黄麻链霉菌NF0919菌株发酵培养基的优化

以黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii)NF0919菌株发酵液对草莓炭疽病菌(Glomerella cingulata)的抑菌率为效价指标。通过单因素试验筛选出NF0919菌株发酵用最佳的碳源、无机盐和氮源,在此基础之上,再通过正交试验和二次通用旋转组合设计试验,对NF0919菌株发酵培养基进行优化。结果表明:与发酵初始培养基相比,优化后得到的最佳培养基发酵液对草莓炭疽病菌的相对毒力效价提高了13.77倍。筛选得到的最佳发酵培养基组成为:10.2%马铃薯淀粉、2.6%棉籽蛋白、0.1%CaCO3、0.05%K2HPO4、0.05%MgSO4。     

桑树内生拮抗菌Bacillus subtilis X-16发酵培养基的优化及其对桑粘格胞菌的抑制作用

采用先进的统计学方法对桑树内生拮抗菌Bacillus subtilis X-16产抗真菌活性物质的发酵培养基进行了优化,以期得到最佳的培养基配方。以效价为指标,首先采用单次单因子试验筛选出培养基中的最佳缓效碳源、速效碳源、氮源,采用正交试验得出最佳的碳氮比(C/N)和无机盐,最后采用均匀设计试验。结果表明,获得最佳培养基配方:玉米粉10.0 g、蔗糖10.0 g、酵母浸膏粉5.0 g、(NH4)2SO43.6 g、Mg SO41.0 g、水1.0 L。经摇瓶发酵试验验证,发酵液效价较基础培养基提高了170.38%。X-16菌株发酵产生的抗菌物质对桑粘格胞菌表现出强烈的抑制作用,能够引起菌丝凝聚、破裂,导致原生质外溢。     

苏云金芽孢杆菌发酵培养基的筛选

采用正交试验对BtWB7菌株发酵培养基进行筛选,结果表明,不同原料对发酵液菌数影响相差较大,其中酵母粉和鱼粉影响最大.本试验获得的最佳摇瓶发酵配方为:玉米粉4%、黄豆饼粉1%、酵母粉2%、鱼粉2.5%和蛋白胨0.1%(质量分数).     

平菇菌丝液体培养基的优化

[目的]研究平菇菌丝液体培养基的最佳配方。[方法]以平菇为试材,以菌丝干重为检测指标,筛选液体发酵培养基的最佳碳源和氮源,通过单因素试验和正交试验,研究供试菌株液体发酵的最佳培养基配方。[结果]供试菌株液体发酵的最佳培养基配方:马铃薯淀粉4%、酵母粉0.100%、硫酸镁0.15%、磷酸氢二钾0.2%。[结论]供试菌株在优化培养基配方条件下,菌丝干重有显著提高,为平菇液体菌种的培养和规模化栽培提供了理论依据。     

菌株MY02对植物病原真菌作用效果的评价

采用杯碟法测定了菌株MY02对植物病原真菌的抑菌活性。试验结果表明：菌株MY02对多种蔬菜真菌病害如番茄灰霉病、番茄叶霉病等都有较好的抑菌效果；同时进行了菌株MY02发酵液中活性组分SN06对番茄叶霉病菌的室内毒力测定，其毒力回归方程为y=2.0879X 0．7246，相关系数r=0．9653，有效中浓度EC50=111．6μg／mL；以清水为对照，菌株MY02发酵液稀释50倍液，对番茄叶霉病的的田间防效可达75．64％。     

短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)XDH菌株发酵培养基配方的研究

从泰山土壤中分离获得一株对多种动物病原细菌具有强烈拮抗作用的细菌—短短芽孢杆菌(Brevibacillus bre-vis)XDH。采用摇瓶培养法对发酵培养基配方进行了研究。通过单因素试验和均匀设计试验确定了XDH菌株发酵培养基最佳组成为:葡萄糖1.5%、黄豆饼粉3.0%、蛋白胨0.2%、NaC l 0.1%、(NH4)2SO40.5%、CaCO30.6%、MgSO40.6%。发酵液效价达到1456.8μg/mL,比基础培养基效价提高近10倍。     

灰枣红点软腐病菌拮抗菌株CN124的发酵培养基优化

为了降低灰枣红点软腐病对河南省灰枣的危害,减轻农药残留,探索灰枣红点软腐病的生物防治的途径。本研究以龟裂链霉菌菌株CN124为试材,灰枣红点软腐病菌Btryosphaeria dothidea作为目标防治菌株,采用单因子与均匀试验相结合的方法,通过均匀设计回归分析,筛选出菌株CN124对灰枣红点软腐病菌拮抗作用最佳的发酵培养基配方。结果表明,其最佳配方为:淀粉11.67%,玉米粉2.69%,(NH4)2SO40.22%,CaCO30%,NaCl 0.03%。     

饲用芽孢杆菌的筛选鉴定及固态发酵培养基的优化

为了筛选鉴定供试菌株,对其固态发酵培养基组分进行优化。从8株供试菌株中筛选出两株优良菌株B02和B06,采用形态特征和生理生化鉴定方法、16SrDNA序列测定和系统发育分析对B02和B06进行鉴定;以活菌含量为指标,通过L9(34)正交试验,对固态发酵培养基组分的不同配比进行优化。结果表明,B02为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),B06为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。B02和B06最佳培养基配比分别为麦麸695.6g/kg、豆粕87.0g/kg、玉米粉87.0g/kg、米糠130.4g/kg和麦麸761.9g/kg、豆粕95.2g/kg、玉米粉95.2g/kg、米糠47.7g/kg。B02和B06在麦麸、豆粕等发酵物料中生长良好,在优化后的培养基中培养最高活菌含量分别可以达到1013 cfu/g和1010 cfu/g以上,具有很大的开发利用潜力。     

陕北花马盐湖1株产纤维素酶真菌的鉴定及产酶条件研究

【目的】对从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选出的1株产纤维素酶菌株进行鉴定,研究该菌株的产酶条件,为嗜盐纤维素酶资源的利用提供理论依据。【方法】利用刚果红培养基从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选产纤维素酶菌株,并对其进行形态学和ITS序列鉴定,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验,优化该产酶菌株的最佳培养基配方和最佳发酵条件,并研究该产酶菌株的NaCl耐受性。【结果】从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选出1株高产纤维素酶菌株6MA1,根据形态学和ITS序列系统发育分析,将该菌鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。菌株产纤维素酶的最佳培养基配方是,玉米芯粉22.0g/L,蛋白胨6.0g/L,NaCl 4.0g/L,MgSO4·7H2O 0.55g/L,K2HPO40.5g/L;最佳发酵条件是,发酵温度28℃,发酵时间6d,起始pH 6.0,种子液接种量18%(体积分数),在此条件下菌株6MA1的CMCase活力为47.8U/mL。此外,该菌株在含0~15.0%(体积分数)NaCl的培养基中仍具有产纤维素酶活力。【结论】从陕北花马盐湖筛选出1株产纤维素酶菌株6MA1,并得到了该菌株产酶的最佳条件。     

多杀菌素生产菌株发酵配方及条件的优化

以多杀菌素产生菌C121菌株为试验菌株进行发酵培养基的研究,探索不同碳源、氮源对多杀菌素生物合成的影响。经L18(37)正交筛选试验,最终筛选到一个发酵培养基的最佳配方。用菌株C121进行摇瓶发酵条件试验的结果表明:当500 mL三角瓶中装料40 mL,消前pH 7.0,转速为210 r/min,温度为30℃时是最佳发酵条件,其发酵效价达到586μg/mL。     

乳清姜汁发酵饮料的研制

此项研究旨在利用营养丰富的乳清和药食同源的生姜为原料,开发具有营养保健功能的新型饮料-乳清姜汁发酵饮料。为饮料工业的发展开辟新领域。在研究中通过采用均匀设计的试验方法,对乳清姜汁发酵饮料发酵过程中的发酵条件进行了优化,并得出相关试验结论。其中碱性蛋白酶水解试验最优条件为,酶量为0.03%,pH值8.0,温度50℃,时间120min。乳清姜汁发酵试验最优条件为,乳酸菌种接种量为3%,乳清和姜汁的比例4:1,发酵时间5h。     

均匀设计在固定化毛霉载体配方优化中的应用

将均匀设计方法应用于固定化毛霉(Mucorsp.)载体配方优化中。在单因素实验基础上,采用U(1557)均匀设计表对影响毛霉生长的主要营养因子进行优化,利用SPSS建立了固定化毛霉对土壤中芘、苯并(a)芘(BaP)和总多环芳烃(PAHs)降解率的回归方程。结果表明,全相关系数分别达到0.999,0.997和0.997。而后通过无约束规划求解获得了固定化载体最佳配方:玉米芯92.1%,豆饼4.8%,CaSO41.6%,白糖1.4%,MgSO40.2%,有效地提高了固定化毛霉对土壤中PAHs的降解率,为将固定化微生物技术应用于非流体介质中PAHs污染的原位修复提供了可行途径,而且该载体配方用料来源广泛,成本低廉,工艺简单,安全无毒。     

正交设计和均匀设计在优化噻虫胺悬浮剂物理稳定性上的应用

【目的】比较正交和均匀设计两种多因素试验方法在水悬浮剂配方中应用的优缺点,为该方法在农药制剂学领域的应用提供参考。【方法】在采用流点法初筛得到润湿性能良好的润湿分散剂之后,分别采用正交设计和均匀设计制备30%噻虫胺悬浮剂。综合考察润湿分散剂和黏度调节剂对制剂热贮析水率、离心沉淀率、黏度、流动性、分散性、热贮前后样品的粒度分布（D₁₀、D₅₀和D₉₀）和悬浮率的影响。通过主效应图分析正交试验结果,采用逐步回归和偏最小二乘法（PLS）分析均匀试验结果,最后检验优化配方的各项性能。【结果】正交试验和均匀试验的所有样品黏度均在144.50-317.84 mPa·s,均具有良好（良级或优级）的流动性和分散性。由于奥氏熟化作用,样品经热贮后,粒子的粒径轻微增大,D₁₀、D₅₀和D₉₀分别由0.56-1.00、0.88-1.53和1.77-2.68 μm变为0.76-1.02、1.12-1.56和2.07-3.25 μm。所有样品贮前悬浮率均在91.88%-96.39%,经热贮后样品的悬浮率变化不大,分别在91.91%-96.13%,符合悬浮剂质量控制的一般要求,故本研究主要优化了热贮析水率和离心沉淀率两个指标。正交试验分析结果表明,T2700、黄原胶和硅酸镁铝的用量对热贮析水率和离心沉淀率均有显著影响,且均随用量增加而降低,而NR1601的用量对两个因变量的影响不显著。采用正交设计优化的配方,样品黏度为229.6 mPa·s,流动性和分散性良好,热贮前后悬浮率分别为（94.76±0.70）%和（93.50±0.20）%,热贮析水率为（4.23±0.19）%,离心沉淀率也低于10%。均匀设计中,PLS平方项模型对热贮析水率有良好的预测性,热贮析水率为（2.55±0.03）%,离心沉淀率也仅为（4.36±0.21）%,优化样品的黏度为324.16 mPa·s,流动性和分散性良好,热贮前后悬浮率分别为（93.19±0.09）%和（92.77±0.22）%,粒子的粒径小且分布较窄。PLS线性模型对离心沉淀率表现出良好的预测性,优化配方的离心沉淀率为（7.75±0.14）%,热贮析水率为（5.24±0.19）%。逐步回归模型对因变量的预测性均较差,优化配方也并非最优配方,热贮析水率为（9.51±0.20）%,离心沉淀率也高达（16.63±0.19）%。采用双重筛选逐步回归和PLS可以同时优化热贮析水率和离心沉淀率两个因变量,其中前者优化的模型拟合性比后者好,但其优化配方也并非最优配方。【结论】正交设计试验次数较多,但数据分析方法简单易掌握,采用主效应图结合方差分析即可有效地优化30%噻虫胺悬浮剂配方。均匀设计的稳健性差于正交设计,但其试验次数少,可有效降低试验成本,若能掌握其复杂的统计及分析方法,也可以获得理想的优化配方。     

侧孢芽孢杆菌HBL-26发酵条件的优化研究

为对拮抗菌株HBL-26的发酵培养基进行优化,通过正交试验设计对发酵液的4个单因子进行优化筛选,经软件分析后确定发酵培养基最佳配方为:葡萄糖6g.L-1、牛肉膏14g.L-1、NaCl 6g.L-1、MnSO40.05g.L-1。同时,得到回归方程:Y=5.34 X1-1.72 X2+14.44 X3-6.43 X4+8.35,其标准差S=14.23;F=4.202;显著值Sig.=0.019<0.05。最后通过单因子试验对菌株HBL-B26的发酵条件进行了优化,确定的最优培养条件为:培养基初始pH 8、发酵温度30℃、发酵最佳时间为48h。     

Optimization of fermentation technology of hawthorn-pear wine by uniform design and response surface design

Uniform design methodology and response surface methodology were used to determine the optimum conditions for hawthorn-Yali pear wine. By using uniform design, the effects of fermentation temperature, sugar content, the ratio of hawthorn to pear, soaking time of hawthorn, additional volume of SO₂, and yeast dosage on sensory quality were investigated, which indicated that the first three aspects were of great significance to the sensory quality. By using three-factor, three-level response surface methodology, a prediction model was established in the form of quadratic polynomial regression equation, with the best processing conditions hereby determined under the conditions of fermentation temperature (25.18°C), sugar content (22.00%), the ratio of hawthorn to pear (21.19:100), and the alcohol degree (11.05 (V/V %)).     

不同培养条件对球孢链霉菌JK-1生长及其产生抗菌物质的影响

[目的]研究不同培养条件对球孢链霉菌JK-1生长及其产生抗菌物质的影响,明确该菌生长及其产生抗菌物质的最适培养条件.[方法]在不同培养条件下分别测量球孢链霉菌JK-1的菌体干重,并以稻瘟菌为指示菌,采用菌丝生长速率法测定不同培养条件下JK-1发酵液的抑菌活性.[结果]在供试的7种培养基中,LB培养基最有利于菌体生长,PSB培养基最有利于产生抗菌物质.JK-1在10~35℃范围内均可以生长并产生抗菌物质,25℃为菌体生长和产生抗菌物质的最适温度.JK-1在PSB中培养5d菌体干重可达最大值,培养7d抑菌活性可达到最大值.适宜于JK-1生长及其产生抗菌物质的pH值范围为6~8,最适为pH 7.JK-1能够有效利用多种碳源和氮源进行生长和产生抗菌物质,其中分别以甘油为碳源和酪氨酸为氮源时生长最好;以麦芽糖为碳源和硫酸铵为氮源时发酵液的抑菌活性最强.[结论]球孢链霉菌JK-1生长和产生抗菌物质的最佳培养条件为pH 7的PSB培养基,25℃条件下培养7d,甘油和酪氨酸最适于该菌的菌体生长,麦芽糖和硫酸铵最适于产生抗菌物质.     

陕西及宁夏盐渍土中拮抗放线菌资源研究

以分离自盐渍土中的放线菌作为供试菌株,以养殖业中常见的9种动物病原菌作为靶标菌进行拮抗放线菌研究,并对4株优良拮抗菌株进行初步鉴定。结果表明,供试的1 172株放线菌主要以链霉菌属为主,占到88.82%,有拮抗活性的菌株551株,占到47.01%;供试放线菌对不同靶标菌的抑菌作用差异较大,对金黄色球菌和无乳链球菌拮抗效果较好;菌株01F10为白孢类群,与Streptomyces qinglanensis亲缘关系最近,序列相似度为99.11%;菌株02H13和14H03为粉红孢类群,与Streptomyces gobitricini序列相似度达到100%;菌株07F10为灰褐类群,与Streptomyces sparsus亲缘关系最近,序列相似度为99.69%。     

不同培养基成分对花叶开唇兰组织培养的影响

以花叶开唇兰的继代组培苗为材料,采用正交试验法,研究了培养基主要成分对花叶开唇兰组织培养的影响。实验结果表明:影响芽增殖的主要因素是植物激素和蔗糖浓度,芽增殖的适宜培养基为:MS+6-BA 4 mg/L+NAA 1 mg/L+2%蔗糖。影响幼苗生长的主要因素是植物激素浓度,幼苗生长的适宜培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L+2%蔗糖。