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相似文献
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1.
根据哺乳类β-干扰素基因的保守区合成了两对简并引物。用其中的一对(5’TCCTGC/TTGTGC/TTTCTCCACN3’和5’GTCTCAT/GT/ACCAG/CCCAGTGCN3’)作PCR引物。从草鱼(Ctenopharygodon idellus)DNA中扩增获得了一预期大小的片段(约278bp)。Southern杂交的结果表明该片段与人的β-干扰素基因有一定的同源性。  相似文献   

2.
根据哺乳类β-干扰素基因的保守区合成了两对简并引物。用其中的一对(5’TCCTGC/TTGTGC/TTTCTCCACN3’和5’GTCTCAT/GT/ACCAG/CCCAGTGCN3’)作PCR引物。从草鱼(Ctenopharygodon idellus)DNA中扩增获得了一预期大小的片段(约278bp)。Southern杂交的结果表明该片段与人的β-干扰素基因有一定的同源性。  相似文献   

3.
[目的]获得巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[方法]以巴夫杜氏藻cDNA为模板,采用简并引物进行PCR扩增,获得533bp特异cDNA片段。在此基础上,设计特异引物,采用5’-Genome Walking和3’-RACE的方法,获得基因的5’-端DNA序列和3’-端cDNA序列,进而获得β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[结果]获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的特异cDNA片段、5’-端DNA和3’-端cDNA片段。经拼接后,扩增出全长cDNA。β-肌动蛋白基因cDNA全长1754bp,包括1137bp的开放读码框和617bp的3’-非翻译区序列。氨基酸序列相似性分析发现,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白氨基酸序列与杜氏盐藻、莱茵衣藻等的同源性较高。系统发育分析表明,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白与杜氏盐藻的相似性最高。[结论]首次获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列,并发现巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因非常保守。  相似文献   

4.
根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了cryⅠ基因5‘端特异引物和3’端共同引物,利用PCR扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物。通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型。本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的20个菌株进行了cryⅠA(a-c)基因类型的PCR鉴定。  相似文献   

5.
运用AS—PCR方法及SOE技术研究猪α干扰素   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用AS-PCR方法和SOE技术相结合的策略,通过找出猪α干扰素基因内部的特异位点,设计引物扩增出两个DNA片段并将其连接为全长基因。所得片段编码序列长501bp,共编码166个氨基酸,与已知PoINF-α1基因有5个碱基差别,导致3个氨基酸不同。  相似文献   

6.
奶山羊β—乳球蛋白基因及其调控区的克隆和序列分析   总被引:7,自引:1,他引:6  
从奶山羊组织提取基因组DNA,根据已发表的山羊β-乳球蛋白基因(BLC)序列设计引物,用高保真长模板PCR法克隆得6个奶山羊BLG基因片段,这6个基因片段的大小和部分限制性酶切图谱与已发表的山羊BLG基因相同,部分序列测定结果显示:6个奶山羊BLG基因片优山关BLC基因相应片段的同源性为99%,进一步序列测定结果表明:奶山羊BLG基因5调控区与山羊,绵羊和牛的同源性分别为99%,95%和90%,3调控区与这些动物的同源性分别为99%,97%和92%,在乳腺特异表达调控元件集中的-406bp区域内,奶山羊BLG基因与山羊BLG基因有2个碱基的差异,所克隆的奶山羊BLG基因调控区与山羊BLG伪基因显著不同,其同源性仅为83%(上游调控区)和88%(下游调控区),这些结果表明:不同种动物 的BLG基因是高度保守的,高保真PCR克隆的奶山羊BLG基因调控区可用于乳腺特异表达载体的构建。β  相似文献   

7.
参照了已表的IBV Beaudette株全基因组序列,自行设计合成了3和引物(youl+、you2-youM+),引物you1+和you2-在S1基因两侧,跨幅约1610bp,引物you2-和youM+在S1基因的3’端,跨幅约530bp。用这两对引物对5个IBV地方分离株(HN2,HN4,JX1,SC2和SC1)进行RT-PCR,均成功地扩增出相应大小的目的片段。病毒在电镜下观察中以形态多变的冠状病毒粒子。  相似文献   

8.
目的:构建高效表达EBVTK的重组克隆体系。方法:以pUC8X为模板,5'-CTGAATTCATG—GCTGGATTTCC-3’及5’CAACTGCAGCCTAGTCCCGATT-3’为引物,用PCR技术扩增出EBVtk基因的DNA片段。EcoR I/Pst I双酶切PCR产物和载体pBV220,T4连接酶使目的基因tk定向克隆至选定质粒pBV220中。结果:重组质粒pBV220-tk经EcoR I/Pst I双酶切后得两条电泳带分别位于1.8kb、3.6kb处;以pBV220-tk为模板,两引物同上进行PCR扩增,产物电泳带于1.8kb处。结论:目的基因tk已定向克隆至质粒pBV220中。  相似文献   

9.
十字花科蔬菜根肿病菌的PCR检测   总被引:5,自引:0,他引:5  
 利用设计合成的1对根肿病菌(Plasmodiophora brassicae)特异性寡聚核苷酸引物(前引物:5’GAA GAT GCC CAC GCC GTC GT3’和后引物:5’ATC TGT TCA GCA AAG CGT CGA3’),对分离自十字花科作物(白菜、青菜、甘蓝、芥蓝、花椰菜等)及土壤中的根肿病菌全基因组DNA进行PCR(Polymerase Chain Reaction)特异性扩增试验。试验结果表明,试验设计合成的引物能从十字花科根肿病菌全基因组DNA中扩增到629 bp长度的分子片段,该对引物可用于十字花科蔬菜根肿病的分子鉴定和分子监测,为十字花科根肿病的早期准确诊断和病菌检测提供了快速、简便的方法。  相似文献   

10.
根据IBV Beaudette株全基因组序列,借助基因分析软件自行设计合成了3个引物(youl,you2-youM ),引物you1 和you2-在S1基因两则,跨幅为1611bp,引物you2-和youM 在S1基因的3‘端,跨幅为535bp,用引物you1 和you2-对5个IBV地方分离株(HN2、HN4、JX1、SC2和SC4)进行RT-PCR,均成功地扩增出预期大小的目的片段,对RT-PCR的产物用限制性内切酶PstI进行酶切分析,结果酶切产物中得到2条条带,大小分别为560和1050bp,与GeneBank中11株已发表的S1基因分析结果一致,初步鉴定结果显示,已经成功分离得到了IBV-S1基因。  相似文献   

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