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小鼠卵母细胞的乙醇激活 总被引:15,自引:0,他引:15
昆明鼠卵母细胞hCG注射后18-19h用体积分数为7%的乙醇作用5-6min,能够获得较为理想的激活效果,激活率高达90%。乙醇激活处理时,卵丘细胞以及细胞外Ca^2+,Mg^2+的有无对卵子的激活效果均无显著影响。 相似文献
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《江苏农业科学》2017,(22)
在猪卵子的体外生产方面,关于卵子的体外成熟和体外受精技术目前还存在着不足,特别是猪的受精卵体外生产方面存在复杂的细胞质成熟、多精子侵入率较高以及前核形成受到抑制等问题。为改善猪卵子体外成熟体系,将转化生长因子β(transforming growth factor-β,简称TGFβ)添加到体外成熟的培养液中,研究TGFβ对裸卵和卵丘卵母细胞复合体成熟率的影响。在没有添加TGFβ的体外成熟培养液中,裸卵和卵丘卵母细胞复合体被成熟培养24 h,结果没有卵子达到M-Ⅱ时期,但是在添加TGFβ的体外成熟培养液中,观察到有卵子达到M-Ⅱ时期。另一方面,当卵丘卵母细胞复合体在体外成熟培养时,将TGFβ添加到不同培养阶段(0~24 h或24~48 h)的培养液时,卵子的成熟率没有差别。对裸卵在体外成熟培养24 h时,当在前半期添加TGFβ时(0~24 h),卵子的成熟率为59%;当在后半期添加TGFβ时(24~48 h),卵子的成熟率为57%。同样在裸卵组中,当在全期添加TGFβ时(0~48 h),卵子的成熟率为27%;当无添加TGFβ时,卵子的成熟率为38%。前2组与后2组相比,卵子成熟率有显著差异。 相似文献
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[目的]探讨亮甲酚蓝(BCB)染色对水牛卵母细胞体外受精及孤雌激活胚胎发育的影响。[方法]卵丘卵母细胞复合体(COCs)在体外成熟培养前用浓度26μmol/L的亮甲酚蓝染色90 min,然后根据卵母细胞胞质蓝色的有无分为阳性(BCB+,蓝色)和阴性组(BCB-,不着色)。以未经染色处理的COCs为对照组,控制对照组卵母细胞在含0.4%牛血清白蛋白(BSA)的杜氏磷酸盐缓冲液(DPBS)中孵育90 min。体外成熟培养后统计各组的成熟率、体外受精和孤雌激活后的发育率。[结果]BCB+组的成熟率(65.70%)显著高于对照组(59.86%)、控制对照组(58.42%)和BCB-组(48.86%)。在体外受精后的囊胚发育率方面,BCB+组(27.08%)和对照组(25.49%)差异不显著,但显著高于控制对照组(20.50%)和BCB-组(8.45%)。在孤雌激活后的囊胚发育率方面,BCB-组显著低于其他各组,但BCB+组、对照组以及控制对照组之间无显著差异。[结论]亮甲酚蓝染色筛选出的阳性卵母细胞具有较好的核成熟发育潜能,但并不能显著提高卵母细胞体外受精及孤雌激活后的胚胎发育率。 相似文献
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重组牛生长激素对山羊卵泡卵母细胞体外成熟的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
将307枚A、B级卵丘-卵母细胞复合体(COC)分别培养于:改良TCM199+FSH(10μg/ml)+LH(20μg/ml)+20%NCS(A液)、A液+重组牛生长激素(rbGH)15ng/ml、改良TCM199+hCG(20μg/ml)+rbGH+20%NCS三种培养基中,获得531%、679%和635%的成熟率。结果表明,rbGH对山羊卵泡卵母细胞的体外成熟是有益的。 相似文献
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牦牛体外胚胎培养作为辅助生殖策略,能够有效提高其繁殖能力。为研究牦牛卵母细胞体外培养过程中不同的处理方式对孤雌激活胚胎发育质量的影响,10月份采集5~8岁健康母牦牛卵巢,抽吸法收集卵母细胞进行体外成熟诱导,设置卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexs,COCs)和裸卵2个试验组;TCM199培养时间分别为24、36 h;以及体外培养12 h的COCs,消化之后再移入TCM199培养12 h)分别进行孤雌激活,在体外进行孤雌胚胎培养,统计卵裂率和囊胚率。结果显示,牦牛COCs的孤雌激活胚胎发育率显著低于裸卵(P<0.05),且后期出现脱卵丘细胞现象;COCs在TCM199中培养24 h的孤雌胚胎卵裂率明显高于培养36 h的处理组(P<0.05);裸卵再培养之后卵母细胞成熟率低、进行孤雌激活的卵裂率极低,且大部分发生贴壁。以上结果表明,体外培养24 h的COCs经透明质酸酶消化为裸卵的孤雌激活效果最佳,其卵裂率最高,囊胚率最高。研究结果为揭示牦牛卵母细胞孤雌激活前的不同处理方式与孤雌激活胚胎的发育质量提供了依据,可为优化卵母细胞体外培养、提高孤雌激活... 相似文献
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屠宰山羊卵母细胞的体外成熟培养 总被引:3,自引:0,他引:3
屠宰白山羊卵巢在25~35℃下于2~3小时运回实验室。每个卵巢获可培养卵丘细胞-卵母细胞复合体(COC)042个(193456);可培养COC在M199+hCG1IUml+17-β-雌二醇1μgml+牛血清白蛋白10mgml+庆大霉素50IUml的培养微滴中于5%CO2、空气、饱和湿度或标准气(5%CO2、5%O2、90%N2)、饱和湿度,39℃培养24~26小时,卵母细胞成熟率为903%(186206)。成熟卵母细胞体外受精率为715%(133186)。结果表明此培养系统适合于屠宰白山羊卵母细胞的体外成熟培养 相似文献
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分析了影响牛体外成熟卵母细胞电激活的主要参数,初步建立了电激活的实验程序。结果表明,卵母细胞激活率随着卵龄的延长、电场强度的增加以及电脉冲次数的增多而升高,含Ca2+、Mg2+离子的电激液显著高于非电解质液。以0.3mol/L甘露醇+100μmol/LCaCl2+100μmol/LMgCl2为电激液,施加1.6kV/cm、160μs,3次电脉冲间隔15min,激活率、卵裂率、囊胚发育率分别为86.0%,86.5%及48.9% 相似文献
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按白山羊卵丘细胞—卵母细胞复合体(COC)的细胞质密度的不同,将其分成A、B两个级别:A级COC细胞质特别致密;B级COC细胞质比较致密。将A级和B级COC分别放入相同的环境条件下培养24~26小时。A、B两级COC的卵母细胞成熟率差异极显著(t=3.1625,P<001)。表明白山羊COC的细胞质密度与卵母细胞体外培养成熟率呈极显著正相关。A级和B级COC经体外成熟培养后,其成熟卵母细胞的体外受精率差异不显著。 相似文献
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以mTCM-199添加抗生素为对照组,以分别添加0.5μg/mL川穹嗪(1igustrazine,Lig)和0.1μg/mL小檗碱(berberine,BR)为试验组,初步探讨川芎嗪、小檗碱对猪卵母细胞体外成熟效果的影响,以期提高猪卵母细胞体外成熟率。试验结果表明:以卵丘扩散和第一极体排出率分别作为猪卵母细胞体外成熟的判断标准,Lig组和BR组均显著高于对照组(P〈0.05),Lig组和BR组间无显著差异(P〉O.05)。结论:川芎嗪和小檗碱对猪卵母细胞体外成熟具有一定的促进作用。 相似文献