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相似文献
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1.
采用改良CTAB法,对红掌(Anthurium adndraeanum)同一品种4个不同生长时期(芽期、幼苗期、中苗期、成品期)的嫩叶和同一植株5个部位(嫩叶、老叶、佛焰苞、花序、根)进行基因组DNA的提取,利用核酸蛋白测定仪和琼脂糖凝胶电泳检测DNA的质量。结果表明,红掌成品期嫩叶的DNA提取从纯度和提取率均优于其他各生长时期;花序DNA提取有少量的杂质污染,老叶有少量RNA残留,其他部位均适合DNA提取,其中嫩叶提取率最高。  相似文献   

2.
改良CTAB法提取濒危药用植物绶草基因组DNA   总被引:3,自引:2,他引:1  
以绶草的根、茎、叶和花为材料,采用改良CTAB法提取绶草基因组DNA,经紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对所提DNA的质量和纯度进行比较.结果表明,改良CTAB法(2.5 mmol/L NaCI、30 mmol/L EDTA、100 mmo/LTris-HC1、2%CTAB、2%β-巯基乙醇、2%PVP-40)适合绶草根的基因组DNA提取,几乎没有蛋白质、酚及色素等杂质的污染,紫外吸收检测DNA的OD260nm/OD280nm为1.83,DNA浓度为8.819 μg/μl,产率为1102.4μg/g;提取的茎、叶DNA有少量杂质;花DNA的提取效果最差,含有较多的蛋白质、酚及色素等杂质.加入2%PVP-40的CTAB提取液对绶草DNA的提取效果最好.  相似文献   

3.
野生桃幼叶DNA提取方法的改良研究   总被引:4,自引:2,他引:2  
以野生桃幼叶为材料,为适应AFLP分析要求,对常规SDS法、CTAB法、SDS-CTAB结合法以及改良CTAB法等4种基因组总DNA的提取方法的效果进行了比较研究。结果表明,常规SDS法难以去除桃幼叶组织中的蛋白质、多糖和酚类等杂质,使所提取的DNA呈黏稠状的浅褐色沉淀,难以溶解;CTAB法和SDS-CTAB结合法提取的桃基因组DNA,虽然蛋白质和酚类等杂质去除较干净,但对多糖类物质的去除能力仍然有限,且提取效果在品种间重复性较差;而改良CTAB法提取DNA完整性较好,杂质少,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。  相似文献   

4.
陈山红心杉基因组DNA提取方法的比较与分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用尿素法、柠檬酸钠法、改良的CTAB法和SDS法4种方法提取陈山红心杉基因组DNA,并对提取效果进行比较和分析。结果表明,改良的CTAB法较适合陈山红心杉基因组DNA提取,其提取的DNA纯度高、质量好,具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,A260/A280比值在1.8左右,且凝胶检测条带整齐清晰,杂质少、无明显降解。而尿素法和柠檬酸钠法难以提取基因组DNA,SDS法因提取的DNA有蛋白质、多糖等杂质污染均不太适用陈山红心杉基因组DNA提取。酶切分析也证明,改良的CTAB法提取的DNA适用于进行后续分子生物学分析。采用改良的CTAB法能够提取得到陈山红心杉幼叶、老叶、嫩芽和幼茎的基因组DNA产率不同,分别为158.4μg/g、129.6μg/g、177.6μg/g和98.40μg/g。考虑到幼叶样品的采集要比嫩芽方便,因此,可以直接采用幼叶进行陈山红心杉基因组DNA提取。  相似文献   

5.
一、形态特征   魔芋多年生草本,株高可达1米,块茎扁圆球状、肉质、红褐色,直径可达20厘米,叶从块茎中央抽出,直立,柄较长,青白色,叶片大,3回羽状分裂,长椭圆形,先端渐尖,与叶柄联成翼状,全缘,花萼块茎顶部生出,基部有数个鳞片状的叶包被,佛焰苞暗紫色,先端急尖.肉穗花序、扁平,较佛焰苞为长,紫褐色,花紫红色,微臭,浆果球形,熟时黄绿色.花期7~8月,果期9~10月.  相似文献   

6.
适于AFLP分析的盾叶薯蓣DNA的提取方法   总被引:1,自引:1,他引:0  
用传统CTAB法和改良CTAB法提取盾叶薯蓣样品的基因组DNA。结果表明:传统CTAB法与改良CTAB法提取的基因组DNA完整性都比较好,但传统CTAB法获得的DNA含有较多杂质,不能被限制性内切酶消化,改良CTAB法提取的基因组DNA杂质去除彻底,条带清晰,可以完全酶切,并能获得清晰的预扩增图谱和有丰富条带稳定的AFLP指纹,完全适合于盾叶薯蓣分子标记鉴定所需。  相似文献   

7.
<正> 火鹤花,又名红鹤芋。株高30~50厘米,叶深绿,革质。叶丛生,叶片从植株基部长出,叶片呈卵披针形,长20厘米,宽5厘米。花朵由鲜红色的佛焰苞和橙红色肉穗花序组成。株形小巧可爱,适合盆栽,是理想的室内观叶、观花植物。 “大叶花烛”,又名烛台花。红掌,植株比火鹤高大,花茎也比火鹤花长而且挺直,是一种很好的鲜切花材料。叶片卵心形,长20~30厘米,宽10~20  相似文献   

8.
为了得到满足分子生物学要求的高质量大花蕙兰子房DNA,以大花蕙兰子房为材料,采用SDS法、CTAB法、优化CTAB法、高盐CTAB法和试剂盒法提取子房基因组DNA。通过琼脂糖凝胶电泳和仪器检测提取产物,结果表明,采用优化CTAB法提取的DNA产物浓度高,纯度高,无酚类、多糖等杂质的污染,证明优化CTAB法是提取大花蕙兰子房基因组DNA的最适方法。  相似文献   

9.
红掌又名安祖花、花烛等,属天南星科花烛属多年生常绿草本植物。叶具长柄,有光泽;佛焰苞鲜红色或粉红色、白色,光滑富有蜡质光泽;根半肉质化,具强大的气生根。红掌原产于南美洲热带雨林中,性喜温暖、潮湿而又空气通畅的环境。  相似文献   

10.
观光木(Tsoongiodendron odorum Chun)植物体内酚类物质和蛋白质含量较高,影响了基因组DNA提取的产量。采用改良CTAB法对观光木基因组DNA进行提取,经过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳、ISSR标记和双酶切检测,结果表明,改良CTAB法提取的基因组DNA吸光值OD260/OD280为1.80~1.90,DNA无降解现象和杂质污染;ISSR-PCR扩增的条带多而且清晰;基因组DNA双酶切彻底。说明此方法提取的DNA质量较高,符合ISSR和AFLP标记对基因组DNA质量的要求。  相似文献   

11.
红掌工厂化育苗关键技术研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培养快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8 min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基分别为1/2MS+6-BA1.50 mg/L+2,4-D0.50 mg/L+NAA0.10 mg/L和1/2 MS+6-BA1.50 mg/L+KT1.00 mg/L+2,4-D0.10 mg/L;最佳愈伤组织继代培养基分别为MS+6-BA1.00 mg/L+NAA0.50 mg/L+2,4-D0.30 mg/L和MS+6-BA0.50 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.10 mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA0.10 mg/L+IAA0.10 mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。  相似文献   

12.
三叶木通总DNA提取方法的比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
张铮  王强 《西北农业学报》2005,14(3):141-144
以三叶木通(Akebia trif olia ta K o idz.)的新鲜叶片和硅胶干燥叶片为材料,分别采用CTAB法、高盐低pH法和苯酚法3种不同方法提取其植物总DNA,用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测获得的DNA的质量,以期从中找出提取三叶木通植物总DNA的最适方法。结果表明对于三叶木通的新鲜叶片和硅胶干燥叶片,无论从产率上还是质量上,CTAB法都明显优于其他两种方法。  相似文献   

13.
王敏  那冬晨  姬虎太  张定一 《安徽农业科学》2009,37(35):17384-17385
[目的]寻求少量、快速提取小麦幼叶DNA的方法。[方法]以小麦幼叶为试验材料,用改良的CTAB法小量快速提取转基因小麦总DNA。所提取的DNA以0.8%琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]改良的CTAB法提取小麦基因组DNA所提取的DNA纯度高、无降解现象,适用于进行常规PCR扩增。[结论]该研究为小麦DNA的提取提供了一种所需材料量少、简便、快速的方法。  相似文献   

14.
PVP对烟草基因组DNA提取的影响   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
为克服烟叶组织中蛋白质、糖类、色素、烟碱及酚类等物质对烟草基因组DNA提取的干扰,防止DNA产生褐变,获得质量高且适于SRAP-PCR反应需要的DNA,采用改良CTAB法探讨了在提取液中添加不同浓度PVP对烟草基因组DNA提取质量的影响.结果表明:在1%、2%、4%PVP浓度下提取烟草DNA样品的OD260/OD280值均在1.7~1.9之间,OD260/OD280值随着提取液中PVP浓度的提高而增大,DNA褐化程度明显降低,获得的DNA能满足SRAP分析要求.  相似文献   

15.
以茉莉花的嫩叶和花蕾作为实验材料,采用改良后的CTAB提取法提取DNA,经紫外分析仪和琼脂糖电泳检测所提取的DNA浓度和纯度,发现提取的DNA质量好、浓度高,且用花蕾提取的效果比嫩叶更好。  相似文献   

16.
应站明  黎桂芳  王海舟 《安徽农业科学》2009,37(32):16180-16181
[目的]研究中华桫椤总DNA的提取方法。[方法]采用SDS法和改良CTAB法提取中华桫椤总DNA,通过电泳检测方法进行比较。[结果]用改良CTAB法得到的DNA浓度和纯度都较高,基本上无蛋白质、多糖等杂质。用改良CTAB法得到的总DNA进行ISSR-PCR扩增,谱带清晰,获得较好的效果。[结论]为提取高质量的DNA样品奠定了基础,并为探讨中华桫椤自然居群的遗传多样性和种群遗传结构及进一步保护和利用中华桫椤提供了分子遗传学依据,  相似文献   

17.
中药材附子基因组DNA提取方法研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]为研究附子的遗传多样性、种质鉴定和指纹图谱的构建提供基本保证。[方法]以中药材附子药源植物的幼嫩叶片和块根为试材,分别采用SDS法、CTAB法和改良CTAB法从中药材附子药源植物中提取基因组DNA,比较不同方法的提取效果。[结果]对于新鲜叶子,采用SDS法提取DNA的A260/A280值最接近1.80,其次为改良CTAB。采用改良CTAB法从新鲜附子提取DNA的A260/A280值最接近1.80,表明改良CTAB法的除杂效果优于SDS法。SDS法适于杂质含量较低的试材。采用SDS法提取的DNA浓度最高,改良CTAB法次之,CTAB法最低;从鲜材料提取基因组DNA浓度比干材料高。[结论]3种方法均能提取到中药材附子药源植物的基因组DNA,SDS法对新鲜叶子提取的基因组DNA效果最佳,改良CTAB法对新鲜附子进行DNA提取的效果最好。  相似文献   

18.
不同种质荔枝基因组DNA提取研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
针对荔枝体细胞富含多酚、多糖、色素以及蛋白质等次生物质的特点,以荔枝叶片为材料,分别采用CTAB法和SDS法对荔枝野生、半野生和栽培种质的基因组DNA进行提取。结果表明,SDS法提取的荔枝基因组DNA效果稳定,获得DNA的机率为100%,DNA纯度高、质量好,可用于AFLP酶切、连接、预扩增和选择性扩增,并获得清晰、稳定的扩增产物;CTAB法提取的荔枝基因组DNA效果不稳定,DNA浓度较低,易出现多糖等次生物质与DNA共沉淀现象,无法检测出DNA。因此,SDS法可用于不同荔枝种质基因组DNA的提取,进行AFTJP、SSR、ISSR分析。  相似文献   

19.
适于TAIL-CR模板的水稻基因组DNA提取方法的优化   总被引:3,自引:1,他引:2  
[目的]筛选适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[方法]采用5种方法提取水稻叶片基因组DNA,筛选出DNA纯度及浓度较高的、适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[结果]改良的SDS法及CTAB法提取的基因组DNA纯度及浓度较高,效果明显优于脲法及简易法。以TAIL-PCR技术对选择的同一个含Ds元件的样品的5种提取方法的基因组DNA作为模板进行Ds侧翼序列的扩增,改良的SDS法及CTAB法得到的条带特异,这些产物经回收、纯化后可直接用于序列的测定。但考虑到CTAB价格比较昂贵,毒性较大,一般不主张采用。[结论]改良的SDS法提取的水稻基因组DNA最适作为TAIL-PCR的模板。  相似文献   

20.
尹一伊  王玲  廖文彬  彭明 《安徽农业科学》2010,38(17):8863-8865
[目的]比较4种提取橡胶叶基因组DNA方法,为后续研究根据需要采用不同的DNA提取方法提供依据。[方法]分别采用TIANGEN新型植物基因组DNA提取试剂盒提取法、E.Z.N.A.TMHigh Performance(HP)Plant DNA Kit提取法、CTAB法、改良的CTAB法提取橡胶基因组DNA,通过紫外分光光度计测定不同方法所提取DNA的纯度和浓度,并通过电泳和酶切检测。[结果]采用改良的CTAB法提取的橡胶基因组DNA纯度最高,质量最好;采用其他方法所得的基因组DNA均有不同程度的多糖多酚以及蛋白的污染。[结论]采用改良的CTAB法所提取的橡胶基因组DNA因其完整性好、浓度高、纯度高可用于对DNA质量要求高的试验中。若是后续研究对DNA质量要求不高,则可以选择试剂盒,省时省力。  相似文献   

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