拮抗菌与病原菌处理对采后桃果实多酚氧化酶、过氧化物酶及苯丙氨酸解氨酶的诱导

 Pichiamembranefaciens能有效抑制桃果实采后软腐病。笔者观测和比较接种拮抗酵母菌P .mem branefaciens和软腐病菌Rhizopusstolonifer对采后桃果实多酚氧化酶 (PPO)、过氧化物酶 (POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的诱导情况。试验结果表明 ,桃果实接种P .membranefaciens +R .stolonifer 2 4h后 ,PPO和PAL活性开始升高 ,并在整个试验过程中一直保持较高的水平。只接种R .stolonifer也能诱导桃果实PPO和PAL活性的增加 ,但效果不如接种拮抗菌 +病原菌的好。然而 ,接种拮抗菌 +病原菌和只接种病原菌对诱导POD活性都没有明显的作用。可以认为 ,拮抗菌诱导抗性相关酶活性的提高是发挥抑病作用的一种重要方式     

季也蒙毕赤酵母对采后草莓病害控制及冷藏品质的影响

采用季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)作为拮抗菌处理采后草莓(Fragaria ananassa Duchesne.'Toyonoga'),测定不同浓度酵母菌悬液对采后草莓果实灰霉病害的抑制效果,以及菌悬液对草莓果实冷藏(2 ℃、RH 90%～95%)品质的影响.结果表明:季也蒙毕赤酵母能显著抑制草莓灰霉病病斑的扩展,且菌悬液浓度越高,抑制效果越好.菌悬液浓度为5×109 CFU·mL-1时,病斑直径比对照小34.0%.拮抗菌悬液处理对果实呼吸强度影响很小,但可以保持果实的光泽和可溶性固形物含量,并显著减小失重率,维持果实硬度,延长果实的贮藏寿命.季也蒙毕赤酵母菌悬液处理显著提高了草莓的冷藏品质.     

南疆葡萄采后致病菌分离鉴定及拮抗菌的筛选

【目的】研究葡萄采后致病菌的种类、致病规律和拮抗菌筛选,为葡萄采后保鲜和寻找安全有效的微生物抗菌剂奠定基础。【方法】采用组织块分离法从健康果实和腐烂果实上得到致病菌和拮抗菌,运用平板对峙法检测拮抗菌的拮抗效果。【结果】引起葡萄采后腐烂的病原菌主要是真菌:灰霉、黑曲霉、青霉、根霉、链格孢和拟茎点霉等6个属。其中黑曲霉和根霉是葡萄在常温运输过程中的主要致腐菌,而灰霉、交链孢和青霉是葡萄在低温贮运过程中的主要致腐菌。健康葡萄上分离出7种细菌分离物,5种有明显的拮抗效果,其中细菌2和细菌3的抑菌效果最好。【结论】不同的葡萄品种采后致病菌的种类不同,其致病规律也不同;筛选具有较好抑菌效果的微生物,为生物防治葡萄腐烂提供理论基础。     

1株拮抗酵母菌对柑橘绿霉病菌的抑制作用

以柑橘绿霉病菌(Penicillium digitatum Sacc.)为供试材料,研究拮抗酵母菌(Kluyveromyces ma-rxianus)对柑橘采后绿霉病菌的抑制效果,并观察其对采后柑橘果实多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明:拮抗酵母菌的菌株悬浮液和培养原液对柑橘采后绿霉病菌均有较好的抑制作用,但菌株培养上清液和热杀死液对柑橘绿霉病菌的抑制效果较差;与对照相比,接种拮抗菌与病原菌能够诱导柑橘果实PPO、POD和PAL活性的升高;拮抗酵母菌对柑橘绿霉病菌的抑菌机制与营养和空间的竞争以及诱导抗病性相关酶有关。     

芒果炭疽病拮抗菌的筛选及防治效果研究

针对芒果炭疽病菌进行了拮抗菌的分离和筛选．并且采用有效菌株的发酵液进行了平板培养基抑菌试验以及采后芒果果实炭疽病防病试验。结果从24个菌株中筛选得到1株有效抑制炭疽病菌的芽孢杆菌M35，其抑菌圈大于13mm，而且其发酵液对炭疽病菌也有明显的抑制作用；果实防病试验结果也显示，该菌株对于芒果采后炭疽病有显著的防治效果，且随着该拮抗菌菌悬液浓度的增加，防病效果提高，在浓度为1×10^8CFU／mL时，发病率为45％，病斑直径为14．1mm。     

番茄内生放线菌ts-6及其次生代谢产物对番茄灰霉病的防病效果

测定了番茄内生放线菌ts-6对灰葡萄孢菌的拮抗作用及其防病效果,结果表明:对峙培养时ts-6菌株对灰葡萄孢菌菌丝生长有明显的拮抗作用,培养7d后可形成直径30mm的抑菌圈,抑菌带宽度达12mm。显微镜下可见抑菌圈边缘菌丝体畸形膨大,分隔、分枝增多,部分菌丝顶端膨大呈泡囊状,有的泡囊破裂、原生质外泄t。s-6菌株胞外分泌物对灰葡萄孢菌孢子萌发和菌丝生长的抑制试验说明,其胞外分泌的拮抗物质中既有能耐高温的抑菌物质,又有遇高温易失活的抑菌物存在。离体和温室防治试验说明,ts-6菌株培养液对灰霉病的防效显著高于菌悬液和无菌滤液。挑战接种间隔期为24h时,无菌滤液的防治效果高于菌悬液;挑战接种间隔期为48h时,菌悬液的防治效果高于无菌滤液。     

假丝酵母对柑橘采后绿霉病的抑制效果

从柑橘果实分离的假丝酵母Candidaspecis CWW-4菌株对贮藏柑橘绿霉病菌有抑制作用。试验结果表明,拮抗酵母菌生防效果与病原菌和绿霉菌的浓度以及接种时间有关,在25℃下当接种绿霉菌浓度为1×104个/mL时,1×108cfu/mL拮抗酵母能较好的抑制绿霉病的发生。假丝酵母先于病原菌24 h接种,5 d后可完全抑制绿霉病的发生。在4℃和25℃下,拮抗酵母菌接种1 d以后可在果实的伤口处快速繁殖,伤口处无论是否接种病原菌其数量都分别增加20倍和60倍以上。采用不同的处理液处理果实,发现假丝酵母悬浮液和培养原液对绿霉病菌有较好的抑制效果;培养滤液和热杀死液抑制效果差。25℃离体条件下,1×108cfu/mL假丝酵母悬浮液24 h能完全抑制绿霉菌孢子的萌发,培养滤液和热杀死液无抑制效果。NYDB1所含各组分的营养液都不同程度的降低假丝酵母对绿霉病菌的抑制效果。研究结果表明,假丝酵母Candidaspecis CWW-4菌株对柑橘绿霉病有很好的防治潜力,其抑制机制可能与营养竞争有关。     

拮抗细菌R26发酵滤液对灰葡萄孢菌的抑菌活性研究

在离体条件下,测定了拮抗细菌R26对灰葡萄孢菌的抑制作用,结果表明,R26发酵滤液能抑制灰葡萄孢菌丝生长,EC50值为10.63μL/mL;经R26发酵滤液(40μL/mL)处理后,灰葡萄孢菌体形态发生明显变化;R26发酵滤液能抑制灰葡萄孢菌孢子萌发,并能抑制芽管伸长,当浓度达80μL/mL时,对灰葡萄孢菌产孢量的抑制率达57.51%。     

采前喷施拮抗酵母菌对草莓采后贮藏性能的影响

[目的]研究采前喷施拮抗酵母菌以提高草莓贮藏性能,减少采后损失.[方法]采用葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)和季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)对草莓采摘前3d进行喷施处理,测定不同浓度酵母菌菌悬液对草莓常温贮藏[25℃、相对湿度(RH)90％～95％]病害的抑制效果以及最佳浓度酵母菌悬液对果实冷藏[(2±1)℃、RH 90％～ 95％]性能的影响.[结果]常温贮藏结果显示:采前喷施拮抗酵母菌显著降低果实腐烂指数(P＜0.05),提高商品率,能较好地保持果实外观品质.1×106 CFU·mL-1复合酵母菌和1×108 CFU·mL-1单一酵母菌组果实商品率较高,可作为最佳冷藏试验浓度.冷藏试验结果表明:采前喷施拮抗菌能抑制果实硬度和维生素C含量的下降,减轻果实的腐烂,且腐烂指数显著低于对照组(P＜0.05),其中复合菌处理组商品率高达85％,显著高于单一处理组(P＜0.05).但采前喷施拮抗菌对草莓色泽、可溶性固形物(TSS)和pH值没有显著影响.处理组的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)和β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性均高于对照组,丙二醛(MDA)含量低于对照组,且低浓度复合菌处理组果实冷藏效果好于高浓度单一酵母菌处理组.[结论]采用低浓度1×106 CFU·mL-1的复合菌菌悬液采前喷施,较其他处理能更有效提高草莓果实抗性,延长贮藏寿命,因此可以作为一种提高草莓采后贮藏性能的生物防治方法.     

拮抗菌P_1、P_5对采后红地球葡萄灰霉病的抑制及贮藏品质的影响

研究拮抗菌对红地球葡萄的抑菌保鲜作用,以及红地球采后贮藏期果实主要品质指标的变化规律。结果表明,在贮藏过程中,红地球葡萄中还原糖、可滴定酸、Vc含量逐渐减少,拮抗菌P1、P5处理能够明显降低还原糖、可滴定酸的降解和损失。拮抗菌P1和P5还能明显推迟贮藏期葡萄发病,减少质量损失率、落粒率,降低发病率。     

Interaction Between Cryptococcus laurentii, Monilinia fructicola, and Sweet Cherry Fruit at Different Temperatures

The present study was performed mainly to investigate the antagonist-pathogen-host interaction in wounds of the sweet cherry fruits. The antagonistic yeast Cryptococcus laurentii could significantly reduce the brown rot of the sweet cherry fruit caused by Monilinia fructicola at 25 and 1 ℃. The populations of yeast increased faster in the presence of the pathogen initially, but then decreased rapidly. In the fruits inoculated with M. fructicola alone or combined with C. laurentii, an induction of lipid peroxidation as well as activities of the antioxidant enzymes, such as, superoxide dismutases （SOD）, catalase （CAT）, and peroxidase （POD）, was observed. The isoenzyme pattern of polypheno/oxidase （PPO） changed greatly after the symptoms appeared, with new PPO isoforms being induced. By contrast, the induction of lipid peroxidation and activities of SOD, CAT, and POD were low, although no significant changes were found in the PPO isoenzyms in the fruits inoculated with antagonist C. laurentii alone. The inhibition of brown rot during the antagonist- pathogen-host interaction in wounds of the sweet cherry fruits was mainly on account of the stimulated growth of C. laurentii as well as the induction of antioxidant enzymes of the fruits by M. fructicola.     

Biocontrol Efficacy of Two Antagonistic Yeasts Against Postharvest Diseases in Peach Fruits During Storage Periods

Two antagonistic yeasts, Thichosporon pullulans and Cryptococcus laurentii, were investigated for their biocontrol potential to blue mold rot and rhizopus rot on harvested peach fruits (Prunus persica L. Batsch, cv. Okubao), alone or in combination with a Iow dose of iprodione (50 μg mi-1 ). The results indicated that T. pullulans and C. laurentii were effective at reducing disease incidence and severity of blue mold rot and rhizopus rot in peach fruits. Biocontrol efficacy of C. laurentii and T. pullulans were significantly enhanced by combination with a Iow dose of iprodione (50 μg mi-1) against blue mold and rhizopus rot in peach fruits. T. pullulans and C. laurentii combined with a low dose of iprodione (50 μg mi-1 ) resulted in better disease control than either iprodione or the yeasts used alone. Dipping fruits in suspensions of antagonist cells showed the similar control effect as the treatment with iprodione (500 μg ml-1 ).     

酵母拮抗菌与碳酸氢钠配合对番茄果实采后病害的防治效果研究

 本文研究了酵母拮抗菌（Crytococcus laurentii）与不同浓度的碳酸氢钠（NaHCO3）配合使用对番茄果实采后灰霉病（Botrytis cinerea）和绵腐病（Pythium aphanidermatum）的防治效果，以及碳酸氢钠对酵母菌和病原菌生长的影响。结果表明，C. laurentii与碳酸氢钠配合使用对番茄果实灰霉病和绵腐病均有明显的防治效果，其中，C. laurentii与5% NaHCO3合用的效果最好。在含有不同浓度碳酸氢钠的PDA培养基上病原菌B. cinerea和P. aphanidermatum的生长都受到了显著抑制，其中碳酸氢钠对B. cinerea的抑制作用较强于对P. aphanidermatum的抑制。同样，酵母菌在含有碳酸氢钠的NYDB培养基和番茄果实伤口上的生长也受到抑制。     

球毛壳ND35对植物生长的影响及其生防效果

[目的]研究球毛壳ND35对植物生长的影响及其生防效果，为该菌的推广应用提供依据。[方法]以植物内生真菌球毛壳ND35为供试菌株，病原菌有杨树腐烂病菌、立枯丝核菌、番茄灰霉菌。（a）调查球毛壳ND35对植物生长的影响。在扦插杨树枝条时，设2个处理：①接种10g长有球毛壳ND35的麦粒培养基；②接种10g无球毛壳ND35的麦粒培养基为对照。出芽后，测量杨树高度、1．3m处的胸径，同时调查侧根（d≥8mm）数量。（b）大田试验测定球毛壳ND35对杨树腐烂病的拮抗作用。采用烫伤接种的方法，在主干距地面高50cm和100cm（约树干的1／3和2／3）处先用火烫伤树皮，再接种含病原菌菌丝体的PDA菌饼。在随后的1个多月统计发病情况，以29d后发病的为0级，26～28d发病的为1级，23～25d发病的为2级，20～22d发病的为3级，19d之内发病的为4级。分级计数，计算发病率、病情指数和拮抗效果。（c）大田试验调查球毛壳ND35对杨树叶锈病的拮抗作用。在杨树1．3、1．7、2．1m处分别调查2个处理组杨树叶片正面（冬孢子堆）及背面（夏孢子堆）的发病情况，在发病杨树上，根据同一高度叶正面和叶背面的病斑面积占叶片总面积的比例确定分级标准：没有发病为0级、0～20％为1级、20％～40％为2级、40％～60％为3级、〉60％为4级。计算发病率、病情指数和拮抗效果。（d）温室试验测定球毛壳ND35对灰霉病的诱导抗病作用。将菜豆、番茄分别分为2个处理：①接种拮抗菌ND35；②不接种ND35。分别测量病斑长短直径，计算病斑面积。（e）温室测定ND35对菜豆立枯病的防治效果。处理组：播种时接种内生菌球毛壳ND35，同时接种立枯丝核菌；对照组：播种时只接种立枯丝核菌。在接种10d后观察发病情况，根据病斑直径占茎基周长的比例确定分级标准：没有发病的植株为0级，〈25％为1级、25％～50％为2级、50％～75％为3级、〉75％为4级。计算病情指数和防治效果。[结果]球毛壳ND35在植物体内定殖后能促进杨树根系和胸径的生长，使植株粗壮，有利于提高植物的抗病性；接种球毛壳ND35能诱导杨树对腐烂病菌和叶锈病菌产生较好的拮抗效果；也能够诱导番茄和菜豆对灰霉病菌产生抗病性，诱导抗性效果分别达58．85％和35．65％；还可有效防治菜豆立枯病，防治效果达50．9％。[结论]内生真菌球毛壳ND35引起的诱导系统抗病性在植物病害的生物防治中有重要作用。     

植物病害生物防治在大棚、温室中的应用

 分析了大棚和温室中植物病害的发生特点和生物防治的可行性,给出了成功防治应用的实例,认为棚室中植物病害生物防治比大田病害更为有效和可行。最后对生物防治在棚室中应用前景进行了探讨。     

生防菌系统诱导果蔬采后抗性的机制及其信号转导途径

诱导抗病性（induced Systemic resistance，ISR）是生防菌对果蔬采后病害抑制的重要机理之一。生防菌的系统诱导抗性具有非特异性、广谱性和系统性。阐述了生防菌对果蔬采后的系统诱导，分析了生防菌系统诱导果蔬抗性的机制、信号转导的途径，为拮抗菌防治果蔬采后病害提供了新的研究靶点。     

辣椒炭疽病病原菌生物学特性及拮抗酵母菌的抑菌效果

对辣椒采后炭疽病病原茵的生物学特性和拮抗酵母茵的抑菌效果进行了研究.结果表明,拮抗酵母菌的抑茵效果与酵母茵悬浮液的浓度呈正相关,与病原茵的浓度呈负相关.     

G418-Resistance as a Dominant Selectable Marker for Heterogenous Gene Expression in Antagonist Pichia membranefaciens

Pichia membranefaciens, which was isolated from the surface of peach fruits, showed effective biocontrol capability against rhizopus rot of peach fruits. Aminoglycoside antibiotic G418 can inhibit the growth of P. membranefaciens. The minimal inhibitory concentration of G418 to P. membranefaciens in YPD medium was 100 μg mL-1. We constructed a phosphoglycerate kinase (PGK) promoter-driven neoR expression cassette, which was called pFL61-neo. The biocontrol yeast P. membranefaciens was transformed with pFL61-neo by lithium acetate method. Expression vector pFL61-neo conferred P. membranefaciens drug resistance to 100 μg mL-1 G418. The transformant could keep a high percentage of plasmid-containing of transformant with 67.87% after 50 generations in non-selective medium. The result showed that P.membranefaciens could recognize the promoter and terminator of PGK and direct the expression of heterologous neoR gene. Expression vector pFL61-neo could exist stably in P. membranefaciens. Therefore, it is feasible to utilize G418-resistance as a dominant selectable marker for heterogenous gene expression in antagonist P. membranefaciens.     

球毛壳ND35对植物生长的影响及其生防效果初探

［目的］研究球毛壳DN35对植物生长的影响及其生防效果，为该菌的推广应用提供依据。［方法］以植物内生真菌球毛壳（Chaetomiumglobosum）ND35为供试菌株，在温室和大田条件下测定其对植物生长的影响及其对5种植物病害的防治效果。［结果］ND35对杨树侧根和胸径生长有一定的促进作用。接种ND35能诱导杨树对腐烂病菌和叶锈病菌产生抗性；也能诱导番茄和菜豆对灰霉病菌产生系统抗病性；还可有效防治菜豆立枯病。［结论］内生真菌球毛壳ND35引起的诱导系统抗病性在植物病害的生物防治中有重要作用。     

哈茨木霉(Trichoerma harzianum)T23生防菌筛选及防治中药材根腐病的研究

研究表明,引起麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病的主要病原种群是尖孢镰刀菌及腐皮镰刀菌．为了有效防治中药材根腐病,保护环境,提高品质和产量,通过不同生态区的土样采集,采取病原菌诱饵法及稀释平扳法分离菌株,经筛选、纯化得到抑菌拮抗效果达80％以上的哈茨木霉生防菌T23;不同剂量试验结果表明,施用哈茨木霉T23生物制剂7．5kg／hm^2效果最佳,田间防治麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病效果达70％以上,显著优于50％多菌灵粉剂,比对照增产14．2％～24．5％．大面积防治中药材根腐病的防病增产效果与田间小区试验的一致．