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相似文献
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1.
辣椒基因组DNA提取与RAPD分析   总被引:27,自引:0,他引:27  
采用液氮-SDS法、SDS法和氯化苄法对辣椒的DNA进行了提取。结果表明:液氮-SDS法提取的DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱,其A260/A280在1.60~1.70之间,A260/A230在1.5~1.8之间,100mg叶子DNA产量为60~90μg。用该法提取的辣椒DNA适于进行RAPD分析。SDS法、氯化苄法不适于辣椒DNA的提取。  相似文献   

2.
RAPD标记检测蔬菜种子纯度中DNA提取方法研究   总被引:13,自引:3,他引:10  
对DNA提取方法的SDS法进行改进的研究结果表明:改进了的SDS法操作简便,操作过程可在1小时内完成,适于番茄,辣椒,黄瓜等蔬菜作物的基因组DNA提取,且宜于在种子纯度检测的RAPD分析中应用。  相似文献   

3.
提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法   总被引:41,自引:1,他引:40  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA.制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰.OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析  相似文献   

4.
提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法   总被引:8,自引:1,他引:7  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS-CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS-CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰。OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析。  相似文献   

5.
DNA提纯方法对6种甘蔗亚族植物RAPD的影响   总被引:19,自引:1,他引:18  
甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰RAPD扩增反应的主要成分。本研究以CATB法和SDS法为基础,着重对抗氧化剂(PVP等)、酶(蛋白酶K、RNaseA)和酚抽提等因素对提取DNA的质量及其RAPD的影响进行了比较筛选。结果表明:①甘蔗DNA提取质量和纯度与RNaseA、抗氧化剂等处理直接相关,蛋白酶K、CATB和SDS的处理无明显差异;②对于甘蔗RAPD反应,模板DNA中含有一定量的RN  相似文献   

6.
褐飞虱不同生物型基因组DNA的RAPD分析   总被引:14,自引:3,他引:11  
试验了两种DNA提取方法抽提褐飞虱基因组DNA的效果及其用所获得的DNA进行RAPD扩增的技术条件,结果发现,采用蚜虫DNA的提取方法(略有改进)来抽提高飞虱基因组DNA,并用S系列的随机引物、RAPD的通用反应体系及94℃变性,36℃退火和72℃延伸的扩增条件来对其进行随机扩增,可获得满意的效果,不同致害类群的群体间和同一致富类群的个体间的RAPD多态性均有差异,单雌纯化只能将个体间的差异缩小,  相似文献   

7.
几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析   总被引:12,自引:1,他引:11  
研究了适于茄子及其近缘野生种基因组DNA的提取方法,并对DNA初步进行了RAPD分析。结果表明:SDS-氯仿-异戊醇法不适于茄属植物DNA提纯,而改进的CTAB-酚-氯仿-异戊醇对其成株叶/芽即可获得较高产率及纯度的DNA;PCR反应扩增出不同片段,引物OPG—11扩增片段在栽培品种与野茄中无差异,而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。  相似文献   

8.
一种适合枣合酸枣基因组DNA的提取方法   总被引:7,自引:0,他引:7  
研究比较了CTAB法和SDS法在枣和酸枣基因组DNA提取中的效果,并分析了取样时间、部位、样品状况、抗氧化剂和不同纯化处理等对所提DNA质和量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明:用改良后的CTAB法优于SDS法,可有效地去除多糖,所提DNA的质和量均能满足PCR扩增要求。取样时间与部位对所提基因组DNA的质量无影响,但与产量有关,以旺盛生长期的幼叶或嫩梢尖为佳。样品采用液氧处理-70℃低温保存,  相似文献   

9.
棉花DNA的快速提纯   总被引:1,自引:0,他引:1  
棉花DNA的快速提纯陈翠霞,于元杰,王洪刚(山东农业大学农学系)关键词:棉花DNA;提取;纯化AMETHODFORISOLATIONOFCOTIONDNA¥Chencuixia;YuYuanjie;WangHonggang(Dept.ofAgrono...  相似文献   

10.
柿树带化和刺槐丛枝的PCR检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
根据植物菌原体16SrRNA基因序列,合成一对寡核苷酸引物,用SDS CTAB改进法直接提取田间发病的柿树带化病、刺槐丛枝病树和健康树皮层的DNA,用PCR方法成功地从病树DNA模板中扩增出约1.17kb的特异产物,经酶切进一步证实为植物菌原体16SrDNA.此项研究表明用特异合成的引物F16/R16,经PCR扩增可以快速灵敏地检测植物菌原体.  相似文献   

11.
在不同培养基、温度、碳源、氮源、pH值以及光照等条件,白术根腐病菌在PSA上生长和产孢最好,菌落直径为4.23cm,产孢量为34.14×107个/皿,在淀粉培养基生长最差,在WA培养基上产孢最差;温度在10~30℃适合菌丝生长和产孢,25℃菌丝生长和产孢最好,低于5℃或高于35℃均会对孢子产生及萌发产生抑制作用甚至造成孢子畸形;碳源以葡萄糖和蔗糖生长最好,产孢最适为蔗糖,淀粉最差;氮源以硝酸钾生长和产孢最好,牛肉膏次之,硫酸铵上生长最差,而尿素上产孢最差;pH5~9适于病原菌的生长,最适pH7.5,pH过高或过低对病原菌的生长均产生不利影响;病原菌在荧光下生长最好,产孢量也最多。孢子萌发的最适温度为28℃,最适湿度为相对湿度100%,孢子萌发的最适pH 7.5,高于pH 9不萌发,分生孢子致死温度为50℃。  相似文献   

12.
白头翁叶斑病病原菌生物学研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
对白头翁叶斑病病原菌银莲花壳二孢(Ascochyta anem ones Kab.et Bub.)生物学特性进行了研究。结果表明,病菌菌丝生长的最适培养基为白头翁叶煎汁+PDA,最适温度为20℃,最适pH为6,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为蛋白胨;分生孢子器形成的最适培养基为PSA,最适温度为25℃,最适pH为7~9,在黑暗下易于形成分生孢子器,最适碳源为乳糖,最适氮源为甘氨酸;病菌分生孢子萌发最适温度为25℃,pH在7~9较适,在光照下易于萌发,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为天门冬氨酸;分生孢子致死温度为47℃,10 m in。  相似文献   

13.
王英姿  张伟  赵明  刘学卿 《安徽农业科学》2013,41(11):4828-4829,4831
[目的]探究葡萄白腐病菌菌丝生长与产孢的条件。[方法]研究了不同营养、温度、pH及光照对葡萄白腐病菌菌丝生长及产孢和孢子萌发的影响。[结果]氮源中,氯化铵最利于菌丝生长,硫酸铵最利于病菌产孢;碳源中,葡萄糖和蔗糖最利于菌丝生长,蔗糖最利于病菌产孢;分生孢子在碳、氮营养液中均不能萌发,而果梗煮液最利于孢子萌发。适宜菌丝生长的温度范围为20~30℃,最适温度为25~30℃;适宜产孢温度范围为20~35℃,最适温度为30℃;适宜孢子萌发的温度范围为25~35℃,最适温度为28~32℃。适宜菌丝生长和产孢的pH范围是3~5,最适pH为3;适宜孢子萌发的pH范围为2~9,最适pH为3~5。光照对菌丝生长及孢子萌发无影响,但全光照能抑制病菌产孢。[结论]为葡萄白腐病的预警和防治提供了参考。  相似文献   

14.
培养条件对甘薯黑斑病菌生长与产孢量的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
在不同营养条件以及培养环境条件下,测试了甘薯黑斑病菌的生长速度以及产孢量。结果表明:甘薯黑斑病菌(Ceratocystis fimbriataEllis et Halsted)在13种供试培养基上均能生长,其中在番茄培养基上生长最好,在胡萝卜培养基上生长最差;分生孢子产孢量以在PDA培养基上最多,在玉米粉培养基上最少。菌丝适宜生长温度为25℃,在15℃下分生孢子产孢量最大。在全光照环境下生长最好,全黑暗下次之,光暗交替条件下较差,光照条件对黑斑病菌分生孢子产孢量没有明显差别。菌丝适宜生长的pH值范围为6~8,最适pH值为8,分生孢子最适产孢pH值为10。在真菌生理培养基上,以淀粉为最佳碳源,以酵母膏为最佳氮源。菌丝、分生孢子和子囊孢子的致死条件分别为52℃、5 min,47℃、5 min和50℃、5 min。  相似文献   

15.
利用正交试验设计,以膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.))生物活性物质——黄芪多糖质量分数为衡量指标,筛选出最佳外界诱导因素组合。结果表明:影响叶、茎多糖质量分数的最佳处理时间是9 d和6d;影响根多糖质量分数的最佳处理时间是6 d。影响叶多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地下部位9 d,影响茎多糖质量分数的最佳处理组合是硝酸银处理地下部位9 d,影响根多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地上部位6 d。黄芪多糖代谢途径的最佳外源诱导因素是硝酸银溶液,最佳处理部位是地下部分,最佳处理时间是6~9 d,最佳多糖质量分数变化检测部位是黄芪根部。  相似文献   

16.
对不同取材时期、消毒处理、基本培养基和激素组合配比等因素对油桃"华光"、"曙光"和"秦光"茎尖离体初代培养和试管增殖倍数的影响进行了研究,结果表明,3种油桃茎尖培养最适宜的取材时期为新梢萌发期,萌发新梢的顶端嫩芽的污染率低,利于成活。用75%酒精30 s 0.1%升汞1 min 饱和次氯酸钠5min对油桃茎尖进行消毒处理效果最好。适合的初代培养基组合为:华光和秦光G 6-BA 0.50 mg/L IBA0.50 mg/L,成活率分别为98.15%和72.34%;曙光G 6-BA 0.50 mg/L IBA 0.125 mg/L,成活率为91.72%。适合的增殖培养基组合为:华光和曙光G 6-BA 2.00 mg/L IBA 0.25 mg/L,平均有效芽数为2.36,2.89;秦光G 6-BA 1.50 mg/L IBA 0.50 mg/L,平均有效芽数为3.16。  相似文献   

17.
万俊杰  梁耀开  邓毛程 《安徽农业科学》2011,39(14):8600-8603,8685
[目的]利用食品废水培养枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS1-296产絮凝剂吸附Cu2+。[方法]以味精废水和啤酒废水作为替代培养基培养枯草芽孢杆菌AS1-296制备含γ-聚谷氨酸的絮凝剂,通过正交试验确定其最佳培养条件,对枯草芽孢杆菌产的絮凝剂进行了明胶-戊二醛交联固定处理,并对Cu2+进行吸附和解析研究。[结果]培养枯草芽孢杆菌AS1-296产絮凝剂的最佳条件为:pH为7,培养时间为48 h,啤酒废水与味精废水的体积比为15。红外光谱分析结果显示,絮凝剂主要由γ-聚谷氨酸和多糖组成。固定后的絮凝剂最佳Cu2+吸附条件为:最佳吸附pH为5,絮凝剂投加量为0.6 g,温度为40℃,Cu2+初始浓度为30 mg/200 ml,最大Cu2+吸附容量为4.1 mg/g。最佳Cu2+解析条件为:pH为2,最大解析率为81%。[结论]利用味精废水和啤酒废水作为主要原料,使培养枯草芽孢杆菌AS1-296产絮凝剂更具有经济和实用价值,真正实现了"以废治污"。 更多还原  相似文献   

18.
研究了木质层孔菌不同发酵条件对木聚糖酶、β-葡聚糖酶性能的影响,并对其酶作用特性进行了研究结果表明:木质层孔菌产木聚糖酶最适碳源为麸皮,氮源为蛋白胨,最适发酵温度为25℃;而产β-葡聚糖酶最适碳源为木糖,氮源为酵母膏,最适发酵温度为28℃。就产酶时间而言,在发酵前60 h菌株均不产生β-葡聚糖酶和木聚糖酶,在72 h才有微量的酶产生,到192~240 h两种酶均达到产酶高峰,并以216h产酶最高;两种酶的最佳缓冲液均为柠檬酸缓冲液,木聚糖酶的最适作用pH值5.0,最适反应温度为50℃,而β-葡聚糖酶最适作用pH值4.6,最适反应温度为60℃。  相似文献   

19.
用Logistic模型和Compertz模型分别拟合了180只陶寒杂种羊生长发育规律,其中以Compertz模型拟合的R2较大.用Compertz模型参数进一步估算出公羊和母羊的最大体质量分别为25.87 kg和22.64 kg,最大月增质量分别为4.23 kg和3.68 kg,拐点月龄分别为1.98月和2.43月,拐点体质量分别为12.94 kg和11.32 kg,瞬时相对增长率分别为44.35%和44.11%.  相似文献   

20.
黑龙江省玉米弯孢菌叶斑病菌生物学特性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为深入系统地研究玉米弯孢菌叶斑病菌病害的发病规律,对黑龙江省该病主要致病菌新月弯孢菌[Curvularia lunata(Wakker)Boed.]生物学特性进行了研究。结果表明:最适生长和孢子萌发温度为25~35℃,弯孢菌产孢适宜温度是25~30℃,其中30℃时菌落直径最大、孢子萌发率最高,产孢量为高峰(为产孢高峰)。在25℃条件下,相对湿度96%以上孢子开始萌发,随相对湿度的增加,萌发率也明显增加,分生孢子在水滴中萌发率最高。病原菌对酸碱度的适应范围较广,以pH6~8菌丝生长最适宜、产孢量最大;孢子萌发的适宜pH范围是5~8,最适pH为7。光照对菌丝体无显著影响,光暗交替有利于孢子的形成,光线对孢子萌发有抑制作用。  相似文献   

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