抗性和敏感小菜蛾谷胱甘肽—S—转移酶和谷胱甘肽的比较

研究了抗性和敏感小菜蛾谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ＧＳＴｓ）在不同发育期的变化及有机磷类杀虫剂对虫体谷胱甘肽（ＧＳＨ）质量摩尔浓度的影响。结果表明：抗性和敏感小菜蛾ＧＳＴｓ比活力在各发育期中变化不大,但虫体ＧＳＴｓ总活力随虫体生长发育而显著增加,在４龄和蛹期达到最大值,抗性小菜蛾ＧＳＴｓ活力明显高于敏感小菜蛾。甲胺磷和水胺硫磷对敏感小菜蛾幼虫ＧＳＨ影响不明显,但可导致抗性小菜蛾ＧＳＨ质量摩尔浓度的显著降     

阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾Plutella xylostella(L.)谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响。用亚致死剂量的阿维菌素和高效氯氰菊酯处理小菜蛾敏感品系后，二处理组的CSTs活性比对照组分别增长了42％和70％；抗性品系经上述2种药剂同样处理后的活性比对照分别降低了45％和30％。对GSTs的动力学研究表明，敏感品系用高效氯氰菊酯处理后GSTs的Km值比对照降低了近40％，而阿维菌素处理后其Km值变化不大，说明高效氯氰菊酯处理后，GSTs对底物的亲和力明显增强；抗性品系中二处理组GSTs的Km值与对照无显著差异。     

乙草胺对玉米中谷胱甘肽转移酶的诱导作用

针对日益严重的除草剂乙草胺药害问题,利用生物化学方法,研究乙草胺浸种处理对不同玉米品种生长发育状况、谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽转移酶(GST)活力的作用。结果表明,乙草胺对不同玉米品种的安全性、GSH含量和GST活力存在差异,其中在乙草胺诱导浓度为40 mg.L-1时,对乙草胺抗性最高的玉米品种自交系Lx347的GSH含量和GST比活力增加量最多,且对叶部的增加作用最为明显。     

蛇床子素对小菜蛾幼虫的胃毒作用及对虫体内两种酶活性的影响

采用生物测定和酶活力测定方法,研究了蛇床子素对敏感品系小菜蛾Plutella xylostellaL.的胃毒作用及其对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明：蛇床子素对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL的蛇床子素处理萝卜苗叶片后饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37%,72 h时后小菜蛾幼虫的校正死亡率为93%。处理24 h时,LC50为1 521.25 mg/mL,处理48 h时,LC50为865.93 mg/mL。处理72 h时,LC50为515.5 mg/mL。不同浓度蛇床子素和不同时间处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力均产生了消长变化。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理16 h时,小菜蛾体内的GSTs活力最高为209.15 U.mg-1prot.min-1。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理4 h时,小菜蛾体内的AchE酶活力最高,为0.648 1 U.mg-1prot.min-1。各处理在24 h时,小菜蛾体内的GSTs活力和AchE酶活力均有明显的降低。说明蛇床子素对小菜蛾幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力重要的影响。     

外源SA对李花抗坏血酸-谷胱甘肽循环的影响

为研究外源水杨酸(SA)对李花抗坏血酸-谷胱甘肽循环以及对李花抗寒性的影响,以‘大石早生李’‘安哥诺李’2个品种为试材,以喷水处理为对照,研究了喷施适宜浓度的外源水杨酸(SA)对-2℃低温处理4h后2个品种的李花H_2O_2质量摩尔浓度以及对抗坏血酸-谷胱甘肽循环中酶及抗氧化物质的影响。结果表明:0.20、0.15 mmol·L~(-1)SA可以分别降低‘大石早生李’‘安哥诺李’的H_2O_2质量摩尔浓度,显著增强谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性,提高抗坏血酸(AsA)、谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、总抗坏血酸、总谷胱甘肽质量摩尔浓度和AsA/DHA、GSH/GSSG。低温胁迫下,AsA-GSH循环受到破坏,但喷施适宜浓度的外源SA可以显著增强李花的抗氧化酶活性,提高抗氧化物质质量摩尔浓度,降低李花的膜质过氧化作用,降低低温对细胞膜的破坏,维持AsA-GSH循环系统的稳定性,从而一定程度上提高李花的抗寒性。     

苦参碱对小菜蛾幼虫毒力测定及其对害虫体内2种酶活性的影响

采用生物测定和酶活力测定方法，研究苦参碱对小菜蛾Plutella xylostella L．的胃毒活性及其对幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。试验结果表明：苦参碱对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2mg／mL苦参碱处理叶片饲喂小菜蛾幼虫12h校正死亡率为37．93％，72h后小菜蛾幼虫的校正死亡率为95．83％。不同质量浓度苦参碱处理小菜蛾幼虫后，幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）和乙酰胆碱酯酶（AchE）活力与对照相比均产生波动。经125×10 -3mg／mL苦参碱处理4h，小菜蛾体内GSTs活力最高，为1610．72U／（mg·min）。经125×10mg／mL苦参碱处理16h，小菜蛾体内的AChE酶活力最高，为10．63U／（mg·min）。各处理24h，小菜蛾体内GSTs活力和AChE酶活力均有明显降低。说明苦参碱对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶活力和乙酰胆碱酯酶活力有一定的影响。     

莠去津胁迫下外源谷胱甘肽对黄瓜幼苗生长发育的影响

为探讨外源谷胱甘肽（GSH）对土壤莠去津胁迫下黄瓜幼苗生长发育和生理方面的影响，设置不同质量浓度（0,50,100,200 mg/L）的外源GSH处理，模拟莠去津在土壤中残留量为0.20 mg/kg，进行黄瓜育苗试验。结果表明：在土壤莠去津胁迫下，100,200 mg/L外源GSH处理对黄瓜幼苗的单株鲜质量影响显著，100 mg/L处理后的幼苗叶面积比对照显著增大；100,200 mg/L外源GSH使黄瓜幼苗的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性、叶绿素含量、叶片净光合速率、GSH含量、谷胱甘肽还原酶（GR）活性、谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）活性显著升高，丙二醛（MDA）含量显著下降；100 mg/L外源GSH处理对幼苗的影响最显著，可减轻莠去津对黄瓜幼苗的药害。     

谷胱甘肽对盐胁迫下玉米幼苗抗氧化特性和光合性能的影响

以80mmol/L NaCl模拟盐胁迫,研究谷胱甘肽(GSH)对盐胁迫下‘滑玉14’幼苗叶片抗氧化特性和光合性能的影响。结果表明:盐胁迫显著提高叶片细胞质膜透性、丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸氧化酶(APX)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性、抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(AsA)质量摩尔浓度及叶绿素荧光参数非光化学猝灭系数(qN),显著降低叶绿素荧光参数PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、光化学猝灭系数(qP)和PSⅡ实际量子产额(Φ_(PSⅡ)),光合色素质量分数、光合速率和单株生物量干质量。这说明,盐胁迫对‘滑玉14’造成氧化胁迫,并对光系统Ⅱ的功能造成伤害。50mg/L GSH处理则可以显著提高盐胁迫下玉米幼苗叶片过氧化物酶(POD)、SOD、谷胱甘肽还原酶(GR)活性、GSH质量摩尔浓度、F_v/F_m、qP和Φ_(PSⅡ)、光合色素质量分数、光合速率和单株生物量干质量,并显著降低细胞质膜透性、MDA质量摩尔浓度和qN。上述研究结果说明,GSH处理可以提高玉米幼苗的抗氧化能力和光合性能,从而缓解盐胁迫造成的伤害。     

枯萎病菌侵染后棉苗体内谷胱甘肽含量的变化及其与抗病性的关系

枯萎病菌侵染后棉苗体内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量增加,叶片中GSH含量早期明显上升,后期下降;而根茎部组织中GSH含量逐步上升,后期达到最高水平.氟乐灵诱发处理可提高棉苗体内GSH和GSSG的含量,但是枯萎病菌侵染后GSH和GSSG含量的变化在抗、感病品种间及经氟乐灵诱发处理并表现出诱导抗性的棉苗和未处理棉苗间无显著差异.因此,GSH可能与棉苗对枯萎病的抗性及由氟乐灵诱发的诱导抗性之间无直接的关系.     

Cu(Ⅱ)胁迫下黑曲霉TL-F2谷胱甘肽系统的响应

以矿区筛选抗性黑曲霉(Aspergillus niger TL-F2)为材料,研究不同浓度(50、100、150、200、250、300 mg·L^-1)Cu(Ⅱ)对不同生长阶段黑曲霉谷胱甘肽系统(GSH/GPx)的影响。结果显示:随着Cu(Ⅱ)浓度增大,A.niger TL-F2生长量、可溶性蛋白含量呈降低趋势,丙二醛(MDA)含量则增加;谷胱甘肽系统中还原型谷胱甘肽(GSH)含量呈现上升趋势,而氧化型谷胱甘肽(GSSG)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)活力则呈现先增后降趋势;在金属浓度为150 mg·L^-1时GSSG含量达到最大为365.68 μmol·L^-1,GPx和GR活力分别在金属浓度为100 mg·L^-1时达到峰值,GSH/GSSG比值也随Cu(Ⅱ)浓度和处理时间的增加呈下降趋势。结果表明:在Cu(Ⅱ)作用下A.niger TL-F2菌体内GSH/GPx系统产生氧化应激反应,通过调节GSH、GSSG、GPx和GR的增减来抵御过量活性氧(ROS)胁迫;GSH/GSSG比值也可直观地反映Cu(Ⅱ)对A.niger TL-F2毒性大小。     

不同种群小菜蛾乙酰胆碱酯酶性质研究

小菜蛾乙酰胆碱酯酶的性质研究表明，小菜蛾各种群成虫与幼虫AChE活性相比，差异极显，成虫是幼虫的5～7倍；武汉种群小菜蛾成虫和幼虫AChE与底物的亲和力最小．小菜蛾谷胱甘肽-S-转移酶的性质研究表明，宣化、武汉、云南3个田间种群GST活性较高，明显高于台湾敏感品系；北京种群GST活性较低，与台湾敏感品系近似。     

小菜蛾对印楝素的抗性选育及生长适合度

用印楝素(Azadirachtin)对敏感品系小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]在室内进行抗性种群选育,经过12代次药剂汰选,获得抗性种群(R),与敏感品系(S)比较,抗性指数(RI)为8.29倍,小菜蛾对印楝素的抗性发展呈曲折上升。实验种群生命表结果表明:相对于敏感品系,抗性品系的幼虫期和蛹期延长,产卵量下降,抗性品系对敏感品系的相对适合度仅为0.543。     

广西小菜蛾对定虫隆的抗药性监测

从1997年下半年起,广西开始使用定虫隆防治小菜蛾。不同年份田间抗药性监测结果表明:2000年以前,小菜蛾对定虫隆仍敏感;2001~2002年小菜蛾对定虫隆的抗性指数为8.76~9.75,属低水平抗性;2003~2004年小菜蛾对定虫隆的抗性指数为20.41~21.25,已达到中抗水平;2002~2003年广西田间不同小菜蛾种群对定虫隆的抗性指数在11.43~28.14之间,达到中等水平抗性。在条件基本相同的情况下,田间药效试验结果为:2000年以前,5%抑太保乳油1 000~2 000倍液,药后7 d对小菜蛾的防效均在90%以上,2001年只有1 000倍液的防治效果达到90%以上,2002~2003年防效下降很快,到2004年,柳州、南宁试验点1 000倍液的防治效果均低于70%,显著低于前几年的防效。抗性监测与田间药效变化的结果基本一致。     

小菜蛾对沙蚕毒素类杀虫剂抗性的生化遗传分析

利用室内选育的小菜蛾抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系和敏感品系 ,研究了各杂交世代小菜蛾的生物学特性以及蛹期的乙酰胆碱酯酶 (AchE)和羧酸酯酶 (CarE)活性。结果表明 :杀虫双和杀螟丹的选择作用没有改变小菜蛾的性比、蛹重和羽化率等生物学特性 ;抗性品系和敏感品系的AchE和CarE活性没有明显差异。由此进一步证明AchE和CarE的活性变化不是小菜蛾对杀虫双和杀螟丹抗性的主要机理。     

东莨菪内酯对家蚕中肠组织GSTs活性的影响

[目的]探讨东莨菪内酯对家蚕中肠组织谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）活性的影响,为桑园使用东莨菪内酯防治虫害的安全性及家蚕抗性品系选育提供理论依据.[方法]采用毒叶法对家蚕进行添毒,测定东莨菪内酯对家蚕中肠组织GSTs活性的影响,并通过离体抑制试验求出东莨菪内酯对GSTs的抑制中浓度（IC50）.[结果]摄食不同浓度东莨菪内酯（0.026～0.104 mol/L）处理桑叶的家蚕表现出相似的中毒症状（吐液和拒食）,但在添毒36h后中毒症状完全消失.相对于正常的家蚕,摄食东莨菪内酯处理桑叶后家蚕中肠组织的GSTs比活力呈前期降低、中期升高、后期降低的变化趋势.不同浓度（0.001～0.016 mol/L）的东莨菪内酯均显著抑制家蚕中肠组织离体GSTs活性,且抑制率随东莨菪内酯浓度的增加而增加.东莨菪内酯对家蚕中肠组织GSTs的IC50为0.00474 mol/L.[结论]东莨菪内酯可抑制家蚕中肠组织GSTs活性.     

小菜蛾对杀螟丹抗药性的生化遗传研究

采用室内选育的小菜蛾对杀螟丹的抗性品系和敏感品系，研究了各杂交世代小菜蛾多功能氧化酶（ＭＦＯ），乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）和羧酸酯酶活性。结果表明：（１）抗性品系（抗性提高３５．５倍）多功能氧化酶环氧化活性比敏感品系高（１．８３倍），并随着杂交后代中对杀螟丹抗性水平的下降而降低；（２）抗药性品系和敏感品系的ＡｃｈＥ和ＣａｒＥ活性没有明显差异。     

山西小菜蛾抗药性研究

采用ＦＡＯ推荐的点滴法测定了山西太原、太谷、大同地区小菜蛾（ＰｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａＬ）对３种杀虫剂的敏感性。结果表明，对氰戊菊酯，太原和太谷地区，小菜蛾产生了高水平抗性，抗性指数分别为７２．４和５５．８倍。对马拉硫磷和敌敌畏的抗性只有太原地区产生了低水平抗性，其他地区抗性不明显。同时还进行了大量的药剂筛选试验。     

小菜蛾nAChR靶标敏感性与沙蚕毒素类药物的抗性关系

 【目的】研究抗杀虫双、杀螟丹和溴氰菊酯品系的神经乙酰胆碱受体及与它们对沙蚕毒素类药物的抗性间的关系。【方法】测定不同品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体与125I标记的α-银环蛇毒素的结合率。【结果】抗杀虫双、杀螟丹品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体对沙蚕毒素药物有显著的靶标不敏感性，它们与配体的结合率大约分别是敏感品系的66%和60%，在溴氰菊酯抗性品系中没有明显变化。【结论】神经乙酰胆碱受体对杀虫剂敏感性下降可能是小菜蛾对沙蚕毒素药物产生抗性的一种作用机理。     

Biochemical Mechanism of Chlorantraniliprole Resistance in the Diamondback Moth,Plutella xylostella Linnaeus

The insecticide chlorantraniliprole exhibits good efficacy and plays an important role in controlling the diamondback moth, Plutella xylostella Linnaeus. However, resistance to chlorantraniliprole has been observed recently in some field populations. At present study, diamondback moths with resistance to chlorantraniliprole (resistant ratio (RR) was 82.18) for biochemical assays were selected. The assays were performed to determine potential resistance mechanisms. The results showed that the selected resistant moths (GDLZ-R) and susceptible moth could be synergized by known metabolic inhibitors such as piperonyl butoxide (PBO), triphenyl phosphate (TPP) and diethyl-maleate (DEM) at different levels (1.68–5.50-fold and 2.20–2.89-fold, respectively), and DEM showed the maximum synergism in both strains. In enzymes assays, a high level of glutathione-S-transferase (GST) was observed in the resistant moth, in contrast, moths that are susceptible to the insecticide had only 1/3 the GST activity of the resistant moths. The analysis of short-term exposure of chlorantraniliprole on biochemical response in the resistant strain also showed that GST activity was significantly elevated after exposure to a sub-lethal concentration of chlorantraniliprole (about 1/3 LC₅₀, 12 mg L⁻¹) 12 and 24 h, respectively. The results show that there is a strong correlation between the enzyme activity and resistance, and GST is likely the main detoxification mechanism responsible for resistance to chlorantraniliprole in P. xylostella L., cytochrome P450 monooxygenase (P450) and carboxy-lesterase (CarE) are involved in to some extent.     

日本看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆的抗性机制

为明确抗性日本看麦娘种群对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆的抗性机制,研究了乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACCase)和乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)基因在抗性和敏感日本看麦娘种群内的差异,以及谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)的活性差异,同时测定了抗性种群AFT对不同的ACCase和ALS抑制剂类除草剂的交互抗性。结果显示:与敏感种群AH-7相比,抗性种群AFT的ACCase基因CT区的2027位氨基酸和ALS基因的574位氨基酸发生突变;AFT种群的GSTs活性经过精噁唑禾草灵和甲基二磺隆处理后明显增强,且显著强于敏感种群AH-7;抗性种群AFT对炔草酯、烯草酮、氟唑磺隆的抗性倍数分别为27.90、34.43、10.30,表现出高水平的抗性,对唑啉草酯、甲咪唑烟酸、双草醚的抗性倍数分别为5.49、6.42、5.01,表现出中等水平的抗性。经除草剂诱导后,植株体内基于GSTs代谢酶介导的代谢反应水平升高,加快植株对除草剂的代谢解毒反应;抗性种群AFT的ACCase基因和ALS基因中发生的氨基酸突变和GSTs活性的增强可能是其产生抗药性的重要原因。