白沙枇杷成熟胚子叶诱导不定芽再生

枇杷(Eriobotrya japonica L.)是原产中国的特色树种,分红沙、白沙两大品系.因其基因型高度杂合,童期长,传统的育种方法周期长,所以采用现代生物技术手段育种显得尤为重要.基因工程是品种改良快速和有效的育种手段,而基因工程的遗传转化操作系统的建立依赖于不同类型的外植体高频植株再生.枇杷的离体培养植株再生主要集中在幼胚、胚乳、花药以及原生质体等方面 [1～6],目前存在再生频率低下、培养难度较大等问题[7].近几年在枇杷成熟胚子叶诱导再生方面相继展开了一些研究,但诱导产生不定芽仅限于红沙系品种[8,9],白沙系品种至今未有报道.为此,本试验拟进行白沙枇杷成熟种子子叶再生不定芽研究,试图建立白沙枇杷成熟子叶再生体系,为以后通过基因工程改良枇杷品种奠定基础.     

梨成熟胚子叶不定梢诱导

获得了白梨中鸭梨和砂梨中晚三吉梨成熟胚子叶的再生不定梢。２个品种达到最高不定梢再生率的培养基都是１／４ ＭＳ大量元素,附加生长调节剂５ｍｇ．Ｌ＾－１ＢＡ和０．５ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ,再生率分别达到９３．３％和１００％。     

肥城桃幼子叶不定植株再生

以我国重要的名特优肥城桃为试材,基本培养基为ＭＳ,细胞分裂素有ＢＡ和ＴＤＺ,生长素有ＩＢＡ和２,４－Ｄ。ＬＨ和蔗糖都分别选用２种浓度,共设计７个处理。结果表明以ＢＡ５ｍｇ／Ｌ,ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ,ＬＨ５００ｍｇ／Ｌ,蔗糖３％的培养基诱导子叶不定梢再生率最高,达７８％,其他６种不同处理,子叶不定梢再生率都很低。     

油松成熟胚的不定芽诱导及植株再生试验

以油松成熟种胚为材料,研究不同培养基、不同激素水平及光照条件对油松不定芽诱导的影响。结果表明：在光照培养条件下,诱导油松不定芽的最佳培养基为DCR＋2.0mg/L 6-BA＋0.1mg/L NAA,诱导率达到36%。幼苗在1/2DCR＋0.1mg/L NAA＋0.1mg/L IBA＋0.1mg/L KT培养基上能生根并形成完整植株,诱导率达到25%。     

小白菜子叶诱导不定芽再生植株

以小白菜带柄子叶为外植体，通过四种细胞分裂素ＢＡ，ＫＴ，ＺＴ，２ｉＰ的不同浓度及配比，诱导带柄子叶直接产生了不定芽。结果表明，单独使用较高浓度的各种细胞分裂素都能诱导不定芽的形成。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0.5~2.0 mg/L 6-BA、0.1~0.5 mg/L IAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0~0.5 mg/L IAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0.5~2.0 mg/L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当 IAA浓度在0.1~0.5 mg/L 时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA 2.0 mg/L、IAA 0.3 mg/L的诱导效果最好,分化率高达86%。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100.0%。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;不定芽生根最佳培养基为MS+0.1 mg/L IAA。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0．5～2．0mg／L6-BA、0．1～0．5mg／LIAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0～0．5mg／LIAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0．5～2．0mg／L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当IAA浓度在0．1,-0．5mg／L时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6．BA2．0mg／L、IAA0.3mg／L的诱导效果最好,分化率高达86％。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100．0％。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0-3mg／LIAA;不定芽生根最佳培养基为MS＋0．1mg／LIAA。     

莱阳矮樱桃成熟胚子叶不定梢诱导研究

中国樱桃是落叶果树中果实成熟最早的树种。莱阳矮樱桃是中国樱桃的一个矮化品种，具有很高的开发利用价值。它既可以直接用以栽培生产，也可以用做欧洲甜樱桃的砧木，是一个品种和砧木兼用型优良品种，但其果实小，不耐贮运，迫切需要改良。樱桃的常规杂交育种困难：一是得到杂交种子困难，樱桃花经人工去雄授粉杂交。结实率非常低；二是育苗困难；杂交种子必须在果实采收后立即湿藏，然后经低温层积处理．翌年播种出苗，而且常规杂交育种周期长。     

甜玉米成熟胚的组织培养及其植株再生研究

以45种甜玉米为材料,对成熟胚愈伤组织的诱导和继代培养、植株再生、再生苗移栽等方面进行了研究。45种基因型玉米成熟胚经诱导多可产生愈伤组织,但各种基因型之间愈伤组织诱导率差异较大,变异范围为0~100%。不同基因型愈伤组织的增殖力也有显著差异。将愈伤组织转入分化培养基,选系B12-2-2和A50可再生出完整植株。     

燕麦成熟胚的组织培养及植株再生

以燕麦成熟胚为外植体,通过对不同基因型、培养基的激素种类和配比、盾片放置方式的研究,探索影响燕麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的因素.结果表明:基因型对燕麦愈伤组织的诱导及分化有显著影响;不同基因型材料诱导愈伤及分化所需激素及其比例不同,‘白燕2号’和‘陇燕3号’的最佳诱导培养基为MS+4mg/L 2,4-D+1mg/L NAA,分化培养基分别为MS+0.4mg/L NAA+0.2mg/L KT+1.0mg/L 6-BA和0.8mg/L NAA+0.8mg/L KT+1.0mg/L 6-BA;‘丹麦444’的最佳诱导培养基为MS+2mg/L 2,4-D,分化培养基为0.2mg/LNAA+0.4mg/L KT;接种时将成熟胚盾片朝下直接接触培养基放置,可获得更高的诱导率;‘陇燕3号’的成熟胚有利于燕麦再生体系的建立.     

桃幼胚子叶不定芽发生的初步研究

以奉化‘玉露'和‘湖景蜜露'桃为试材,分别在盛花后45 d和55 d采集桃幼胚,以MS+2% 蔗糖+0.75% 琼脂为基本培养基,其中加入不同浓度配比的NAA和BA为调节激素.并置培养基于(26±1) ℃,光照强度2000～3000 lx,16 h/8 h光暗周期的环境下,研究激素配比、品种、取样时间对桃子叶再生能力的影响,并对不定芽发生部位进行了观察.结果表明:NAA 0.25 mg/L+BA 5.0 mg/L、NAA 1.0 mg/L+BA 5.0 mg/L、NAA 0.50 mg/L+BA 10.0 mg/L 3种激素配比有利于桃子叶再生;‘玉露'的再生能力较高于‘湖景蜜露',盛花后55 d的幼胚子叶比花后45 d的幼胚子叶稍易再生;桃幼胚子叶不定芽可产生于子叶的背茎面、向茎面等各部位.     

不同基因型对小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生的影响

以26种不同基因型小麦成熟胚为外植体，采用1种诱导培养基、3种分化培养基，研究了不同基因型间愈伤组织诱导及植株再生的遗传差异．结果表明，不同基因型间出愈率及植株再生率差异显著，豫麦21号在26个小麦品种中表现最佳，3种分化培养基的分化效果差异明显．     

早熟优质新品系—黄水蜜桃的选育研究

从天然杂交种的216株实生后代中选出了早熟优质品系黄水蜜，其平均单果重160g，最大果重280g，果肉细腻，硬溶质，浓甜有香味，离核，该品系品质优良，丰产性好，适应性强，5年生树平均产量可达23400kg.hm^-2以上，综合性状超过对照品种。     

不同中晚熟水蜜桃品种的品质性状评价

为调整浙江省水蜜桃品种结构、延长供应期,并利于产地合理选择适宜品种,以浙江2个主栽品种黄肉桃锦绣黄桃和白肉桃奉化玉露为对照,对比研究4个日本引进品种清水白桃、秋白桃、新川中岛白桃和黄金桃以及2个国内品种秋玉露和徐蜜果实单果质量、果实大小、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸、还原性糖、有机酸、主要香气组分及其含量等生理指标,并结合品种生物学特性作出评价.结果表明:黄肉桃品种黄金桃风味品质优于对照品种锦绣黄桃,其可溶性固形物含量高,可滴定酸含量低,总香气组分含量高,但个别年份始花期可能会遭遇晚霜冻;3个日本白肉桃品种的果实大小、固酸比和贮藏性显著优于对照品种奉化玉露,特别是清水白桃香气最浓;2个国产品种徐蜜和秋玉露除果实大小和贮藏性优于奉化玉露外,其他风味品质无显著差异,而徐蜜质地不够细腻.     

桃叶片再生不定芽的研究

【目的】研究桃叶片再生不定芽的影响因子,建立并优化叶片再生体系。【方法】以桃品种"布目早生"、"甜桃王"、"瑞江"和优系"97-8-4"组培苗叶片为试材,研究基因型、叶龄、叶片不同部位、基本培养基及生长调节剂对不定芽再生的影响。【结果】不同基因型叶片的不定芽再生率差异较大,"97-8-4"和"甜桃王"不定芽再生率均较高,"布目早生"次之,"瑞江"的叶片不能再生;叶片在不同培养基中再生不定芽的效果不同,以LP培养基的再生效果较好;不同成熟度的叶片再生不定芽的能力不同,完全展开幼嫩叶片的再生效果较好;叶片不同部位产生不定芽的能力不同,叶柄和叶片基部的再生效果较好;叶片暗培养时最适的生长调节剂组合为2.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,光培养时最适的BA质量浓度为4.0~6.0 mg/L,BA与NAA适宜的质量浓度比为30∶1~60∶1。"97-8-4"、"甜桃王"和"布目早生"完全展开的幼嫩叶片在最适培养条件下的不定芽再生率分别为18.33%,16.67%和13.33%。【结论】桃叶片再生不定芽受内外因素的共同影响,基因型和叶片外植体的生理状态是不定芽再生的关键内在因素,培养基及附加的生长调节剂是不定芽再生的关键外在因素。     

枸杞叶片再生植株体系的建立

以"宁杞2号"为试材,研究了激素浓度、叶片生理状态和光照条件等因素对叶片再生的影响,建立了枸杞叶片外植体的不定芽高频再生体系。研究结果表明:以顶部充分伸展的35d叶龄的无菌苗叶片为外植体,再生效果好。将此类叶片放在含1 0mg L6-BA和1 0mg LIBA的1 2MS分化培养基上,暗培养8d后转到光下培养,28d后可见到不定芽不经过或经过很少的愈伤组织阶段,直接从叶片上分化产生,出现的高峰期在接种后3545d,芽分化率高达90 0%以上。待小芽长至1～2cm后将其从叶片上剪下,转到生根培养基(1 2MS+0 6mg LNAA+0 2mg LIBA)上得到完整植株。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

不同质量浓度2,4-D对硬粒小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生的影响

以5种硬粒小麦成熟胚为外植体,研究了其在9种不同诱导培养基、2种不同分化培养基上的出愈率、诱导愈伤组织质量及分化率的差异.结果表明:在小麦愈伤组织的诱导阶段,当2,4 D的质量浓度在2.5～4.0mg·L-1时,5种小麦的愈伤组织均较好;在小麦愈伤组织的分化阶段,2,4 D质量浓度的变化对不同小麦愈伤组织分化的影响效果不同,但缺乏规律性;小麦的出愈率与愈伤组织质量无明显关系.     

加工番茄子叶和下胚轴离体植株再生的研究

以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 m g/L ZT+0.05 m g/L IAA培养基为最好,BO 2品种子叶和下胚轴的出芽率分别为32.7%和24.5%,BO 4品种的分别为37.3%和28.2%;在不同浓度的6-BA和IAA组合中,诱导BO 2外植体出芽率最高的培养基是M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率分别为27.3%和14.5%;诱导BO 4品种子叶和下胚轴出芽率最高的培养基分别为M S+1.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/LIAA和M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率均为28.2%;在M S+0.1 m g/L IAA培养基上,加工番茄BO 2再生芽1周左右就能长出根,形成完整的小植株。     

四个马铃薯品种幼茎段再生技术的研究

以4个马铃薯栽培品种为试材,进行了其茎段的离体再生研究。结果表明,东农303、夏波帝、鄂1 号茎段愈伤组织最佳诱导培养基为MS+6-BA 3．0 mg／L+NAA 0．01 mg／L;费乌瑞它为MS+6-BA 3．0 mg／L+ NAA 0．1mg／L,愈伤组织的诱导率均可达100％。费乌瑞它和鄂1号不定芽分化诱导的最佳培养基均为MS+ 6-BA 2．0 mg／L+NAA 0．2 mg／L;东农303为MS+6-BA 2．0 mg／L+NAA 0．1 mg／L:夏波帝为MS+6-BA 2．0 mg／L+NAA 0．3 mg／L,其不定芽分化率分别达96．7％．96．7％,83．3％和80．0％。各品种不定芽的诱导生根率均为100％,试管苗移栽成活率为95％。