甘蔗宿根矮化病菌多克隆抗体制备及初步检测

以纯化培养的甘蔗宿根矮化病(RSD)病菌作为抗原,免疫健康家兔,制备了RSD多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附试验检测其效价,并通过斑点酶标免疫法(Dot blot enzyme immunoassays,DB-EIA)确定其工作浓度,同时与澳大利亚的抗体比较。结果表明,制备的RSD多克隆抗体效价大于1∶10000,在用DB-EIA法检测样本时的工作浓度以稀释10倍较好;与澳大利亚抗体的检测结果一致,但在印迹着色方面比澳大利亚的浅一些。试验结果表明,自制RSD抗体的效价略低于澳大利亚RSD抗体,但检测效果较好,可以满足今后在甘蔗生产上对RSD的检测要求。     

HCMV-DNA与HCMV-IgM检测在急性肺炎诊疗中的意义

目的探讨人巨细胞病毒核酸(HCMV-DNA)及免疫球蛋白M(IgM)检测在急性肺炎诊疗中的意义。方法检测216例急性肺炎患者HCMV-DNA及IgM,分析检测结果。结果 HCMV-DNA检测阳性率为22.2%(48/216),HCMV-IgM检测阳性率为26.9%(58/216);58例HCMV-IgM阳性样本中共有40例HCMV-DNA阳性,符合率为69.0%;158例HCMV-IgM阴性标本中共有150例HCMV-DNA阴性,符合率为94.9%,2种检测结果差异无显著性(χ~2=0.6251,P=0.4292)。结论对于HCMV-IgM检测阴性但疑似HCMV感染的急性肺炎患者,应予以HCMV-DNA检测,可提高HCMV感染诊断的准确性,有利于及时诊疗。     

湛江农垦蔗区甘蔗宿根矮化病调查研究

甘蔗宿根矮化病(Ratoon Stunting Disease,RSD)是一种世界性的重要甘蔗病害,对甘蔗生产为害较重。为了明确湛江农垦蔗区甘蔗RSD的发生情况,为健康种苗生产提供科学依据。本文应用斑点杂交酶链免疫法(DotBlotEnzymelinkedImmunoAssay,DB-EIA),对随机采于湛江农垦丰收、华海及广前三个主要蔗区的1935个蔗茎样品进行检测。结果表明,1935个样品中,RSD检出率为62.84%;广前公司蔗区、华海公司蔗区及丰收公司蔗区RSD发生率分别为95.3%、80.9%及41.0%;主要栽培品种新台糖22号、新台糖25号、粤糖89-113、粤糖79-177的RSD检出率分别为55.0%、54.2%、84.3%及94.8%;新植蔗发生率64.2%,宿根蔗发生率61.3%;调查的12个品种和84个甘蔗生产队均可检测出RSD。RSD在湛江农垦蔗区已普遍发生且发生率较高,主要栽培品种感病严重。     

甘蔗健康种苗田间评价试验结果分析

甘蔗宿根矮化病(Ratoon Stunting Disease,RSD)是一种世界性的危害性较严重的甘蔗病害,其较有效的防治方法是种植健康种苗.为了评价甘蔗健康种苗的田间效果,本文进行了粤糖00-236健康种苗与其普通种茎苗新植田间比较试验,并应用斑点酶链免疫试验(Dot Blot Enzyme linked Immuno Assay,DB-EIA)对种苗RSD病菌进行检测,结果表明:粤糖00-236健康种苗较其普通种茎苗蔗茎产量增产10.6 %(达显著水平,小区试验)和9.1 %(大面积示范),甘蔗蔗糖分提高0.26个百分点,且萌芽快,萌芽率较普通种茎苗提高22.94个百分点(达显著水平),粤糖00-236健康种苗的公顷有效茎数达11 400条(达极显著水平),分蘖率高3.0个百分点,但两者的茎径、生长速及茎长差异不明显.表明粤糖00-236新植健康种苗具有显著的增产效果,蔗糖分也略有提高.     

丙型肝炎病毒抗体阳性标本的确证研究

为探讨针对丙型肝炎病毒(HCV)抗体初筛阳性样本的确证试验和报告发放策略,对34份化学发光免疫测定法(CLIA)初筛阳性的标本用ELISA法和CLIA法进行二次复检,并用重组免疫印迹法(RIBA)和2种核酸(NAT)检测方法再次进行检测。结果表明:CLIA法初筛吸光度/判定阈值(D/CO)为0.9～10.0的21份样本,通过RIBA确证有6例结果为不确定,其他15例均为阴性;核酸定量及高灵敏-RNA检测表明21例均为阴性反应,可判断这21份样本均属于抗-HCV假阳性。这一研究中, CLIA法检测结果D/CO15有95%的阳性预测价值,优选NAT检测确证;D/CO10的样本有95%的阴性预测价值,建议结合临床症状及其他检测指标综合判断是否确证试验或定期复查。     

等温荧光定量沙门氏菌快速检测试剂盒的评价与应用

食源性致病菌的快速检测一直是保障食品安全的关键。沙门氏菌(Salmonella)是重要的食源性致病菌之一。本研究以沙门氏菌人工污染的3种样品为对象,对一种基于环介导等温荧光扩增技术的沙门氏菌快速诊断试剂盒进行了灵敏度和准确性评估;再以该试剂盒对市售食品样品和临床腹泻样品适用性进行验证。结果表明,该等温荧光定量沙门氏菌快速检测试剂盒的检测限为10~3 CFU/mL,准确性96.7%以上。所有不同样品的结果显示:阴性样本的假阳性率分别为0.0%、3.3%和3.3%;阳性样本检出率分别为97.9%、100.0%和65.7%(含低浓度细菌污染样品)。该试剂盒具有检测周期短、操作简便、适用性广等特点。     

新城疫抗体血凝抑制试验比对结果分析

为掌握某兽医实验室新城疫抗体血凝抑制(HI)试验能力,用新城疫标准阳性血清和阴性血清制备52份盲样,由6名检测技术员同时进行HI抗体检测。将检测结果与参考值进行比较,计算阳性、阴性一致性以及符合率,并用Win Episcope 2.0软件进行Kappa一致性检验,计算二者差值并进行统计描述。结果表明,312个检测值阳性率为13.5%,低于参考值15.4%的阳性率(p<0.01);二者阳性结果的一致性为68.8%(33/48),阴性结果一致性为96.6%(255/264),符合率为92.3%(288/312),Kappa值为0.69(95%置信区间0.58～0.80);检测值与参考值差值在2个滴度范围内浮动(95%置信区间-2.2～1.8),完全符合的占70.5%(220/312)。由此可知,该兽医实验室新城疫抗体HI试验定性结果与参考值一致性强度为高度,但在定量结果方面仍有进一步提升的空间。     

焦亚硫酸钠对雄性小鼠睾丸染色体的影响

研究焦亚硫酸钠(Na2S5O5)对雄性小鼠睾丸染色体的影响.取25只雄性昆明种小鼠随机分成阴性对照组、阳性对照组和3个剂量组,每组5只.分别按高、中、低剂量(150,75,37.5 mg/kg) Na2S2O5,进行灌胃,阴性对照组用等体积的生理盐水进行灌胃,阳性对照组用40 mg/mL环磷酸胺进行灌胃,1次/d,连续7d.第14天处死小鼠,取睾丸制染色体片,然后观察,进行染色体结构畸变率分析.结果为,焦亚硫酸钠高、中、低剂量组的染色体畸变率分别是5.0%,4.33%,3.33%,与阴性对照组4.0%相比,差异不显著.阳性对照组的染色体畸变率为25.67%,与阴性对照组比较差异极显著(P<0.01).可知,在本试验条件下,表明焦亚硫酸钠不具有生殖毒性.     

32例婴儿黄疸99mTc-EHIDA肝胆动态显像结果分析

目的探讨99m Tc-EHIDA肝胆动态显像在先天性胆道闭锁和婴儿肝炎综合征鉴别诊断中的临床价值。方法回顾性分析32例婴儿黄疸患儿的肝胆动态显像资料及临床资料。结果 99m Tc-EHIDA肝胆显像诊断先天性胆道闭锁的特异度为100%(19/19),灵敏度为84.6%(11/13),阳性率100%(11/11),阴性率90.5%(19/21),预测准确性为93.7%(30/32)。结论99m Tc-EHIDA肝胆动态显像是一种安全、有效、无创性的检查方法,对于先天性肝胆闭锁和婴儿肝炎综合征的鉴别诊断有较高的临床价值。     

尿液中白细胞干化学法与显微镜法比较研究

目的:对尿液中白细胞干化学法与显微镜法进行比较并分析。方法:选取2016年1月至2017年1月在我院门诊进行尿液检测的622例患者作为此次研究对象,分别使用干化学法及显微镜法,在2h内要完成对尿液的检测,对两种检测方法进行比较。结果:两种检测方法的总符合份数为514份(476+10+4+2+22),总符合率为82.6%(514/622),阴性符合率为92.6%(476/514),总阳性符合率为39.5%,([10+4+2+22]/[28+24+22+22])。根据检测结果得知两种不同检测方法的阴性符合率要高于阳性符合率,尿液分析仪的阳性检测结果要高于显微镜检测的结果。结论:为了防止患者出现误诊、漏诊,应使将干化学法与显微镜法相结合,不仅提高了检出率也保证了检测的准确性。     

热水处理防治甘蔗宿根矮化病的效果及对再生植株影响研究*

 甘蔗宿根矮化病（Ratoon Stunting Disease,RSD）在我国蔗区普遍发生,研究其防治方法十分必要。应用50 ℃ 2 h热水处理严重感染RSD的粤糖00-236,新台糖22号种茎,用斑点酶标记免疫试验（Dot blot enzyme immunoassays,DB-EIA）检测RSD病原菌（Leifsonia xyli subsp. xyli,Lxx）,研究热水处理脱菌效果;并以粤糖00-236热水处理种茎与未处理种茎进行田间对比试验,研究热水处理对种茎再生植株的影响。结果表明:50 ℃ 2 h热水处理种茎可极显著的杀死感病种茎中的RSD病原细菌Lxx,对RSD有较好的防效,但不能彻底去除感病种茎中的Lxx。与未经热水处理种茎再生植株相比,经热水处理的粤糖00-236感病种茎再生植株的茎长、节间长度、一茎重显著增加,有效茎数极显著增多,生长速度加快,蔗茎产量增加23.2%,但成熟期甘蔗品质几乎无差异。另外,热水处理对种茎蔗芽有损伤,降低了种茎萌芽率。结果表明:50 ℃ 2 h热水处理甘蔗种茎能有效的防治甘蔗RSD,促进甘蔗生长,具有显著的增产效应。     

广西主要蔗区甘蔗宿根矮化病调查

[目的]调查广西主要蔗区甘蔗宿根矮化病(Ratoon stuning disease,RSD)的发生情况,了解其分布、危害程度及发生规律,为推广甘蔗健康种苗,有效防控RSD提供科学依据.[方法]2013~2014年在广西9个糖料蔗主产区进行RSD发生情况调查和田间取样,采用PCR对采集的蔗茎样品进行RSD检测,并按不同蔗区、不同品种、不同植期、不同蔗地类型的发病率分析广西蔗区RSD发生状况.[结果]在278个样品中有198个样品检测出RSD,检出率为71.2%;调查的9个主产区均检测出RSD,阳性检出率在58.3%~100.0%;采集的27个甘蔗品种(系)均检测出RSD,其中主栽品种ROC22发病严重,RSD检出率达80.8%;新植蔗的RSD检出率为36.0%,宿根蔗的RSD检出率为75.7%,宿根年限越长,RSD检出率越高;旱地蔗的RSD发病率比水田高18.1%(绝对值).[结论]RSD在广西普遍发生且发生严重,生产中急需推广甘蔗温水脱毒种苗和选育高抗且综合性状优良的甘蔗品种.     

白藜芦醇浸提及纯化过程在线检测方法研究

[目的]比较并筛选出适用于白藜芦醇在线检测的方法。[方法]通过试验对比了高效液相色谱(HPLC)和紫外分光光度(UV)法测定花生根白藜芦醇的异同。[结果]从线性相关性看,R(UV)=0.999 6,R(HPLC)=0.999 8,2种方法都有良好的线性度,都适用于花生根白藜芦醇的检测;从精密度[RSD(HPLC)=1.87%,RSD(UV)=2.52%]和回收率[HPLC 98.8%～101.2%,RSD为1.25%;UV法97.8%～103.5%,RSD为2.25%]看,HPLC法优于紫外分光光度法;从平均测得结果看,紫外分光光度法测得白藜芦醇含量为0.699 1%、RSD=2.52%(n=4),HPLC法测得白藜芦醇含量为0.690 4%,RSD=1.87%(n=4),2种方法结果相近。[结论]本着在线监测和仪器的普适性,紫外分光光度法更有优势,更适用于花生根白藜芦醇的检测。     

小麦茎秆维管束发育与穗部性状关系的研究

试验采用石蜡连续切片法，对小麦４个春性品种和３个半冬性品种的茎秆维管束形成发育与穗部性状的关系进行了观察，结果表明：（１）分蘖节中心空间绝大部分为维管束群所占据。小麦茎生长锥伸长期是分蘖节中大维管束数目的最终决定期。（２）主茎基部伸长节间与穗下节间大维管束的比例关系为３：２．基部节间大维管束数与分化小穗数呈极显著正相关，穗下节间大维管束数与分化小穗数接近１：１的对应关系。（３）小麦节部的维管束联络结果为：节部的维管束粗大，成为茎内椭圆形大维管束，呈横行或倾斜状态。椭圆形维管束产生分枝、联合，形成分散维管束，包围着大维管束，并和边缘小维管束相连。大维管束在节板处与节网维管束相连，从叶鞘进入节部的维管束位于茎轴边缘，汇入边缘小维管束环。     

高效液相色谱法测定红树莓中鞣花酸含量

[目的]建立红树莓提取物中鞣花酸含量的HPLC测定方法,为开发鞣花酸保健品和食品提供理论基础。[方法]色谱条件:ODSHYPERSLC18柱(100 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,用CH3OH-三氟乙酸(0.3%)(体积比50∶50)作为流动相,检测波长为254nm,用外标法测定鞣花酸含量。[结果]结果表明,鞣花酸含量在0.322～8.050μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9。精密度试验RSD为0.46%,重现性试验RSD为0.97%,稳定性试验RSD为0.99%,平均加样回收率为93.78%,RSD为0.98%,最后测得鞣花酸含量可达230 mg/kg。[结论]红树莓中鞣花酸的含量均高于所报道的其他水果,可更进一步对其机理进行研究。     

高效液相色谱法测定中药复方透皮软膏中绿原酸和咖啡酸的含量

建立了同时测定中药复方透皮软膏中绿原酸和咖啡酸含量的高效液相色谱方法.采用Shim-pack VP-ODS( 150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈和0.1％磷酸溶液(体积比为9∶91)为流动相,等度洗脱,327 nm处检测,绿原酸和咖啡酸分别在0.078～0.786 μg/mL(R2=0.9997)和0.042～0.420 μg/mL (R2=0.999 5)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.95％和100.06％,RSD分别为0.42％和1.35％.结果表明,此方法灵敏度高、操作简便、结果准确、重复性好,可用于中药复方透皮软膏中绿原酸及咖啡酸含量测定.     

气相色谱法检测宁夏枸杞中联苯菊酯残留量

以宁夏中宁枸杞为研究对象,建立了检测枸杞中联苯菊酯残留量的毛细管气相色谱法.试样用乙腈提取,过CARB/NH2固相萃取柱,经丙酮/二氯甲烷净化洗脱,再过Florisil柱,经正己烷/二氯甲烷淋洗除杂,乙酸乙酯洗脱,正己烷定容,采用DB-1701毛细管色谱柱分离,GC-ECD进行分析.结果表明,中宁枸杞中联苯菊酯含量为0.002 2 μg/g,RSD为3.55％,样品加标回收率为92.47％,RSD为1.70％.该方法简便、快速、灵敏、准确,符合农药残留分析要求,研究结果为枸杞质量控制提供了一定的参考价值.     

广东甘蔗宿根矮化病菌的分离培养及鉴定

利用改良的SC培养基,从甘蔗蔗汁中分离培养到一种杆状细菌,根据菌落的形态特征,并结合血清学和PCR检测方法,确认所分离到的菌是甘蔗宿根矮化病的致病菌Leifsonia xyli subsp.xyli.该菌的分离培养在广东还是首次报道,这使分离高纯度的甘蔗宿根矮化病菌DNA成为可能,促进了该菌以DNA为基础的检测方法的发展,同时也为今后对该菌开展遗传多样性等研究奠定了基础.     

GC-MS法测定电子烟烟油中17种邻苯二甲酸酯类化合物

[目的]建立同时检测电子烟烟油中17种邻苯二甲酸酯类化合物的气相色谱-质谱(GC-MS)分析方法。[方法]样品经正己烷提取,超声萃取,过0.45μm滤膜,GC-MS选择离子监测模式(SIM)测定17种邻苯二甲酸酯类化合物。[结果]17种邻苯二甲酸酯类化合物的线性范围为50~800 ng/m L,相关系数均大于0.990 0,方法的检出限为0.08~0.28 mg/kg,定量限为0.25~0.95 mg/kg。3个加标水平的平均回收率为83.16%~107.99%,相对标准偏差(RSD)在0.97%~4.35%。该方法可应用于6种不同品牌电子烟烟油中塑化剂的测定。[结论]该方法稳定、可靠、操作简单,适用于电子烟烟油中邻苯二甲酸酯类化合物的检测与确证。