芦荟的叶片组织培养

以美国库拉索芦荟叶片为外植体直接诱导不定芽的产生，诱导培养基为MS BA4mg/L 香蕉汁10%，不定芽诱导率为42%；增殖培养基为MS BA3mg/L，继代周期20天，增殖倍数10倍以上；生根培养基为MS NAA0.5mg/L 多效唑（MET）1mg/L或MS IBA1mg/L MET1mg/L,试管苗的移栽成活率达95%以上。     

南瓜组织培养再生体系的研究

以黑籽南瓜和白籽南瓜为试材,研究了苗龄、激素配比、外植体、芽诱导时间以及基因型对再生频率的影响。结果表明,以3~5天苗龄的南瓜子叶为外植体,在MS+6-BA 1 mg/L+Ades 20 mg/L的诱导培养基上诱导10天后,转入MS+GA30.5 mg/L的芽伸长培养基,不同基因型南瓜均能获得较高的植株再生率,每个外植体成苗数在2.5个以上。从接种到再生苗移栽仅需4~5周时间。     

三个不同基因型黄瓜再生体系的优化研究

以欧美型、华北型、华南型3个不同基因型的黄瓜为试材,比较了苗龄、激素配比、外植体类型、芽诱导时间的长短以及基因型对再生频率的影响。结果表明,以2天苗龄的黄瓜子叶为外植体,在MS+6-BA1 mg/L+ABA1 mg/L+Ades 20 mg/L的诱导培养基上诱导15天左右,转入MS+GA30.5 mg/L的芽伸长培养基,3种基因型黄瓜都能获得较高的植株再生率,每个外植体出苗数在1.8以上。从外植体接种到再生苗移栽仅需6~7周。     

黄金梨叶片再生体系建立研究

从外植体接种方式选择、暗培养时间、植物生长调节剂浓度和配比等方面研究了黄金梨叶片再生植株的影响因素。结果表明:适于黄金梨叶片再生的诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,在此培养基上,叶面朝上接种的叶片经过15 d的暗培养转入光照培养,可获得45%的再生率和平均2.2个不定芽;1 cm以上的不定芽经1/2 MS+3.5 mg/L IBA诱导10 d后,转入1/4 MS无激素培养基继续培养可获得高达91.6%的生根率和5个以上的不定根数。     

鲁枣1号组织培养和植株再生体系研究

以鲁枣1号为试材,以正在生长的枣头嫩枝为外植体,进行了芽的诱导和试管苗快繁研究。结果表明,嫩枝茎段上未萌发的主芽在启动培养基(MS+1 mg/L BA+0.2 mg/L IBA+3%蔗糖)上可萌发成新梢,萌发率为54.8%。在相同的启动培养基上,远离培养基的茎段切口处可诱导产生不定芽,不定芽再生率为23.8%。不定芽和主芽新梢在MS+2 mg/L BA+0.4 mg/L IAA+3%蔗糖+6 g/L琼脂培养基上增殖生长良好。试管绿苗在1/4MS+0.5 mg/L IBA+2%蔗糖+6 g/L琼脂培养基上生根率达70%以上。     

罗汉果叶片离体再生快繁技术

以罗汉果叶片为外植体,探讨不同培养方式、不同激素组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,以期建立起稳定高效的罗汉果叶片离体再生快繁体系.结果表明:罗汉果叶片在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.7 mg/L上培养4周,愈伤组织的诱导率在90%以上;罗汉果愈伤组织在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.1 mg/L上不定芽的分化率可达70%,平均出芽指数达3.7;罗汉果试管苗在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L上芽增殖比较稳定,在培养基MS+IBA 0.1 mg/L上培养2周开始分化不定根,生根率在90%以上.     

提高金柑实生态离体再生效率的研究

金柑童期短,1年可多次开花结果,有利于通过遗传转化开展花、果性状和相关基因在花、果实中表达的研究,但目前金柑实生苗再生率还有待提高。以广西阳朔的金弹金柑实生苗节间茎段为材料,发现以35 d苗龄(暗培养25 d,光照10 d)的实生苗节间茎段为外植体材料,培养于再生培养基(MS+3 mg/L 6-BA)上50 d左右,可达到80%以上的不定芽再生率。而经过农杆菌侵染后,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+1 mg/L KT为共培养基,MS+3 mg/L 6-BA为筛选培养基时,并在50 mg/L卡那浓度筛选下,仍可获得13.3%的抗性芽再生率。不定芽切下放置于生根培养基(1/2MS+3 mg/L IBA+1 g/L活性炭)中获得86%左右的生根率。通过对影响不定芽和抗性芽再生频率的各种因素进行研究,最终建立了一套有效的金柑实生苗节间茎段离体再生体系。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

花生上胚轴为外植体的植株再生及转化研究

以8 d龄花生无菌苗的上胚轴为外植体,进行植株再生和农杆菌介导遗传转化研究.结果表明,上胚轴能高效诱导花生植株再生,外植体在MS 3 mg/L TDZ 6 mg/L 6-BA 1.5 mg/L NAA培养基上能高效诱导不定芽分化,10 d时诱芽率达100%;不定芽接种到MS盐 B5维生素 3mg/L TDZ 0.01%酵母粉培养基中15 d诱导出大量丛生芽;MS 0.5 mg/L NAA培养基较适合诱导丛生芽生根,25 d时生根率达82%.筛选确定35 mg/L潮霉素浓度为转化筛选压,以含AtRD29Ap::GUS融合基因的根癌农杆菌侵染8 d龄上胚轴10 min,共培养3 d,经上述再生体系,以潮霉素筛选获得1株拟转化再生植株.     

双单倍体马铃薯DM再生体系的构建

以双单倍体马铃薯(Solanum tuberosum)DM1-3-516-R44的无菌茎段、叶片作为材料,构建马铃薯离体再生体系。结果表明,茎段愈伤组织适宜的诱导培养基BI为MS+0.5 mg/L IAA+2.5 mg/L 6-BA,叶片愈伤组织适宜的诱导培养基BN为MS+1 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,愈伤的平均诱导率均达95%以上,甚至可以全部诱导愈伤形成;愈伤组织分化不定芽适宜的培养基BZ为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率也达到90%左右。     

新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、根的植株再生

随着植物抗逆性研究和植物转基因技术的发展,通过异源目的基因转化培育耐盐碱苜蓿品种的研究已引起人们的关注,植物受体高频再生体系的建立是异源转化高效的基础。选取新疆大叶紫花苜蓿种子萌发5～7d无菌苗的子叶、下胚轴及根为外植体,诱导愈伤培养基为MS 2,4-D0.1～3.0mg/L(8种不同水平)或MS 2,4-D2.0mg/L KT0.01～0.5mg/L(10种不同水平),诱导芽培养基为MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L,生根培养基为MS。结果表明,外植体在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.2mg/L培养基中能够产生状态较好可再分化的愈伤组织,子叶、下胚轴、根的平均出愈率分别为93.1%、100%、100%。愈伤组织在MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L培养基中培养40～80d中均可分化芽,子叶、下胚轴、根的芽平均分化率为50%、78%、50%,将2cm以上的芽转入MS培养基中诱导生根,14d后,生根的小植株炼苗移入花土中,成活率达90%以上。子叶、下胚轴、根在该体系中均能获得再生植株,根也是一种较好的植株再生材料,以根为外植体进行植株再生的研究报道还较少。     

脱毒食用仙人掌工厂化快繁技术研究

试验结果表明:‘米帮塔’幼龄掌片上的刺座芽块经70%酒精30 s,0.1%HgCl2浸泡10 min,无菌水漂洗4~5遍后切下芽体(约5mm)接种到含6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的MS培养基中,萌发的新芽接种到6-BA 0.5 mg/L和NAA 0.05 mg/L的MS培养基中继代培养4周,增殖倍数超过10;新梢转接到含NAA0.1 mg/L的1/2MS培养基中诱导生根,生根率100%;生根的试管苗移栽到蛭石∶砂土=1∶1的混合基质中成活后移植到大田,成活率95%以上。研究结果为脱毒食用仙人掌种苗的工厂化快繁提供技术支持。     

山红柿组培快繁技术体系的建立

以山红柿(Diospyros morrisiana Hance)当年生枝条上休眠芽为外植体材料,通过不同处理间对比研究对山红柿组培苗生长的影响,建立了初代培养、继代增殖、生根培养、叶片再生技术体系。初代培养:山红柿休眠芽经10%H2O2和75%乙醇消毒30 s消毒处理,有效解决了外植体褐化等问题。通过3种基本培养基的比较研究,发现(1/2N)MS培养基最适于豆柿组培苗的初代增殖生长培养。继代增殖:采用(1/2N)MS+6-BA1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L+TDZ 0.05 mg/L与(1/2N)MS+ZT 1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L培养基交替继代培养,平均株高可达2.28 cm。生根培养:在添加20 g/L蔗糖,活性炭0.05 g/L+IBA 0.1 mg/L的MS(1/2N)培养基中,前期暗培养3 d,平均根数最高可达2.08,生根率最高可达78.46%。叶片再生:在MS+TDZ 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基中,先期暗培养14 d后转移至正常光照条件下培养,30 d后愈伤组织形成率、不定芽再生率和平均不定芽数分别达到93.3%,92%和3.74个。成功地建立了山红柿离体快繁技术体系。     

新疆哈密瓜子叶不定芽诱导与植株再生

分别以皇后和K7-3 2至6日苗龄的不同子叶切块作为外植体,分别在含有1.0,0.4,0.1 mg/L 6-BA的MS培养基上进行继代培养从而获得了完整的再生植株.实验表明采用子叶近胚轴部位是诱导不定芽的最佳部位,4日苗龄是实验进行不定芽诱导的最有利时期,1.0 mg/L 6-BA是诱导不定芽的最佳激素浓度.     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

桃遗传转化再生体系的建立与优化

以桃不同胚龄胚为外植体,建立桃遗传转化再生体系.结果表明:花后50 d的胚均能诱导出愈伤组织,并可分化出不定芽.胚愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA0.25 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L的效果最好,平均诱导率可达99.8%.将胚愈伤组织接种在培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L上,愈伤组织转变为致密型,不定芽分化率为37.5%.将不定芽用100 mg/LIBA浸蘸其基部转移到不含激素的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率为82.0%.花后75d的成熟胚不定芽的直接诱导率达到96.1%.     

花生原生质体分离与培养

以花生(Arachis hypogaea L.)品种花育20为材料,探讨不同的酶液浓度、酶解时间及渗透压对花生原生质体分离的影响.结果表明:原生质体分离的适宜酶液配比是2%纤维素酶(Cellulase Onozuka Rs)、0.2%果胶酶(Pectolyase Y-23),甘露醇渗透压调节剂的浓度为0.7mol/L,暗处理10h,叶片原生质体产量为4.86x105个/ml,存活率75.6%,愈伤组织原生质体产量为4.97x105个/ml,存活率75.4%.将分离的原生质体培养在添加1mg/LNAA和4mg/LBAP的改良MS液体培养基中.培养约2～3天后,细胞开始分裂.然后部分细胞继续分裂,并形成细胞团.培养5～6周后,将培养物转移到添加2 mg/L2,4-D和3 mg/L BAP的MS液体培养基(pH5.8)中进行培养.7～8周后,将形成的直径为1～2 mm的小愈伤组织转移到添加1 mg/LNAA和5 mg/LBAP的MS固体培养基上培养,小愈伤组织迅速生长.转移3-4周后,愈伤组织长至7～9mm.     

铁皮石斛高效再生体系研究与应用

以原球茎为实验材料，对影响铁皮石斛再生体系的主要影响因素进行试验，建立铁皮石斛在生产中的高效再生体系。试验结果表明，在基本培养基MS、Fonnesbech和N6中，最适合的基本培养基为MS；原球茎最佳增殖培养基为MS＋6-BA0．75mg／L＋NAA0．2mg／L＋4．0％白糖，接种35d后原球茎增殖倍数为4．19；最佳分化培养基为Ms＋6-BA0．3mg／L＋3．0％白糖，分化率为74％。分化出的丛芽在生根培养基MS＋AC0．05％＋白糖3．0％中，28d生根率达到87％。