四君子汤对家兔脾虚症调整作用的实验研究

为了探讨四君子汤对脾虚症的治疗作用，根据中兽医“苦寒之药损其脾胃”的理论，利用大黄煎剂复制出家兔脾虚症模型，用四君子汤治疗，结果表明：四君子汤治疗能解除脾虚症的临床症状，使实验家兔体重增加，体温回升，血清木糖吸收率，血浆胃泌素，血浆ｃＡＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ，淋巴细胞转化率，Ｅ－玫瑰花环形成率等升高，血清胆碱酯酶活性，血浆胰高血糖素降低。说明四君子汤对脾虚症有良好的调整作用。     

加味四君子汤对脾虚犬生理生化指标及消化吸收功能的影响

【目的】探究加味四君子汤对脾虚犬相关指标及功能的影响,为临床脾虚犬的治疗提供参考。【方法】选择24只1岁龄的比格犬,随机平均分为4组,分别为对照组、脾虚组、自然恢复组、加味四君子汤恢复组。对照组犬饲喂基础饲粮;其余3组犬先饲喂基础饲粮并每天灌喂6 mL/kg番泻叶水煎液,上下午各1次,构建脾虚模型。模型构建成功后,将脾虚组犬解剖采样,加味四君子汤恢复组饲喂添加加味四君子汤的饲粮(每50 g添加1 mL),自然恢复组饲喂基础饲粮。分别在第0,7,14天采血,测定血常规指标(白细胞(WBC)数、淋巴细胞(LYM)数、中性粒细胞(Gran)数、红细胞(RBC)数、血红蛋白(HGB)含量、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)数),并分离血清测定生化指标(丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、胆红素(TBIL)含量)以及D-木糖含量。第14天,全部犬解剖采集小肠和胰腺组织,观察小肠形态并测定胰腺消化酶活性。【结果】番泻叶水煎液灌喂第7天,试验犬出现脾虚证候群,表明脾虚模型构建成功。第0天时,各组犬各类指标均无显著差异。第7天时,与对照组相比,脾虚犬体质量极显著降低(P0.01);血液中WBC、LYM数量,血清TP含量及胰腺组织中淀粉酶、脂肪酶、胃蛋白酶活性显著降低(P0.05),RBC数量、HGB含量、HCT及血清ALB、GLU、D-木糖含量极显著降低(P0.01),ACT活性显著升高(P0.05)、胆红素含量极显著升高(P0.01)。电镜观察发现,脾虚组犬小肠绒毛稀疏且部分断裂、缺损,细胞器结构损伤。第14天时,脾虚犬经加味四君子汤治疗后,各项指标均恢复到对照组水平。【结论】加味四君子汤能够使脾虚犬的生理生化指标及消化吸收功能恢复正常,对犬脾虚证有明显治疗效果。     

麦麸阿魏酰低聚糖对大鼠肝脏抗氧化功能的影响

为探讨麦麸阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs)对大鼠肝脏组织抗氧化功能的影响,选取40只健康断奶大鼠,随机分为5组,包括空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(w(Vc)=100 mg/kg)、低剂量组(w(FOs)=20mg/kg)、中剂量组(w(FOs)=40mg/kg)和高剂量组(w(FOs)=80mg/kg)。试验期为21d,每日定时灌胃。试验结束后,收集肝脏组织,通过酶联免疫吸附试验法测定其抗氧化相关指标,利用RT-PCR和Western Blot技术分别分析抗氧化相关基因的mRNA和蛋白表达量。结果表明:1)随着FOs剂量增加,谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性,谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(Glutamate cysteine ligase catalytie subunit, GCLC)、醌氧化还原酶1 (NAD (P)Hquinoneoxidoreductasel,NQO1)、CAT、SOD、GSH-Px和核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2p45-related factor 2,Nrf2)的mRNA表达水平二次方增加,Nrf2蛋白表达水平线性增加(P0.05),而8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)含量线性和二次方极显著下降(P0.01)。2)与Vc组相比,低剂量组中的GSH-Px活性和8-OHdG含量极显著降低(P0.01),而CAT的mRNA表达水平显著增加(P0.05);中剂量组中的总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性和8-OHdG含量显著降低(P0.05),而GCLC、NQO1、CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2的mRNA表达水平显著增加(P0.05);高剂量组中的SOD和GSH-Px活性和8-OHdG含量显著降低(P0.05)。综上,FOs可增强肝脏抗氧化酶活性,减少DNA氧化损伤,且可提高Nrf2及其下游抗氧化基因的mRNA表达水平,且以中剂量40mg/kg BW的使用剂量效果最佳。     

四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响

【目的】为开发优质高效的中药免疫增强剂提供参考依据。【方法】选用420只1日龄AA肉鸡,随机分成Ⅰ~Ⅶ7个处理组,每组设3个重复,每重复20只。试验鸡在新城疫Lasota系冻干苗免疫时分别用四君子汤和加味四君子汤煎剂按2.5,5.0,7.5 mL/L 3个添加量兑水自由饮用,连用4 d。于14,28和42日龄分别在鸡翅静脉采血,进行白细胞、淋巴细胞计数,α-醋酸萘酯酶染色(ANAE)和β-微量血凝抑制试验检测各项免疫指标,研究四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响。【结果】新城疫疫苗免疫时以2.5 mL/L剂量添加四君子汤或加味四君子汤,在14,28和42日龄均可极显著提高鸡的淋巴细胞数和血液中新城疫的抗体水平(P<0.01);四君子汤以5.0mL/L剂量或加味四君子汤以2.5 mL/L剂量添加均能显著提高白细胞数和T淋巴细胞百分率(P<0.05)。【结论】四君子汤和加味四君子汤均能有效提高鸡的特异性免疫和非特异性免疫水平。     

实验感染肝片吸虫对大鼠肝脏药物代谢功能的影响

将 8 5只体重 2 5 0～ 35 0 g的健康SD大鼠 (雌雄各半 )随机分成感染组 (n =5 5 )和对照组 (n =30 )。感染组大鼠每只一次经口感染 2 5个肝片吸虫囊蚴 ,每周采血测定血浆天冬氨酸转氨酶 (AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)及碱性磷酸酶 (ALP)活性。于感染后第 3,6 ,9,11和 13周分别宰杀 12只 (感染组 8只 ,对照组 4只 )大鼠 ,测定其肝微粒体蛋白、细胞色素P 4 5 0、细胞色素b5的浓度和肝脏药物代谢酶活性。结果表明 ,大鼠感染肝片吸虫后 ,血浆AST、ALT、ALP活性分别在感染后 3～ 7周、 3～ 5周、 5～ 13周极显著上升 (P <0 0 1) ;肝体比上升 ;CytP 4 5 0浓度、肝脏药物代谢酶活性极显著下降 (P <0 0 1)。提示肝片吸虫感染对大鼠肝脏药物代谢功能有明显的损伤作用。     

大豆异黄酮对大鼠肝脏脂肪酸代谢的影响

【目的】研究不同剂量大豆异黄酮对大鼠肝脏脂肪酸代谢的影响并对其机理进行探讨。【方法】试验选取40只6周龄SD大鼠并随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组10只。将不同剂量的大豆异黄酮(0、50、250、500 mg/kg)连续4周经口灌胃并记录大鼠每周体重变化;利用荧光定量PCR检测大鼠肝脏中固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)以及甘油三酯水解酶(ATGL)mRNA表达水平。【结果】与对照组相比,中、高剂量组大鼠体重极显著(P0.01)降低并呈剂量依赖性;低剂量组甘油三酯含量显著下降(P0.05),中剂量组总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量显著下降(P0.05),高剂量组甘油三酯和低密度脂蛋白含量极显著下降(P0.01);肝脏HE染色未见异常病理变化,油红O染色可见中、高剂量组脂滴明显减少;低剂量组大鼠肝脏中FAS、ACC1 mRNA表达量显著降低(P0.01),中、高剂量组FAS、SREBP-1C和ACC-1mRNA表达量显著降低(P0.05或P0.01),而PPARα和ATGL mRNA表达量显著升高(P0.05或P0.01)。【结论】大豆异黄酮可通过抑制SREBP-1c、ACC1和FAS,增加ATGL和PPARα的基因表达,从而影响肝脏脂肪酸代谢。     

脾虚证大鼠肝脏组织的病理变化

观察脾虚证模型大鼠肝脏组织病理学变化,探讨脾虚证中肝脏组织病理学变化与脾虚证时肝脏功能障碍间的联系。利血平复制大鼠脾虚证模型,运用组织病理学研究方法,从不同方面观察研究肝脏组织病理学变化。在研究中发现,脾虚证模型大鼠肝脏组织中出现淤血,细胞变性,萎缩,炎性细胞浸润等病理变化,而且肝脏组织中糖原储存量显著减少,门管区胶原纤维增生,细胞中酸性磷酸酶活性升高,透射电镜观察发现细胞质中蓄积大量的次级溶酶体,细胞核出现皱缩,细胞体积减小,线粒体肿胀。脾虚证中肝脏组织发生多种组织病理学变化,很有可能是引起脾虚证肝功能障碍的原因。     

吸烟对SD大鼠肝脏视黄醇代谢的影响

为从肝脏中筛选可靠、特异的视黄醇代谢发生显著改变及纤维化的生物标志物,建立无创伤性、准确的肝脏早期纤维化临床诊断方法,利用超高效液相色谱串联质谱联用仪进行吸烟后大鼠肝脏代谢蛋白组学分析,应用统计分析筛选潜在的生物标志物。结果表明:共鉴定出9个潜在生物标志物,分别为Ugt2b、Cyp1a2、Cyp3a2、Adh6、Adh4、Fasn、Cyp2c12、Hsd17b6、Csad,其中5个物质在模型组上调, 4个物质在模型组下调。该研究提示可建立一种无创伤性、用于肝脏视黄醇代谢发生显著改变及早期纤维化的诊断方法。     

三种党参不同炮制品对脾虚模型大鼠肠道菌群的影响

采用大黄苦寒泻下法建立大鼠脾虚模型,观察3种党参不同炮制品对脾虚大鼠肠道菌群的调节作用,设置正常组、模型组、党参生品组、米党参组、蜜党参组,连续给予对应的药品,检测试验前后肠道菌群的数量变化。结果表明,正常组、模型组大鼠肠道菌群数量无明显变化;米党参组大鼠造模成功后给药,肠道内双歧杆菌、乳杆菌数量增多,大肠杆菌、葡萄球菌数量减少;党参生品组、蜜党参组大鼠造模后给药,肠道内双歧杆菌、乳杆菌数量增多,且相比米党参组数量增加较少,大肠杆菌、葡萄球菌数量减少,恢复正常水平。3种党参不同炮制品对脾虚大鼠肠道菌群具有明显的调节作用,且米党参对脾虚大鼠的调节作用相比党参生品、蜜党参更优。     

痢菌净中毒对鸡肝脏抗氧化系统功能的影响

试验旨在探讨痢菌净急性中毒鸡肝脏和血清抗氧化系统功能的变化。将45只40日龄海蓝蛋鸡随机分为3组,对照组饲喂基础饲粮,低剂量组饲喂基础饲粮＋痢菌净400mg·kg^-1,高剂量组饲喂基础饲粮＋痢菌净600mg·kg^-1,分笼常规饲养,连续给药3d,给药期间观察鸡的临床表现,43日龄时剖杀、取血清和肝脏用于T-AOC,MDA,SOD指标的检测。试验结果,随着痢菌净给药量的增加,肝脏和血清中SOD和T-AOC呈下降趋势,MDA含量呈上升趋势,给药组与对照组比较差异均极显著（P〈0.01）。认为痢菌净中毒能够引起鸡肝脏抗氧化功能的改变、引起氧化应激,并造成肝脏和机体的损害。     

四君子汤对赛鸽抗氧化机能的影响

将72只45日龄赛鸽随机分成4组,I组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为试验组.饲养至52日龄时试验组灌服四君子汤(剂量分别为0.125、0.250、0.500g/L),每天2次,每次1 mL,对照组灌服等量生理盐水,连喂7d.并分别于52、59、66日龄心脏采血分离血清,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)活性.结果显示,四君子汤可以提高赛鸽血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,降低血清中丙二醛(MDA)含量,尤其以高剂量组作用较明显.证明四君子汤能够提高赛鸽抗氧化功能.     

加味四君子汤通过mTOR信号通路延缓小鼠脑组织衰老的机制研究

目的从ERK/MAPK通路的角度探讨加味四君子汤对脾虚犬小肠紧密连接蛋白表达的影响。方法将24只1岁龄健康比格犬随机均分为对照组、脾虚组、自然恢复组和加味四君子汤组。采用番泻叶药液复制脾虚模型犬,模型构建成功后,脾虚组犬处死采样,对照组和自然恢复组犬饲喂基础日粮,加味四君子汤组犬在基础日粮中添加2% (以生药计)加味四君子汤。试验期14 d。试验结束时各组试验犬解剖采集十二指肠、空肠和回肠,应用免疫组织化学(IHC)、荧光定量PCR、蛋白质印迹法(Western-blot,WB)检测相关指标。结果脾虚组试验犬小肠ZO-1和Occludin蛋白阳性表达水平,ZO-1和Occludin mRNA相对表达量,ZO-1、Occludin及ERK/MAPK相关通路蛋白表达量均显著低于对照组试验犬(P<0.01);经加味四君子汤治疗后试验犬上述指标较治疗前均显著升高(P<0.01),趋近对照组水平。结论试验犬脾虚证候与小肠紧密连接蛋白的低表达密切相关,小肠机械屏障功能降低;加味四君子汤可以显著提高脾虚犬小肠紧密连接蛋白的表达水平,其调节机制可能是通过活化ERK/MAPK通路来实现。     

过量铁和酒精对大鼠肝损害的电镜观察

20只Wistar断奶雌性大鼠随机分为酒精组、铁组,酒精/铁组和对照组。12个月后剖杀所有大鼠,取肝脏作电镜观察,用原子吸收分光光度计作肝内铁含量测定。结果表明,试验各组肝铁含量比对照组高8～15倍;超微病变为细胞核皱缩和异常;线粒体肿大变形,粗面内质网扩张和脂滴形成;枯否氏细胞和肝细胞内含大量铁质沉着体,多数沉积于溶酶体内;肝淋巴间隙和肝窦内有胶原束。     

肝复方联合榄香烯注射液介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌临床研究

目的 观察肝复方联合榄香烯注射液经血管介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法 将60例肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组采用肝复方联合榄香烯注射液经血管介入治疗,对照组单行化疗栓塞治疗。4周为1个疗程,治疗2个疗程。观察比较两组治疗前后的中医临床症状、瘤体大小变化、生活质量及不良反应。结果 治疗后两组瘤体疗效相当（P>0.05）,但治疗组中医证候疗效、生活质量改善均优于对照组（P<0.05）,且治疗组不良反应明显低于对照组（P<0.01）。结论 肝复方联合榄香烯注射液介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌疗效确切,可改善患者临床症状、提高生活质量,安全可行,值得临床推广。     

加味四君子汤对直肠癌术后脾胃气虚证患者化疗减毒增效的临床研究

目的 研究直肠癌术后脾胃气虚证患者行FOLFOX-7化疗期间联合加味四君子汤治疗对化疗增效和毒副反应的影响。方法 将70例直肠癌脾胃气虚证患者随机分为观察组和对照组,每组各35例,两组均接受全直肠系膜切除术（total mesorectal excision,TME）,术后观察组行FOLFOX-7化疗联合加味四君子汤治疗,对照组单纯行FOLFOX-7化疗。比较两组临床疗效和免疫功能指标,记录毒副反应发生情况,采用酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、酸性成纤维细胞生长因子（acidity fibroblast growth factor,aFGF）及碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）肿瘤生物学指标。结果 治疗后观察组腹胀、神疲、纳呆、便溏及中医证候总分均显著低于对照组（P<0.05）;观察组和对照组肿瘤控制率分别为97.14%和88.57%,差异无统计学意义（P>0.05）;观察组治疗后CD3⁺、CD4⁺及CD3⁺/CD4⁺显著高于治疗前和对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组治疗后VEGF、aFGF及bFGF水平显著低于治疗前和对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组胃肠道反应、白细胞降低及中性粒细胞降低毒副反应的严重程度较对照组显著减轻,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 FOLFOX-7化疗期间联合加味四君子汤用于直肠癌脾胃气虚证TME术后治疗,能显著减轻毒副反应,提高治疗效果,这可能与加味四君子汤改善机体免疫功能有关。     

中药补肾方联合恩替卡韦对乙肝患者肝纤维化、炎症反应及免疫功能的影响

目的 探讨中药补肾方联合恩替卡韦治疗对乙肝患者肝纤维化、炎症反应及免疫功能的临床观察。方法 将60例乙肝患者随机分为联合组和单药组,每组各30例,单药组给予恩替卡韦片口服治疗（0.5 mg/次,1次/日,连续治疗6个月）,联合组在此基础上给予中药补肾方口服治疗（1剂/日,早晚各服1次,连续治疗6个月）。对比两组患者治疗3、6个月时的中医临床证候积分、血清中肝纤维化指标、外周血中免疫细胞含量及血清中细胞因子含量情况。结果 治疗3、6个月后,两组患者中医临床证候积分均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者外周血中CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均升高,联合组升高程度高于单药组,CD8⁺均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者血清IL-15、IL-16、TGF-β均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 中药补肾方联合恩替卡韦治疗能有效改善乙肝患者的临床证候,能够调节免疫应答、炎症反应,以及能延缓肝纤维化,值得临床作进一步推广。     

脾虚症家兔胃、肠、肝、脾超微结构与微量元素含量

用能量色散ｘ射线分析仪（ＥＤＡＸ）、电镜对脾虚症模型家兔进行了超微结构和微量元素研究。结果为：扫描电镜下脾虚症模型家兔胃肠有不同程度的器质性变化，透射电镜下胃、肝、脾主要表现为线粒体肿胀，嵴大部分或全部破坏，有的甚至空泡变性，内质网脱落等超微结构变化。ＥＤＡＸ测定发现胃、肠、肝、脾组织中Ｃｕ、Ｆｅ、Ｚｎ３种元素量变明显。因此，认为脾虚时胃、肝、肠、脾组织线粒体的病理变化可作为其形态学依据，而微量元素Ｃｕ、Ｆｅ、Ｚｎ的变化或许是脾虚症发生的物质基础。     

单色光对脂多糖应激后肉鸡脾脏组织结构及脾细胞免疫功能的影响

本试验研究了以单色光为光源,对饲养在不同单色光下的肉鸡注射脂多糖(LPS)后,肉鸡脾脏组织结构及脾细胞免疫功能的变化。结果表明:蓝光组的脾小节直径和脾动脉周围淋巴鞘面积比红光组分别显著增加62.4%和49.1%P<0.05);蓝光可以抑制免疫应激造成的细胞因子IL-1β水平升高,与白光组相比显著降低178.4%(P<0.05);并可显著提高脾淋巴细胞对ConA和LPS的增殖反应,与红光组相比分别高出96.6%和76.3%(P<0.05)。结果显示蓝光可以明显改善肉鸡的免疫功能,并对免疫应激反应具有缓解作用。     

过量铁和酒精引起大鼠肝损害的病理组织学变化

应用Ｈ．Ｅ．Ｐｅｒｌ＇ｓ，ＶａｎＧｉｅｓｏｎ和ＯｉｌＲｅｄＯ等染色法和光镜观察结果表明：酒精组的肝小叶中央静脉周围肝细胞脂肪变性；铁组的肝细胞和枯否氏细胞含大量铁质颗粒，单个细胞坏死，并出现局灶性炎症；酒精／铁组的小叶中央静脉周围与汇管区周围的肝细胞内积有大量铁质沉着体，结缔组织纤维化，并由汇管区逐渐扩展到小叶中央，呈铁沉着性肉芽肿。