和多糖含量有所不同,其中贵州赤水产金钗石斛、贵州兴义产环草石斛、束花石斛、马鞭石斛为较优良种;各种石斛中总生物碱和多糖的含量与其市场价格基本成正相关。[结论]石斛中总生物碱和多糖含量与其价格之间有着密切的关系,产地对石斛中总生物碱和多糖含量以及价格有一定影响。该研究为石斛的市场定价和质量评价提供了参考。     

兰花种子的原球茎诱导及其生长分化研究

[目的]从培养基方面优化兰花快速繁殖的技术体系。[方法]将石斛兰和秋花独蒜兰的干种子培养于MS、B5、KC液体培养基上,诱导原球茎形成,再将原球茎培养于MS、KC及B5固体培养基中,研究原球茎分化苗在不同培养基上的生长发育情况。[结果]石斛兰和秋花独蒜兰种子在B5液体培养基中诱导产生的原球茎最多,萌发率分别为3.1%、7.3%。秋花独蒜兰原球茎在KC固体培养基上的成活率最高,为71.9%,且幼苗生长发育状况最好,原球茎直径为(5.8±0.3)mm;石斛兰原球茎在B5固体培养基上的成活率最高,为65.0%,在KC固体培养基上的生长发育状况最好,原球茎直径为(3.8±0.6)mm。[结论]根据不同的组培快繁目标,可在兰花的不同生长发育阶段选用合适的培养基。