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一种木本果树基因组DNA提取方法研究 总被引:26,自引:0,他引:26
研究了一种可有效排除细胞内多酚类等杂质污染的简便、快捷、经济的果树基因组DNA提取方法.其改良策略是:在细胞核被裂解前去除细胞质中的多酚类等杂质,防止多酚类物质被氧化,从而排除多酚类等杂质的干扰.利用这一方法提取的柑桔、枇杷、梨、苹果、湖北海棠、桃、樱桃等7种果树基因组DNA均能被限制性内切酶完全消化,获得理想的Southern杂交结果,也可作为PCR模板应用,成功地进行特异性基因扩增和RAPD. 相似文献
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11种野生苹果种质资源RAPD标记研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用C.G.Alpha等的DNA微量提取法,提取了山荆子MalusbaccataBorkh.等11个苹果属植物野生种类的DNA,并用5对引物对所研究材料的RAPD标记进行了研究。探讨了叶片中富含多酚类化合物的苹果植物叶片DNA的提取及纯化方法,并初步建立了野生苹果RAPD标记的PCR反应条件。 相似文献
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RAPD是一种建立在PCR基础之上的新的分子标记技术,利用RAPD技术对不同年份采收的豇豆种子进行了研究从豇豆干种子中直接提取的基因组DNA可以用于RAPD分析在20种10bp随机引物中筛选出S207和S2082种引物,并获得了豇豆基因组DNA的指纹图谱筛选出的2种引物均只在1997年采收的豇豆种子的基因组DNA上扩增出1条DNA带研究结果表明,不同年份采收的豇豆种子在遗传性上相当一致,而豇豆种子的基因组DNA在贮藏过程中会受到损伤 相似文献
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褐飞虱不同生物型基因组DNA的RAPD分析 总被引:11,自引:3,他引:11
试验了两种DNA提取方法抽提褐飞虱基因组DNA的效果及其用所获得的DNA进行RAPD扩增的技术条件,结果发现,采用蚜虫DNA的提取方法(略有改进)来抽提高飞虱基因组DNA,并用S系列的随机引物、RAPD的通用反应体系及94℃变性,36℃退火和72℃延伸的扩增条件来对其进行随机扩增,可获得满意的效果,不同致害类群的群体间和同一致富类群的个体间的RAPD多态性均有差异,单雌纯化只能将个体间的差异缩小, 相似文献
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板栗基因组DNA几种提取方法比较研究 总被引:19,自引:0,他引:19
通过对板栗基因组DNA几种提取方法获得的DNA质量分析,表明改良SDS法是最为理想的提取方法,能满足RAPD及其他分子生物学研究的需要。 相似文献
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几种木本果树DNA的有效提取 总被引:67,自引:4,他引:67
提取高质量的DNA是有效开展分子生物学研究的前提。多糖污染是木本植物DNA提取中最常遇到的问题。多糖污染的DNA呈粘稠的胶状 ,不但给实验操作带来不便 ,更重要的是多糖对反应体系中的酶活性产生抑制作用 ,严重影响分子生物学研究的下游工作[1~3] 。很多多年生木本果树 ,即使其幼嫩组织多糖的含量也明显高于大田作物 ,所以 ,常规的DNA提取方法因不能有效除去多糖而在木本果树应用中受到限制。经典的CsCl梯度离心能有效除去柑桔等木本果树的多糖而得到高纯度的DNA ,但由于梯度离心设备昂贵 ,涉及EB ,操作不便 ,且DN… 相似文献
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利用PCR技术从拟南芥菜基因组DNA中扩增出一条长414bp的DNA片段。该片段被克隆到pBluescriptSK(-)手EcoRV位点上。序列分析结果证实扩增和克隆的DNA片段是分生组织特征基因LEAFY3'端的部分片,不含内含子序列。结果表明,供试果树,基因组中均存在单拷贝的LEAFY同源基因。 相似文献
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RAPD标记检测蔬菜种子纯度中DNA提取方法研究 总被引:13,自引:3,他引:10
对DNA提取方法的SDS法进行改进的研究结果表明:改进了的SDS法操作简便,操作过程可在1小时内完成,适于番茄,辣椒,黄瓜等蔬菜作物的基因组DNA提取,且宜于在种子纯度检测的RAPD分析中应用。 相似文献
10.
果树品种(品系)鉴定技术研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
研究了果树品种(品系)的鉴定技术及方法,其内容包括形态特征鉴定技术、花粉电镜扫描技术、同功酶技术及DNA分子标记技术(含RAPD,RFLP,AFLP和SSR4种),并对今后的研究方向提出了见解。 相似文献