差异显示法克隆水稻抗白叶枯病相关蛋白激酶基因

利用已知植物的蛋白激酶及抗病基因氨基酸序列，设计含激酶保守功能域的简并引物，运用ｍＲＮＡ差异显示技术显示经病原菌诱导的抗性品系及感病品系愈伤组织ｍＲＮＡ表达差异，并对差异片段分子克隆。     

差异显示法克隆水稻抗白叶枯病相关蛋白激酶基因(英文)

利用已知植物的蛋白激酶及抗病基因氨基酸序列,设计含激酶保守功能域的简并引物,运用ｍＲＮＡ差异显示技术显示经病原菌诱导的抗性品系（ＩＲ２６）及感病品系（金刚３０）愈伤组织ｍＲＮＡ表达差异,并对差异片段分子克隆．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果提示克隆片段确受白叶枯病病菌诱导表达且该基因仅在抗性品系ＩＲ２６中存在高水平表达．     

mRNA差异显示技术在分离水稻抗性基因中的应用

mRNA差异显示技术从问世至今,在分离水稻抗性基因中得到了广泛的应用,通过对差异表达基因进行分析,能够进一步阐明水稻的抗性机理.对近年来mRNA差异显示法分离水稻抗性基因的研究做了总结,并从引物改进、PCR退火温度、dNTP浓度的改进、胶浓度的选择、标记方法的改进和差异片段验证方法的改进7个方面对mRNA差异显示技术的优化做了简单阐述.     

mRNA差异显示法分离与水稻籼粳亚种间杂交稻低温敏感不育性相关的cDNA片段

采用mRNA差异显示法对籼粳亚种间杂交稻亚优2号幼穗发育基因在两种不同温度条件下的表达差异进行了研究。结果发现,对照(正常温度28～30℃)和低温处理(白天24℃、夜晚20℃)的幼穗发育基因在转录水平上存在差异。从获得的35条差异片段中随机选取6条进行克隆测序,结果发现其中有1条片段长为556bp,暂命名为DF9,该片段与水稻第一染色体上一段cDNA序列有99%的同源性;其他5条片段与水稻的EST存在一定的同源性。进一步研究发现,DF9可能编码的产物与一些参与信号传导或能量代谢过程的酶存在不同程度的相似性。推测其与水稻籼粳亚种间杂种低温敏感不育性有关。     

采用mRNA差异显示技术分离辣椒抗黄瓜花叶病毒病相关基因片断

为探索辣椒黄瓜花叶病毒(CMV)的抗性相关基因,采用mRNA差异显示技术探讨抗、感辣椒在接种CMV前后基因表达的差异.对获得的87个差异片断进行回收、重扩增和克隆后共获得26个阳性克隆.数据库比对分析结果表明,仅有7个cDNA克隆在GenBank中找到了相似的功能,与能量代谢、转录因子和代谢酶有关,其余cDNA片断在数...     

利用差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因

用辣椒疫霉菌对8叶期的辣椒品种茄门和93-100-17-1-0进行诱导处理,提取接种前后的总RNA,利用mRNA差异显示技术,结合植物抗病基因保守结构域,将DDRT-PCR的一端引物为oligo(dT)15A／G／C,另一端为来源于不同抗病基因同源序列的简并引物B1／C1／D1,其扩增产物在6％聚丙烯酰胺凝胶上得到两个差异表达的带,回收差异片段并克隆到T-载体上测序,经BLAST检索,发现为两个新的序列,GenBank登录号为AY497910,AY497911。     

利用mRNA差异显示技术筛选棉纤维发育相关基因

优良品种的选育对棉花生产有着其他技术不可替代的作用.研究细胞分化的内在机理,可为通过遗传工程途径人为控制棉纤维生长发育,选育优良农艺性状的新种质提供依据[1].     

mRNA差异显示技术概述

基因表达差异的检测和识别方法在生命科学研究中具有十分重要的意义,文章就其中一种近年使用率较高的mRNA差异显示技术的原理、优缺点及该技术的改进做了简要分析,并对该技术一些较新的应用做了简单介绍。     

mRNA差异显示法筛选环磷酰胺致突变相关基因的初步研究

为建立在药物致突变研究中应用银染mRNA差异显示的方法,试验提取未经过和经过环磷酰胺处理的BALB／e小鼠脾组织的总RNA,并以此为模板,采用dT12CG、dT22AG、dT12GG为锚定引物,通过反转录、差异显示PCR反应,6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带,回收后将其再扩增。对扩增条带进行克隆、测序。经Blast搜索,发现2条新的基因片段,为进一步研究致突变效应奠定了基础。     

mRNA差异显示分离棉花抗旱耐盐基因的相关cDNA片段

采用mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术,对抗旱、耐盐棉花品种(品系)分别进行25%PEG6000和1.3%NaCl胁迫诱导,利用优化的蛋白酶K法分别提取胁迫与非胁迫棉花叶片中的总RNA,以此为模板,选用12个锚定引物和20个随机引物的240个组合进行RT-PCR,产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染,共获得88条差异条带,二次PCR扩增,选择出41条表达稳定的差异条带。     

水稻品种抗稻瘟病的遗传分析

 用13个水稻品种与广谱感病品种丽江新团黑谷杂交,用7个稻瘟病菌生理小种(ZA₁,ZB₁₃,ZC₁₃,ZD₁,ZE₁,ZF₁,ZG₁)分别对亲本、F₁和F₂代植株进行接种测定,分析13个品种的基因组成。结果表明:94.5%抗性呈显性,5.5%抗性呈隐性。13个品种对2个测试小种的抗性多数受一对或两对显性基因控制(3:1或15:1),少数受两对抑制基因控制(13:3)或两对显性互补基因控制(9:7)以及三对显性基因控制(63:1)。基因分析结果还表明,13个品种至少各含有两对不尽相同的抗瘟性基因。故认为,品种属于不同的抗源。就抗病品种作母本或父本情况看,稻瘟病抗性属细胞核遗传。     

水稻抗稻瘟病育种方法概述

本文综述了抗稻瘟病育种的各种技术,主要包括杂交育种、诱变育种、细胞育种和分子育种。     

水稻主要抗瘟基因对吉林省稻瘟病菌的抗性评价

稻瘟病菌存在不同的生理小种(或株系),不同抗瘟基因对稻瘟病菌的不同株系具有不同的抗性。测定了17种抗瘟单基因对吉林省稻瘟病菌的抗性频率和基因组合的联合抗性频率。结果表明:Pi-kp、Pi-9(t)、Pi-ta2、Pi-z抗瘟单基因对吉林省稻瘟病菌的抗性较强,抗谱在80%以上,尤其是Pi-z的抗谱达到95%;基因组合的联合抗性频率比单个基因均不同程度提高,中等抗谱的基因间组合提高明显,选择合适的基因进行组合应用可以显著提高抗性。     

水稻品种稻瘟病抗病性分析

本文对24个当地推广的水稻品种的稻瘟病进行调查和分析.品种的抗病性,与稻株的形态、组织结构有关,稻株叶片宽阔,披度越接近水平的品种,发病较重;叶片较窄直立上举型,发病较轻或不发病;组织柔嫩,叶片浓绿的发病较重;植株贪青徒长,氮肥过多发病重.鉴定出的抗病品种有:特优8、农大8、特优8-2、九稻44、辽265、梗89、超级稻、通223、通313、通308、吉205.     

日本两套稻瘟病鉴别菌系鉴定我国水稻品种的抗性基因

 1985～1989年,本研究用两套日本稻瘟病鉴别菌系和138A小种测定了我国114个水稻品种,研究结果表明:有11个品种具有Pi-k^s基因,有6个品种具有Pi-a基因,有12个品种具有Pi-i基因,有10个品种具有Pi-k(或Pi-k^m)基因,有6个品种具有Pi-z基因,有4个品种具有Pi-ta基因,有13个品种具有Pi-ta²基因,有1个品种具有Pi-z^t基因,有11个品种具有Pi-i Pi-k基因,有4个品种抗性基因不明,有36个品种尚待进一步用Th78-01和138A进行鉴定,Pi-k与Pi-k^m待有017小种鉴定再加以区分。     

吉林省水稻新品种(系)稻瘟病抗性鉴定

2001～2003年对参加吉林省区域试验的23个水稻新品种进行了3年的苗期人工接种和异地病圃自然诱发抗稻瘟病的鉴定。结果表明,所有参试品种对苗瘟和叶瘟的抗性较好,对穗瘟病的抗性表现较差,在所有的参试品种中无高抗穗瘟的品种,所以,在选育过程中应加强对抗稻瘟病品种的研究。     

水稻抗稻瘟病广谱基因型鉴定及稻瘟病菌生理小种型研究

水稻稻瘟病是世界范围内水稻主要病害之一。掌握水稻广谱抗病基因型及病原菌的致病特征特性,对培育抗病品种、指导品种布局具有重要意义。通过抗稻瘟病单基因系水稻品种与稻瘟病菌互作,鉴定出Pi19、Pi20、Pi12、Pi9、Piz5、Piz-t为吉林省水稻广谱抗病基因型,筛选出2014-17-1,2014-66-1等可用于抗性评价标准菌株,建立了一套以IRBL9-W(Pi9)、IRBL12-M([Pi12(t)]、IRBLta-CT2(Pib)、IRBLz-Fu(Piz)、IRBL5-M[Pi5(t)]、IRBLkm-Ts(Pik-m)、IRBLta2-Pi(Pita-2)这7个抗稻瘟病单基因系品种组成的生理小种鉴定体系,优势小种不显著。